Moxi Go II快速流式細(xì)胞儀應(yīng)用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎療法的研究

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一種全身性的自身免疫性疾病,以炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和滑膜細(xì)胞增生為特征。該疾病導(dǎo)致軟骨和骨骼損傷、關(guān)節(jié)畸形甚至殘疾，但現(xiàn)有治療藥物的毒性高、傳遞效率低，無法有效阻止其發(fā)展，因此仍以控制病情、減少致殘率和改善患者的生活質(zhì)量為主。

鐵死亡是一種鐵依賴性的新型細(xì)胞程序性死亡方式。在腫瘤、RA等炎癥微環(huán)境中，過氧化氫(H₂O₂)富集，可通過Fe²⁺介導(dǎo)的費(fèi)托反應(yīng)催化生成高毒性的•OH。•OH誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化，繼而損傷浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞和增殖的成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞，因此在RA治療中鐵死亡具有很大的研究潛力。

2023年12月來自江蘇大學(xué)藥學(xué)院及附屬醫(yī)院的研究團(tuán)隊(duì)在《Materials Today Bio》上發(fā)表一種治療RA的新方法：用工程巨噬細(xì)胞作為載體，遞送Fe₃O₄和柳氮磺胺吡啶（sulfasalazine，SSZ），用于RA的鐵死亡和光熱療法。Fe₃O₄是一種磁性納米材料，可以通過外加磁場(chǎng)實(shí)現(xiàn)對(duì)巨噬細(xì)胞的定向操控。SSZ是一種常用的抗風(fēng)濕藥物，具有抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用。研究者利用巨噬細(xì)胞固有的炎癥趨化性和對(duì)納米顆粒的保護(hù)作用，將Fe₃O₄和SSZ有效運(yùn)送到RA組織中，在近紅外光（NIR）照射下產(chǎn)生熱量，破壞巨噬細(xì)胞，釋放Fe₃O₄納米顆粒和SSZ，誘導(dǎo)細(xì)胞鐵死亡。鐵死亡和光熱效應(yīng)有效地破壞了駐留的炎癥細(xì)胞和增殖的滑膜，對(duì)RA有明顯的治療作用（如Fig 1所示）。

文章中使用熒光染料FITC和DOX標(biāo)記Fe₃O₄納米顆粒（NPs）與巨噬細(xì)胞共孵育，使用Orflo Technologies公司的快速流式細(xì)胞儀Moxi Go II，定量分析巨噬細(xì)胞對(duì)FITC標(biāo)記Fe₃O₄的攝取時(shí)間和濃度摸索（Fig 2），在4h和40μg/mL為最佳孵育時(shí)間和濃度；定量分析DOX標(biāo)記Fe₃O₄ NPs的細(xì)胞攝取情況（Fig 3）。結(jié)果顯示，DOX標(biāo)記的Fe₃O₄ NPs在巨噬細(xì)胞中的攝取能力強(qiáng)于對(duì)游離DOX的攝取。

Fig 2. (c) Fe₃O₄-FITC孵育不同時(shí)間(0.5、1、2、4 h)后巨噬細(xì)胞的流式分析
(d) FITC濃度為10、20、40、80μg/mL時(shí)，F(xiàn)e₃O₄-FITC孵育后巨噬細(xì)胞的流式分析

Fig 3 (a)培養(yǎng)4小時(shí)后，巨噬細(xì)胞內(nèi)化游離DOX或Fe₃O₄-DOX NPs的流式檢測(cè)
(b)流式細(xì)胞術(shù)定量分析游離DOX和Fe₃O₄-DOX的平均熒光強(qiáng)度

綜上所述，本文開發(fā)了一種新的基于巨噬細(xì)胞的靶向納米顆粒遞送平臺(tái)，F(xiàn)e₃O₄-SZZ能被巨噬細(xì)胞有效吸收，增加SZZ負(fù)載能力，為炎癥藥物遞送提供了一種策略，也證明了鐵死亡和光熱治療聯(lián)合治療在RA治療方面的巨大潛力。

Moxi GO II快速流式細(xì)胞儀，采用庫爾特原理進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和粒徑測(cè)量，同時(shí)采用488nm激光光源，結(jié)合兩個(gè)PMT通道，525/45nm通道和561nm/LP（或者646nm/LP，可根據(jù)需要更換），進(jìn)行細(xì)胞活率、細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)染效率、活性氧簇、線粒體膜電位等常規(guī)流式檢測(cè)。儀器設(shè)計(jì)小巧輕便，無需預(yù)熱，開機(jī)即用，預(yù)設(shè)程序，觸屏操控，運(yùn)行后10秒即可給出測(cè)試結(jié)果，使用后也無需清潔維護(hù)。無論是經(jīng)驗(yàn)豐富的流式專家，還是初試身手的實(shí)驗(yàn)小白，Moxi Go II都可以助您輕松完成實(shí)驗(yàn)。

美國(guó)Orflo Technologies公司是一家非常專業(yè)的細(xì)胞分析儀器研發(fā)和制造企業(yè)，擁有多項(xiàng)專利技術(shù)，產(chǎn)品以庫爾特原理的高精細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和超快流式細(xì)胞儀為主。

環(huán)亞生物，生命科學(xué)產(chǎn)品全國(guó)性代理商，不斷把國(guó)外頂級(jí)的創(chuàng)新產(chǎn)品引入中國(guó)。環(huán)亞生物具備完善的公司運(yùn)營(yíng)、產(chǎn)品管理、營(yíng)銷、售前技術(shù)支持和售后維修體系。作為Orflo Technologies中國(guó)地區(qū)獨(dú)家代理，環(huán)亞生物科技有限公司全權(quán)負(fù)責(zé)Orflo Technologies產(chǎn)品在中國(guó)地區(qū)的推廣、銷售，為廣大用戶提供專業(yè)的技術(shù)咨詢和產(chǎn)品服務(wù)。

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https://doi.org/10.1016/j.mtbio.2023.100925


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