十四大質(zhì)譜常見(jiàn)問(wèn)題及處理方法的介紹

1、質(zhì)譜不出峰的可能原因？
答：1）進(jìn)樣系統(tǒng)與離子源沒(méi)連接或有漏液
2）六通閥漏液
3）霧化氣沒(méi)開
4）噴霧電壓沒(méi)有
5）離子進(jìn)入分析器的離子通道堵塞
6）噴霧毛細(xì)管堵塞

2、如何根據(jù)樣品選擇離子源？
答：可根據(jù)分子量的大小、極性。APCI適合小分子，極性小的化合物；ESI適合分析的分子量范圍較大、分子要求帶有一定極性。一般先考慮用ESI分析，如果極性實(shí)在太小，才想到用APCI。

3、等度還是梯度洗脫如何選擇？
答：其實(shí)只做一兩個(gè)化合物，是等度洗脫好，速度快，但也并非越快越好，特別在分析生物樣品時(shí)，考慮到基質(zhì)效應(yīng)，保留因子控制在2-3左右較好。梯度洗脫適合分析多個(gè)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì)，如化合物與代謝產(chǎn)物一同鑒定的時(shí)候，比如苷和苷元的一同測(cè)定。另外很多做合成化學(xué)的分析實(shí)驗(yàn)室用的也是一通用的梯度洗脫方法，一個(gè)方法搞定大部分樣品。一般來(lái)說(shuō)對(duì)于組成簡(jiǎn)單的樣品可以采用等度洗脫，而對(duì)于那些復(fù)雜的樣品分離通常需要進(jìn)行梯度洗脫。

4、氣質(zhì)和液質(zhì)系統(tǒng)對(duì)比？
答：除了采用的分離手段不同（氣相和液相）外主要的區(qū)別在于真空系統(tǒng)和電離方式。氣質(zhì)的真空系統(tǒng)比較簡(jiǎn)單，只要一個(gè)小的機(jī)械泵和一個(gè)分子渦輪泵就可以了。液質(zhì)的機(jī)械泵要比氣質(zhì)大，需要兩個(gè)分子渦輪泵。氣質(zhì)的電離方式有電子電離(EI)和化學(xué)電離(CI)。液質(zhì)的電離方式有電噴霧電離(ESI)、大氣壓化學(xué)電離(APCI)和大氣壓光電離(APPI)。

5、APCI和ESI的不同點(diǎn)？
答：1）離子產(chǎn)生的方式不同。APCI利用電暈放電離子化，氣相離子化。ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。

2）能被分析的化合物類型不同。APCI適合弱極性，小分子化合物，且具有一定的揮發(fā)性；ESI 極性化合物和生物大分子。

3）流速不同。ESI一般流速較小，約0.001到0.25 mL/min，APCI 相對(duì)較大，約0.2到2 mL/min。

4）多電荷。APCI不能生成一系列多電荷離子，所以不適合分析大分子；ESI 能生成一系列多電荷離子，特別適用于蛋白，多肽類等生物分子。

6、CID和CAD區(qū)別？
答：CID，碰撞誘導(dǎo)解離。通常在真空接口處調(diào)節(jié)電壓發(fā)生CID現(xiàn)象，一般是去除溶劑，如果電壓增大，也會(huì)產(chǎn)生碎片離子。這是一級(jí)質(zhì)譜的原理。CAD碰撞活化解離。做二級(jí)質(zhì)譜時(shí)，選擇的母離子進(jìn)入Q2后，碰撞活化產(chǎn)生子離子，這個(gè)過(guò)程稱為 CAD。以API3200譜儀為例，CID指的是Q0里面的誘導(dǎo)碰撞的氣體，CAD指的是Q3里面的誘導(dǎo)碰撞氣體。也就是說(shuō)，在這里的CID&CAD都是指氮?dú)狻?/span>

7、氮?dú)獍l(fā)生器該使用嗎？
答：氮?dú)獍l(fā)生器的工作原理是分離空氣，電解膜的負(fù)極側(cè)發(fā)生氧化反應(yīng)，“吃掉”空氣中的氧化性氣體，在正極側(cè)還原，空氣流過(guò)電解池后就只剩下氮?dú)夂投栊詺怏w。故國(guó)內(nèi)發(fā)生器的純度大多標(biāo)有“相對(duì)含氧量”。氮?dú)獾募兌群涂諝饬魉�、有效分解面的長(zhǎng)度、電解電勢(shì)的強(qiáng)弱都有關(guān)系。這種分離方法也決定了氮?dú)獾募兌炔豢赡茏龅暮芨�。加入電解質(zhì)的作用就是提高水的導(dǎo)電率，使電化學(xué)反應(yīng)能順利進(jìn)行。發(fā)生器對(duì)質(zhì)譜的影響有一點(diǎn)常常被忽略，就是發(fā)生器內(nèi)的開關(guān)電源工作時(shí)會(huì)對(duì)電網(wǎng)電壓造成一定的干擾（壓縮機(jī)的啟動(dòng)和停止也會(huì)）。

