Bioruptor水槽式非接觸式超聲破碎儀使用說(shuō)明

bioruptor 原理圖

題外話，為什么超純水不能飲用，就是因?yàn)槌�純水本身離子密度不夠，自然就會(huì)析出人體里面的微量元素以求離子平衡。同樣的道理，如果Bioruptor經(jīng)常使用去離子水，水槽漸漸就會(huì)由光滑的不銹鋼表面形成一個(gè)個(gè)粗糙的黑斑，原因就在于去離子水析出了水槽的金屬離子。這樣的結(jié)果是，實(shí)驗(yàn)不理想，Bioruptor的水槽也被損傷了。Bioruptor水槽建議大家使用純水或者單蒸水即可。樣品管中的樣品用常規(guī)緩沖液就可以了。

其次就是避免Bioruptor高溫。
Bioruptor超聲產(chǎn)生器粘貼在水槽下面，高溫狀態(tài)下，一是損傷超聲產(chǎn)生器本身，二是損傷超聲產(chǎn)生器和水槽底部粘連的牢固度，由此可知還要避免Bioruptor磕碰震動(dòng)，不要把它和離心機(jī)、搖床等工作時(shí)產(chǎn)生震動(dòng)的設(shè)備放在一個(gè)實(shí)驗(yàn)臺(tái)上面，最好單獨(dú)為Bioruptor找個(gè)好閨房，結(jié)實(shí)的好臺(tái)面放置。另外不要隨意挪動(dòng)，總之，Bioruptor怕熱怕振蕩，謹(jǐn)記之。
 
Bioruptor能做什么
Bioruptor用途相當(dāng)廣泛，只有你想不到?jīng)]有做不到。與傳統(tǒng)探頭式超聲破碎儀相比用途更廣泛，局限性是單個(gè)樣品的體積，可以很小，不能太大。
動(dòng)植物組織破碎
動(dòng)植物細(xì)胞破碎
酵母菌等真菌破碎
結(jié)核桿菌等細(xì)菌破碎
提取純化核酸、蛋白質(zhì)和各種代謝化合物
提取制備細(xì)胞核
染色體染色質(zhì)破碎
核酸片段化
腺病毒的微粒釋放
制備高效價(jià)的重組腺病毒
提取病毒DNA
土壤樣品破碎
制備納米顆粒
溶解各種難溶試劑
制備油水乳濁液
省略號(hào)
 
Bioruptor的日常保養(yǎng)
 
1.保證水槽里水溫穩(wěn)定4℃
最主要是避免Bioruptor過(guò)熱，同時(shí)4℃的水密度最大，超聲效果也最好。Bioruptor超聲產(chǎn)生器粘貼在水槽下面，帶動(dòng)水槽產(chǎn)生高頻率超聲波，一部分作用于樣品，另一部分基本上全都轉(zhuǎn)化為熱能，Bioruptor功率強(qiáng)悍，發(fā)熱也就很迅速，對(duì)于Bioruptor而言，它最怕熱怕熱怕熱，極其損傷儀器壽命。
 
2.保證Bioruptor連續(xù)使用時(shí)間少于一個(gè)小時(shí)
使用后保證儀器開機(jī)不工作狀態(tài)散熱至少半小時(shí)，水槽水溫保證是4℃，不等于長(zhǎng)時(shí)間工作的Bioruptor水槽下面的核心元件是4℃，所以一定要在Bioruptor工作一個(gè)小時(shí)后，保證Bioruptor主機(jī)處在開機(jī)不工作狀態(tài)至少半個(gè)小時(shí)，主機(jī)散熱片可以有效地排熱降溫。
 
3保證每周更換一次純水
Bioruptor水槽里的水要定期更換，保證水的潔凈度。如果是長(zhǎng)時(shí)間不使用的話，請(qǐng)排干。再次提醒，禁止使用去離子水
 
