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HuProt™20K人類蛋白組芯片，芯片上有近2萬種全長蛋白質(zhì)，覆蓋75%的人類基因組ORF區(qū)。重組蛋白采用酵母表達(dá)系統(tǒng)，逐個進(jìn)行表達(dá)與純化鑒定。在芯片上每個蛋白質(zhì)均設(shè)置技術(shù)重復(fù)，并設(shè)有多種質(zhì)控點(diǎn)，確保實(shí)驗(yàn)體系穩(wěn)定可靠。
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蛋白芯片規(guī)格：
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芯片標(biāo)準(zhǔn)：1×25×76mm硅片片基，蛋白點(diǎn)徑~60μm，體積0.5~1 nL；
技術(shù)重復(fù)：每個蛋白點(diǎn)2次技術(shù)重復(fù)；
熒光檢測：可使用單一或多色標(biāo)簽；
純化體系：所有蛋白質(zhì)在非變性條件下，通過真核酵母表達(dá)體系表達(dá)純化；
生產(chǎn)條件：溫度4-8℃，濕度30~40%點(diǎn)樣，4℃過夜固定，-80℃長期保存。
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蛋白芯片列表：
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HuProt™20K人類蛋白組芯片通過化學(xué)修飾共價結(jié)合超過15,581人類基因編碼蛋白和124種小鼠基因編碼蛋白質(zhì)。這些蛋白廣泛覆蓋受體、轉(zhuǎn)錄因子、激酶、胞外基質(zhì)蛋白、細(xì)胞骨架蛋白等30余種蛋白類型，可用于多種生物學(xué)功能的創(chuàng)新研究。
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蛋白芯片應(yīng)用：
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HuProt™20K人類蛋白組芯片適用于以蛋白質(zhì)相互作用為基礎(chǔ)原理的各種研究領(lǐng)域，具備廣泛的應(yīng)用價值。在蛋白與蛋白相互作用篩選、蛋白與核酸相互作用鑒定方面相比傳統(tǒng)的co-IP聯(lián)合質(zhì)譜鑒定的技術(shù)路線，更加高效和準(zhǔn)確。在小分子藥靶鑒定、單克隆抗體特異性篩選、脂類結(jié)合蛋白篩選、酶作用底物鑒定及自身抗體類biomarker的篩選等應(yīng)用中，其技術(shù)優(yōu)勢不可替代。
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蛋白芯片原理：
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蛋白質(zhì)相互作用譜篩選
蛋白質(zhì)在體內(nèi)基本全部以蛋白復(fù)合狀態(tài)發(fā)揮功能，對蛋白復(fù)合物成員的識別和研究是認(rèn)識和理解蛋白功能的關(guān)鍵。高通量HuProt 20K蛋白組芯片是蛋白（抗體）互作譜鑒定的有力工具，通過釣餌蛋白與芯片上包被的~2萬種背景信息清晰的蛋白質(zhì)進(jìn)行互作反應(yīng)，能夠極大提高相互作用蛋白的篩選范圍和工作效率。
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HuProt™20K蛋白組芯片與免疫共沉淀（Co-IP）比較的優(yōu)勢
● 無需進(jìn)行克隆構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn)；
● 無需免疫沉淀實(shí)驗(yàn)，不受靶蛋白表達(dá)量和共沉淀效率影響；
● 直接判定互作蛋白，無需進(jìn)行質(zhì)譜（MS）鑒定；
● 更加直觀、可靠和快速，有效提高工作效率；
● 待測蛋白無特異性抗體仍然可以進(jìn)行檢測；
● 待測蛋白有無純化標(biāo)簽（Tag）都可以檢測；
● 體外實(shí)驗(yàn)，覆蓋范圍更廣泛，可鑒定更多互作蛋白類型和靶點(diǎn)。
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蛋白芯片應(yīng)用案例：HCV復(fù)制機(jī)制研究--識別宿主細(xì)胞中HCV核心蛋白的結(jié)合蛋白（J Virol. 2013, 87(10): 5718. ）
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DNA/RNA結(jié)合蛋白篩選
HuProt™20K 蛋白組芯片可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)與核酸（DNA/RNA）特異性結(jié)合的高通量篩選。該芯片可迅速定位與目的核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)及其背后豐富的生物信息，在轉(zhuǎn)錄因子篩選、LncRNA調(diào)控、 RNA毒性、病原微生物侵襲等研究中發(fā)揮重要作用。
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HuProt™20K 篩選核酸結(jié)合蛋白的技術(shù)優(yōu)勢
● 無需克隆構(gòu)建、細(xì)胞培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)；
● 無需細(xì)胞核蛋白的提取，不受蛋白表達(dá)水平影響；
● 無需進(jìn)行免疫沉淀實(shí)驗(yàn)，不受共沉淀效率影響；
● 與EMSA、ChIP、RIP比較，更適合篩選需求；
