臺盼藍染色原理及細胞計數(shù)的操作流程與注意事項
臺盼藍染色原理
臺盼藍（Trypan blue）是一種細胞活性染料，常用于細胞計數(shù)和細胞活力檢測。它可以通過細胞膜進入細胞，并與細胞內(nèi)的核酸結合，使細胞呈現(xiàn)藍色。對于喪失活性或細胞膜不完整的細胞，其細胞膜通透性增加，臺盼藍染料可以進入細胞內(nèi)，使細胞染成藍色。通過觀察被染成藍色細胞的數(shù)量，即可得出對應的細胞濃度。
細胞計數(shù)的操作流程
1-準備工作
·準備細胞懸液：將待檢測的細胞培養(yǎng)至適當濃度，收集細胞并制備成細胞懸液。
·準備臺盼藍染料：將0.4臺盼藍染料用PBS緩沖液稀釋至0.2%。
·準備細胞計數(shù)儀和計數(shù)板：使用全自動細胞計數(shù)儀（JSY-SC-031H）和血細胞計數(shù)板、蓋玻片進行細胞計數(shù)。
·準備移液器和吸頭：使用移液器和吸頭吸取細胞懸液和臺盼藍染料。
2-加入臺盼藍染料
·取適量的細胞懸液與離心管中。
·加入等量的臺盼藍染料（0.2%），再用移液槍輕輕吹打混勻。
3-上機檢測
·用移液器取10uL細胞混合液，加入血細胞計數(shù)板中。
·將加樣后的血細胞計數(shù)板放至細胞計數(shù)儀（JSY-SC-031H）的載物臺上，選擇對應的計數(shù)模式，即可開始細胞計數(shù)分析（濃度計算公式=（四個大方格內(nèi)細胞數(shù)之和）/4×（稀釋倍數(shù)）×104）。
4-查看結果數(shù)據(jù)
計數(shù)完成后，點擊數(shù)據(jù)詳情，查看細胞濃度、細胞直徑、細胞聚團率等數(shù)據(jù)。
注意事項
1-臺盼藍染料具有一定毒性，操作時需佩戴手套和口罩，避免接觸皮膚和吸入氣體。
2-臺盼藍染料需避光保存，避免陽光直射。
3-臺盼藍染料適用于大多數(shù)細胞類型，但無法很好的區(qū)分細胞和雜質(zhì)，因此不適用于原代細胞、PBMC等含有大量雜質(zhì)碎片的細胞類型。
4-加樣前，可將臺盼藍靜置數(shù)分鐘，取上層。
5-加樣時，應盡量避免氣泡的產(chǎn)生，以免影響細胞計數(shù)的結果。
臺盼藍染料是一種常用的細胞活性染料，可用于細胞計數(shù)和活力檢測。在使用臺盼藍染料進行細胞計數(shù)時，需要注意操作流程和注意事項，以確保結果的準確性。
臺盼藍（Trypan blue）是一種細胞活性染料，常用于細胞計數(shù)和細胞活力檢測。它可以通過細胞膜進入細胞，并與細胞內(nèi)的核酸結合，使細胞呈現(xiàn)藍色。對于喪失活性或細胞膜不完整的細胞，其細胞膜通透性增加，臺盼藍染料可以進入細胞內(nèi)，使細胞染成藍色。通過觀察被染成藍色細胞的數(shù)量，即可得出對應的細胞濃度。
細胞計數(shù)的操作流程
1-準備工作
·準備細胞懸液：將待檢測的細胞培養(yǎng)至適當濃度，收集細胞并制備成細胞懸液。
·準備臺盼藍染料：將0.4臺盼藍染料用PBS緩沖液稀釋至0.2%。
·準備細胞計數(shù)儀和計數(shù)板：使用全自動細胞計數(shù)儀（JSY-SC-031H）和血細胞計數(shù)板、蓋玻片進行細胞計數(shù)。
·準備移液器和吸頭：使用移液器和吸頭吸取細胞懸液和臺盼藍染料。
2-加入臺盼藍染料
·取適量的細胞懸液與離心管中。
·加入等量的臺盼藍染料（0.2%），再用移液槍輕輕吹打混勻。
3-上機檢測
·用移液器取10uL細胞混合液，加入血細胞計數(shù)板中。
·將加樣后的血細胞計數(shù)板放至細胞計數(shù)儀（JSY-SC-031H）的載物臺上，選擇對應的計數(shù)模式，即可開始細胞計數(shù)分析（濃度計算公式=（四個大方格內(nèi)細胞數(shù)之和）/4×（稀釋倍數(shù)）×104）。
4-查看結果數(shù)據(jù)
計數(shù)完成后，點擊數(shù)據(jù)詳情，查看細胞濃度、細胞直徑、細胞聚團率等數(shù)據(jù)。
注意事項
1-臺盼藍染料具有一定毒性，操作時需佩戴手套和口罩，避免接觸皮膚和吸入氣體。
2-臺盼藍染料需避光保存，避免陽光直射。
3-臺盼藍染料適用于大多數(shù)細胞類型，但無法很好的區(qū)分細胞和雜質(zhì)，因此不適用于原代細胞、PBMC等含有大量雜質(zhì)碎片的細胞類型。
4-加樣前，可將臺盼藍靜置數(shù)分鐘，取上層。
5-加樣時，應盡量避免氣泡的產(chǎn)生，以免影響細胞計數(shù)的結果。
臺盼藍染料是一種常用的細胞活性染料，可用于細胞計數(shù)和活力檢測。在使用臺盼藍染料進行細胞計數(shù)時，需要注意操作流程和注意事項，以確保結果的準確性。
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