移液的準(zhǔn)確性和精確性不僅對(duì)吸頭與移液器是否匹配有要求,還需要適合液體的吸頭。當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)吸頭(PP)移取表面張力小的液體時(shí)容易在吸頭表面留下一層薄膜(如含有清潔劑的液體)。液體的殘留會(huì)導(dǎo)致移液結(jié)果的不精確、不一致,同時(shí)也損失了部分昂貴的樣品。在許多DNA和蛋白質(zhì)的分析方法中所用到的試劑和樣品通常都含有清潔劑。研發(fā)低吸附吸頭就是為了改善液體殘留這個(gè)普遍的問(wèn)題。
不同的廠商使用不同的技術(shù)來(lái)制造低吸附吸頭,因此其一致性、疏水程度、耐化學(xué)性方面各不相同。以下就各廠商的低吸附吸頭的耐化學(xué)性作比較。
材料
Sartorius Optifit 標(biāo)準(zhǔn)吸頭:1000μ
Sartorius Optifit 低吸附吸頭:1000μl
其他廠商低吸附吸頭:1000μl
Sartorius Picus電動(dòng)移液器: 50-1000μl,以4檔速度吸液、1檔速度排液
化學(xué)試劑:異丙醇、乙腈、DMF(二甲基甲酰胺)、綠色食品染料
3個(gè)其他廠商的低吸附移液器吸頭
96 孔微孔板分光光度計(jì) (Biotek)
吸光度測(cè)試
在吸光度測(cè)試中,我們使用染色試劑(溶解于蒸餾水中的綠色食品染料)來(lái)測(cè)定排液后移液器吸頭中殘余的液體。使用被測(cè)吸頭最大標(biāo)稱體積來(lái)吸取綠色試劑。然后直接將該液體排回容器中。接下來(lái)以吸頭的最大容量使用蒸餾水漂洗吸頭5 次。然后使用分光光度計(jì) (405 nm) 測(cè)定漂洗液的吸光度,并將結(jié)果與參考試劑進(jìn)行對(duì)比。漂洗液的吸光度與吸頭中的液體殘留量直接相關(guān)。
耐化學(xué)性測(cè)試
1000 μl 溶劑:使用 1000 μl 移液器吸頭對(duì)異丙醇、乙腈和二甲基甲酰胺分別反復(fù)吸打 20 次。用蒸餾水將吸頭漂洗 3次。然后使用染色液體作為試劑,利用吸光度測(cè)試分析這種處理對(duì)低吸附吸頭性能的影響。每種溶劑對(duì) 6 個(gè)吸頭進(jìn)行重復(fù)測(cè)試。將經(jīng)過(guò)化學(xué)處理的吸頭的結(jié)果與未經(jīng)處理的標(biāo)準(zhǔn)吸頭和低吸附吸頭進(jìn)行結(jié)果對(duì)比。
低吸附移液器吸頭的耐化學(xué)性
多種技術(shù)被用于創(chuàng)建移液器吸頭的低吸附表面。最穩(wěn)定的方法可生產(chǎn)出完全疏水且無(wú)浸出的吸頭。如圖 1 所示,被測(cè)的低吸附吸頭之間在耐化學(xué)性方面存在著顯著的差異。一些廠商的吸頭在使用選定溶劑進(jìn)行處理后低吸附功能會(huì)顯著降低;瘜W(xué)測(cè)試后 Sartorius 低吸附吸頭的性能與未經(jīng)任何化學(xué)處理時(shí)的性能處于相同水平,這表明這些吸頭是惰性的且無(wú)浸出。對(duì) Sartorius 低吸附吸頭進(jìn)行高壓滅菌也不會(huì)影響吸頭的性能(數(shù)據(jù)未顯示)。
結(jié)論:
市場(chǎng)上的各種低吸附吸頭在耐化學(xué)性方面存在顯著的差異。Sartorius低吸附吸頭具有最佳的耐化學(xué)性,確保低吸附性能不受到液體的影響且無(wú)浸出。
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