Cell文獻(xiàn)解讀：新型GSDMD激動劑可利用細(xì)胞焦亡治療癌癥

GSDMD（Gasdermin D）是一種介導(dǎo)細(xì)胞焦亡的成孔蛋白，通過誘導(dǎo)受感染或受損細(xì)胞的死亡來限制病原體的擴(kuò)散，并通過釋放免疫系統(tǒng)可識別的信號分子進(jìn)一步促進(jìn)炎癥反應(yīng)。同時，GSDMD還可以通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞焦亡，增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)。

因此，開發(fā)能夠在癌細(xì)胞中激活GSDMD的藥物，也是當(dāng)前抗腫瘤研究中的新興方向，展現(xiàn)了巨大的治療潛力。

2024年9月6日，哈佛大學(xué)吳皓團(tuán)隊(duì)在 Cell 發(fā)表了研究成果。他們通過高通量篩選發(fā)現(xiàn)了一種能夠激活在腫瘤中廣泛表達(dá)的GSDMD的化合物——6,7-二氯-2-甲基磺�；�-3-N-叔丁氨基喹啉（DMB）。該化合物能夠有效激活GSDMD的孔形成和細(xì)胞焦亡，進(jìn)而抑制腫瘤生長。（PS：T仔可提供現(xiàn)貨哦~）
 
高通量篩選發(fā)現(xiàn)GSDMD激動劑DMB
研究者使用了一種時間分辨熒光（TRF）脂質(zhì)體泄漏分析方法，篩選了超過100,000種小分子化合物，確定了 24 種活性化合物，其中最有效的化合物是C-185（DMB）。
 
DMB 最初被開發(fā)為治療糖尿病的潛在藥物，但由于效果不及生物制劑，未被進(jìn)一步開發(fā)用于臨床。然而，DMB 在激活 GSDMD 方面展示出優(yōu)秀的潛力。
   
實(shí)驗(yàn)表明，DMB 在體外能夠誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡的典型特征，如細(xì)胞腫脹、SYTOX Green 攝取和 LDH 釋放。然而，DMB 誘導(dǎo)的焦亡并不依賴炎性 caspase 的活性。DMB 在多種表達(dá) GSDMD 的腫瘤類型中，能夠 觸發(fā)低水平的脈沖式焦亡，在有效抑制腫瘤生長的同時，不會損害表達(dá) GSDMD 的免疫細(xì)胞。這一過程無需依賴炎性 caspase 對 GSDMD 的切割活化，展現(xiàn)了其獨(dú)特的抗腫瘤潛力。
  DMB誘導(dǎo)腫瘤消退，增強(qiáng)抗腫瘤免疫
研究測試了 DMB 在同種異體小鼠中對腫瘤的作用。實(shí)驗(yàn)中，小鼠被植入不同類型的 EMT6 細(xì)胞（包括野生型、Gsdmd缺失和Gsdmd及Gsdme雙缺失細(xì)胞），并使用 DMB 進(jìn)行治療。
 
結(jié)果顯示，DMB 可顯著抑制野生型 EMT6 腫瘤的生長，并增強(qiáng) CD8+ 自然殺傷（NK）細(xì)胞的功能，同時未引起全身性炎癥或明顯毒性。但對 GSDMD 或 GSDMD/GSDME 雙敲除的腫瘤抑制效果不明顯。
 
而在肺腺癌模型中，DMB 對腫瘤的抑制效果在 GSDMD 敲除的小鼠中依然存在，表明宿主的 GSDMD 并非 DMB 抗腫瘤效果的必要條件。也就是說 DMB 誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫依賴于腫瘤中 GSDMD 的表達(dá)，而非宿主。
   
研究還發(fā)現(xiàn)，DMB 對腫瘤細(xì)胞的直接殺傷作用較弱，其抗腫瘤效果依賴于免疫系統(tǒng)的參與。
 
具體表現(xiàn)為，DMB 能夠在多種腫瘤細(xì)胞系中抑制腫瘤生長，但在免疫缺陷小鼠（如NOD scid gamma小鼠）中，DMB 未能有效抑制 EMT6 腫瘤的生長。這是因?yàn)椋?span style="color:#B22222">DMB 通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞焦亡，促進(jìn)免疫細(xì)胞的募集和激活，從而形成了一種正反饋機(jī)制，最終導(dǎo)致更多腫瘤細(xì)胞焦亡和免疫系統(tǒng)的強(qiáng)力激活。類似治療效果在人體腫瘤中也得到了驗(yàn)證。然而，對于較大腫瘤，DMB 的作用有限。

此外，DMB還可以與抗 PD-1 協(xié)同作用，治療耐藥腫瘤，且在小鼠模型中表現(xiàn)出良好的效果。并且 DMB 處理的腫瘤細(xì)胞可以作為對抗繼發(fā)性腫瘤的疫苗，防止腫瘤復(fù)發(fā)。
   
小結(jié)
綜上，該研究展示了一種通過焦亡誘導(dǎo)抗腫瘤免疫的新型療法策略。并發(fā)現(xiàn)了一種 GSDMD 激動劑——DMB，DMB 通過靶向 GSDMD，誘導(dǎo)癌細(xì)胞焦亡，從而減少腫瘤負(fù)荷，并增強(qiáng)腫瘤浸潤的 CD8+ 和 NK 細(xì)胞的活性。DMB 還可以與抗 PD-1 協(xié)同作用，治療耐藥腫瘤，且在小鼠模型中表現(xiàn)出良好的效果。

相比傳統(tǒng)化療和放療，通過 GSDMD 激動劑直接誘導(dǎo)細(xì)胞焦亡具有多個優(yōu)勢，如減少藥物耐藥性風(fēng)險、精準(zhǔn)引發(fā)免疫原性細(xì)胞死亡，并擴(kuò)大免疫療法的適用范圍。研究還表明，DMB 的毒性較低，對宿主免疫細(xì)胞無明顯副作用，顯示了其在免疫療法中的潛力。

科研助力
細(xì)胞焦亡，又稱細(xì)胞炎性壞死，是一種程序性壞死；表現(xiàn)為細(xì)胞不斷脹大直至細(xì)胞膜破裂，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物的釋放進(jìn)而激活強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)。

按激活機(jī)制，可分為 Caspase-1依賴的經(jīng)典途徑和 Caspase-1不依賴（caspase-4/5/11）的非經(jīng)典途徑，caspase-1和 caspase-4/5/11通過切割 Gasdermin-D（GSDMD）蛋白，釋放其 N 端結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域結(jié)合膜脂并在細(xì)胞膜上打孔，導(dǎo)致細(xì)胞滲透壓變化而發(fā)生脹大直至細(xì)胞膜破裂。兩種途徑都能同時誘導(dǎo)IL-1β和IL-18的前體進(jìn)行切割，形成成熟的IL-1β和IL-18，并釋放到胞外，造成炎癥反應(yīng)。
 
細(xì)胞焦亡在感染性疾病、代謝疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病、癌癥等疾病中有廣泛的研究，對細(xì)胞焦亡的研究有助于認(rèn)識其在相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展。 TargetMol 細(xì)胞焦亡化合物庫 收集了1066 種細(xì)胞焦亡相關(guān)的化合物，可以用于細(xì)胞焦亡相關(guān)研究。
 
原文鏈接：
https://www.nature.com/articles/s43018-024-00781-6