長鏈非編碼RNA(lncRNA)是一類長度大于200nt的非編碼RNA,其在轉(zhuǎn)錄沉默、轉(zhuǎn)錄激活、染色體修飾、核內(nèi)運輸?shù)染哂兄匾墓δ。lncRNA曾被比喻為宇宙的暗物質(zhì),最近幾年的研究發(fā)現(xiàn)它參與多種生物學(xué)過程,是維持基因功能的重要基礎(chǔ),與多種復(fù)雜疾病相關(guān)。但仍有大量lncRNA的具體作用機(jī)制尚不清楚,這也使得lncRNA成為當(dāng)前的科研熱點。
基因芯片作為一個成熟的技術(shù)平臺,二十幾年來被廣泛用于基因表達(dá)譜的檢測。對于lncRNA基因表達(dá)譜檢測,基因芯片比RNA測序有許多重要且不可替代的優(yōu)勢:
1、芯片利用寡核苷酸探針與目的基因堿基互補雜交、掃描獲得的熒光信號來檢測表達(dá)豐度。與RNA測序相比,芯片檢測的準(zhǔn)確性受低豐度轉(zhuǎn)錄本的影響更小,更適合檢測整體表達(dá)豐度低的lncRNA。由于提高測序深度會增加加工不完全RNA的檢出機(jī)率,提高測序深度可能引起可靠性的下降。
2、lncRNA不具有蛋白的翻譯起止位置,RNA測序?qū)ncRNA轉(zhuǎn)錄本鑒定的可靠性要低于mRNA。而芯片探針較短可以進(jìn)行特異性設(shè)計,檢測更特異。
SBC是國內(nèi)最早從事基因芯片研發(fā),也是最早的基因芯片外包服務(wù)商之一。SBC根據(jù)多年基因芯片開發(fā)、設(shè)計及對外服務(wù)經(jīng)驗,結(jié)合lncRNA分子特點,專門針對lncRNA研究設(shè)計了可同時檢測lncRNA和mRNA的lncRNA+ 芯片產(chǎn)品以滿足科學(xué)家的研究需求。芯片委托Agilent公司使用Agilent SurePrint技術(shù)生產(chǎn),技術(shù)重復(fù)性高于99%。
芯片設(shè)計策略
設(shè)計收錄了相關(guān)數(shù)據(jù)庫信息和高質(zhì)量文獻(xiàn)報道的lncRNA,去除冗余,并通過嚴(yán)格的生物信息學(xué)方法剔除lncRNA片段及不可靠的lncRNA。通過CAGE-seq,RNA-seq數(shù)據(jù)鑒定具有高可信度5’TSS及在多種組織或細(xì)胞中表達(dá)的lncRNA,HGNC收錄及l(fā)ncRNAdb收集的實驗驗證功能性的lncRNA作為高可信度lncRNA;趀array軟件設(shè)計探針,并利用SBC自有分析流程對探針進(jìn)行double-check,保證探針高特異性區(qū)分mRNA和lncRNA。
Human lncRNA芯片設(shè)計流程圖
芯片特點
1、lncRNA檢測技術(shù)成熟、靈敏度高,芯片比測序更適合檢測低表達(dá)量的lncRNA
2、收錄lncRNA全面、可靠,并及時更新;lncRNA注釋全面、實用
3、實驗周期短,數(shù)據(jù)分析方法成熟、快速
4、功能機(jī)制預(yù)測,為深入研究lncRNA生物學(xué)功能提供參考,包括:
· 高保守lncRNA
· lncRNA結(jié)合蛋白預(yù)測
· lncRNA生物學(xué)功能預(yù)測
· lncRNA亞細(xì)胞定位
· 疾病相關(guān)lncRNA預(yù)測
· super enhancer lncRNA
· enhancer lncRNA
芯片技術(shù)參數(shù)
樣本要求:RNA≥200 ng ; 物種:人、小鼠
bio-equip.com
上海生物芯片有限公司成立于2001年8月,公司由上?萍紕(chuàng)業(yè)投資(集團(tuán))有限公司、上海張江(集團(tuán))有限公司、中科院上海有關(guān)院所、上海交通大學(xué)等在上海的國內(nèi)知名大學(xué)、研究所、醫(yī)院和企業(yè)共同組建而成,經(jīng)國家發(fā)展與改革委員會批準(zhǔn)公司建設(shè)和運行“生物芯片上海國家工程研究中心”,是我國生物醫(yī)藥領(lǐng)域規(guī)模最大的生物技術(shù)國家工程研究中心之一,是全國生物樣本標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(TC559)、中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會組織生物樣本庫分會(BBCMBA)與中國抗癌協(xié)會腫瘤樣本整合研究分會的秘書處與主任委員單位。
通過二十余年的建設(shè)和發(fā)展,公司(中心)確立了以生物樣本庫、基因芯片、高通量測序、蛋白芯片、組織芯片、數(shù)字化病理、分子病理與生物信息學(xué)為核心平臺的技術(shù)創(chuàng)新服務(wù)體系,以分子醫(yī)學(xué)檢測技術(shù)和分子診斷產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)為核心競爭力的產(chǎn)業(yè)化體系,形成科研和藥物研發(fā)技術(shù)服務(wù)、分子診斷產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)銷售和分子醫(yī)學(xué)檢驗三大主營業(yè)務(wù),公司(中心)具備科研及公共技術(shù)平臺服務(wù)優(yōu)勢、成熟的科技成果轉(zhuǎn)化服務(wù)能力、國家工程研究中心品牌影響力等強大的自身資源及優(yōu)勢。