● 直接確定結(jié)合蛋白，無需進(jìn)行質(zhì)譜鑒定；
● 快速可靠，各蛋白信息清晰，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)簡便；
● 體外實(shí)驗(yàn)，覆蓋范圍更廣泛，可鑒定更多互作蛋白類型和靶點(diǎn)。
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蛋白芯片應(yīng)用案例： 人類蛋白組芯片篩選lncRNA結(jié)合蛋白與lncRNA作用機(jī)理研究經(jīng)典案例（Mol Cell Proteomics. 2013, 1-9）
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疾病標(biāo)志物研究：自身抗體譜篩選
腫瘤、炎癥、自身免疫性疾�。ㄈ纾杭t斑狼瘡、類風(fēng)關(guān)、克隆氏病、多發(fā)性硬化）等多種疾病中，體內(nèi)產(chǎn)生和累積大量的自身抗體。HuProt™20K蛋白組芯片覆蓋~20000種人類蛋白質(zhì)，能夠結(jié)合并大規(guī)模篩選這些人類自身抗體，從而為多種疾病的診斷、預(yù)后、藥效評價等提供豐富候選標(biāo)志物。
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HuProt™ 20K用于biomarker篩選的技術(shù)優(yōu)勢
● 芯片覆蓋近2萬種人類蛋白質(zhì)，獲得biomarker可能性大；
● 較質(zhì)譜技術(shù)更適用于血清/血漿蛋白篩選；
● 特別適合自身免疫病及自身抗體類疾病標(biāo)志物的篩選；
● 可追溯組織中自身抗體對應(yīng)抗原的異常，理解發(fā)病機(jī)理；
● 可訂制小芯片，用于擴(kuò)大樣本驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)；
● 研究成果的轉(zhuǎn)化應(yīng)用和開發(fā)有極強(qiáng)便利性。
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蛋白芯片應(yīng)用案例：人類蛋白組芯片應(yīng)用于移植排斥標(biāo)志物篩選（Clin J Am Soc Nephro. 2012, 23: 750-763）
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蛋白修飾與酶底物譜鑒定
HuProt™20K蛋白組芯片包含的~2萬種真核生物酵母表達(dá)的人類全長蛋白質(zhì)，這些蛋白具備充分的生物活性， 可以為多種蛋白修飾 （如磷酸化、甲基化、乙�；⒎核鼗�、SUMO化、NEDD化及亞硝基化等） 及酶促反應(yīng)提供大量的候選底物，且每種蛋白生物信息背景清晰。以泛素化檢測為例，如下圖所示：
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HuProt™20K 用于酶底物譜鑒定的技術(shù)優(yōu)勢
● 芯片覆蓋近2萬種人類蛋白質(zhì)，通量高，底物鑒定范圍全面；
● 可進(jìn)行多種修飾酶底物譜鑒定，應(yīng)用范圍廣；
● 驗(yàn)證效率高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確、全面、創(chuàng)新性強(qiáng)；
● 底物背景信息清晰，方便進(jìn)行生物信息分析和深入機(jī)理解析。
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蛋白芯片應(yīng)用案例：人類蛋白組芯片技術(shù)應(yīng)用于FAK激酶新底物篩選識別研究（Int J Biol Sci. 2015, 11(4): 404-410）
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小分子&單抗藥物靶點(diǎn)篩選
化學(xué)小分子和單克隆抗體是目前主要的靶向藥物來源，然而經(jīng)典的藥物研發(fā)體系往往需要15-20年的時間才能開發(fā)出適用于臨床的靶向藥物，且研發(fā)失敗率非常高。
HuProt™20K 蛋白質(zhì)組芯片作為簡便、快速和準(zhǔn)確的藥物靶點(diǎn)篩選實(shí)驗(yàn)技術(shù)，該蛋白芯片可以快速地定性和相對定量地分析經(jīng)過熒光、生物素、放射性同位素標(biāo)記的小分子或單克隆抗體藥物與~2萬種人類全長蛋白質(zhì)的結(jié)合情況，判斷候選分子的結(jié)合靶點(diǎn)和特異性，為藥物研發(fā)體系的改進(jìn)提供強(qiáng)大的技術(shù)保障。
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ZEB2單抗特異性研究實(shí)例展示
A. 檢驗(yàn)HuProt™20K 芯片質(zhì)量：綠色熒光點(diǎn)（anti-GST），紅色熒光點(diǎn)（Positive Control），白色方框（ZEB2蛋白）；
B. 競爭藥廠的ZEB2單抗特異性檢測結(jié)果：白色方框（ZEB2蛋白），白色箭頭（抗體結(jié)合非特異蛋白）；
C. 本藥廠的ZEB2單抗特異性檢測結(jié)果：白色方框（ZEB2蛋白）。
結(jié)論：本藥廠的ZEB2單抗靶點(diǎn)單一，較競爭藥廠的單抗藥物特異性更強(qiáng)，具有更優(yōu)的應(yīng)用價值。
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蛋白芯片應(yīng)用案例：人類蛋白組芯片技術(shù)應(yīng)用于單克隆抗體識別研究案例 （Mol Cell Proteomics, 2012, 11(6)）
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