8、串聯(lián)質(zhì)譜如何定量？
答：串聯(lián)質(zhì)譜定量時(shí),是以后面產(chǎn)生的碎片峰（子離子）定量。但是這一子離子是由母離子在碰撞室產(chǎn)生的特征性碎片，所以用MRM定量靈敏度會(huì)比用SIM定量好很多。建立方法的步驟是：用一定溶度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液（1-10 ug/mL）調(diào)諧化合物的一級(jí)質(zhì)譜條件，找到母離子的最佳質(zhì)譜條件。然后對(duì)母離子進(jìn)行打碎，優(yōu)化碰撞能量，得到其特征性的子離子。最后利用該質(zhì)譜條件和該母離子->子離子對(duì)進(jìn)行定量。

9、質(zhì)量偏差怎么辦？
答：質(zhì)譜的質(zhì)量數(shù)偏了，說(shuō)明你的儀器該校正了，一般3個(gè)月就要校一次機(jī)。一般每個(gè)廠家都會(huì)隨機(jī)帶有校正液。

10、如何更換機(jī)械泵油？
答：一般3個(gè)月到半年更換一次泵油，可同時(shí)停機(jī)對(duì)儀器進(jìn)行一次清洗。更換泵油的時(shí)候，先開啟振氣閥5-10分鐘，待將泵內(nèi)沉淀振起后，關(guān)閉振氣閥，同時(shí)關(guān)閉電源。打開泵下的泵油排放閥門，放掉舊油。如果泵油已經(jīng)很臟，則可取少許新油清洗泵后放掉再注入新油。

11、產(chǎn)生碰裝室離子交互影響（Collision Cell Cross Talk）的原因及消除？
答：多通道掃描（MRM）時(shí)，如果兩個(gè)離子掃描通道的碎片離子一樣（或類似如相差1-2分子量單位），前一個(gè)離子通道掃描結(jié)束后，碰裝室里的離子來(lái)不及清除，影響下一個(gè)離子通道反應(yīng)的定量（如果色譜分離完全則無(wú)此影響）。

可能的消除方法：
1）選擇特異的子離子（特別是在用穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)時(shí)）
2）增加離子通道掃描反應(yīng)之間的時(shí)間間隔（如100 ms→300 ms）
3）可設(shè)置額外的“無(wú)用的離子掃描通道（dummy MRM）”

12、排除色譜柱流失問(wèn)題的最佳方法是什么？
答：診斷色譜柱是否存在流失問(wèn)題的方法是第一次在方法條件下安裝色譜柱時(shí)，做一次空白色譜圖，然后將最近的運(yùn)行和空白運(yùn)行色譜圖對(duì)比。如果在空白運(yùn)行中產(chǎn)生了很多峰，則色譜柱性能改變，這可能是由于載氣中含有氧氣，也可能是由于樣品殘留。如果有 GC-MS，則低極性色譜柱的典型流失離子（例如 DB/HP-1或5）質(zhì)/荷比m/z 將為 207、73、281、355 等，大多數(shù)為環(huán)硅氧烷。

13、譜圖為什么只有溶劑峰？
答：可能有以下原因
1）進(jìn)樣針損壞
2）載氣流速太低
3）樣品濃度太低
4）樣品被柱或進(jìn)樣器襯套吸附

14、質(zhì)譜基線高是什么原因？
答：質(zhì)譜的基線其實(shí)跟液相的紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器一樣，基線高的原因不外乎內(nèi)部和外部的原因。
1）選擇的流動(dòng)相在質(zhì)譜的響應(yīng)比較高，比如水相比較多的時(shí)候，噪音比較大些；還有如果鹽含量比較大的時(shí)候，噪音更大些。
2）檢測(cè)器的靈敏度越高的時(shí)候，噪音應(yīng)該越高。如果質(zhì)譜的污染比較嚴(yán)重時(shí)，基線肯定比較高。比如離子阱檢測(cè)器，用得久了，阱中的離子就會(huì)增多，一方面降低了質(zhì)譜的靈敏度，另一方面增加了基線噪音。
3）質(zhì)譜的基線很多時(shí)候還跟你選擇的離子寬度有關(guān)。比如作選擇離子掃描的時(shí)候，基線就低些。作選擇反應(yīng)掃描的時(shí)候，離子寬度不要選得太寬，太寬噪音就高些。
4）多級(jí)質(zhì)譜一般做二級(jí)或三級(jí)質(zhì)譜，基線噪音就低很多。