4.保證Bioruptor停止超聲后再取出樣品管適配器
樣品管適配器放置在Bioruptor水槽上方，與水槽蓋上的步進(jìn)電機(jī)齒輪嚙合，在Bioruptor工作時(shí)電機(jī)恒速緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)，帶動(dòng)樣品管適配器轉(zhuǎn)動(dòng)，這樣超聲能量分布更均勻。在設(shè)定循環(huán)數(shù)完成后或者按stop按鈕，電機(jī)才會(huì)停止轉(zhuǎn)動(dòng)，中途不可以直接取出適配器，長(zhǎng)時(shí)間如此不正當(dāng)操作會(huì)損壞步進(jìn)電機(jī)。
 
5.保證每個(gè)循環(huán)的超聲時(shí)間小于等于暫停時(shí)間
原因很簡(jiǎn)單，降溫降溫降溫，怕熱怕熱怕熱。Bioruptor默認(rèn)的是30sON/30sOFF。你也可以遵循default即可。

Bioruptor的耗材選擇

一是選進(jìn)口的
國(guó)產(chǎn)的參差不齊，選擇起來(lái)比較犯難，同時(shí)一個(gè)牌子的批間穩(wěn)定性又不好說(shuō)，超聲波需要穿透管壁，這就要求管壁的均一性要好。畢竟不是常用耗材，用量少，索性就選進(jìn)口的，比如常用的Axygen，Eppendorf的，15ml或者50ml的也可以選用Corning和Falcon的。對(duì)于珍貴的樣品，可以選用低吸附樣品管，進(jìn)口的幾個(gè)大品牌都有，Bioruptor廠家的就是低吸附的，對(duì)于有些實(shí)驗(yàn)要求嚴(yán)苛，非常難處理，可以考慮。
 
二是選透明度高、管壁薄的，質(zhì)地比較硬比較脆的
這種管子利于超聲波更容易的傳輸，提高超聲波利用效率。
 
三是一旦選定某種管子，就不要在實(shí)驗(yàn)中途更換其他管子。
建議根據(jù)實(shí)驗(yàn)消耗量，盡量一次性買夠，盡力保證耗材方面沒有誤差產(chǎn)生。
 
另外補(bǔ)充一句，有的實(shí)驗(yàn)室會(huì)涉及到用Bioruptor plus 非接觸式全自動(dòng)超聲破碎儀用來(lái)破碎微量組樣品，比如微生物和動(dòng)植物組織等提取核酸蛋白，由于該儀器超聲波強(qiáng)度非常大，即使調(diào)到設(shè)備低檔也不太好控制破碎程度，很可能把目的產(chǎn)物破壞掉，為了降低其超聲效率，那就需要用與原則二正好相反的方式選擇管子。

Bioruptor的使用技巧
 
1.每天第一個(gè)使用Bioruptor效率會(huì)最高，Bioruptor超聲破碎儀同樣也有超聲衰減的固性，超聲產(chǎn)生器會(huì)有疲勞衰減的現(xiàn)象，其原因無(wú)外乎超聲產(chǎn)生器工作后變熱了，所以選擇每天第一次使用Bioruptor，效率也是最好的。
這也是Bioruptor優(yōu)于傳統(tǒng)探頭式超聲破碎儀的地方， 傳統(tǒng)的超聲波破碎儀一次只能處理一個(gè)樣品，實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，Bioruptor 超聲破碎儀，一次可同時(shí)檢測(cè) 6 至 12 個(gè)樣品，實(shí)驗(yàn)效率高，不存在批間差異。

2.每次填滿補(bǔ)齊適配器
Bioruptor 超聲破碎儀廠商建議無(wú)論每次處理幾個(gè)樣品都把空余的樣品管孔用空白對(duì)照樣品管補(bǔ)齊，保證每次超聲能量分部均勻，便于建立穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)優(yōu)化條件，這樣子每次無(wú)論處理幾個(gè)樣品，都可以保證每次用相同時(shí)間處理一定得出相同的處理結(jié)果。

3.三分法振蕩離心樣品管
特別針對(duì)于樣品量非常少的體系，比如10ul，Bioruptor超聲能量大，很容易就把樣品管中微量的樣品顛兒到管壁上，超聲失效。所以要根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)循環(huán)數(shù)定期振蕩離心樣品管，保證樣品有效超聲。比方說(shuō)你要做15個(gè)循環(huán)，就把機(jī)器調(diào)整為5個(gè)循環(huán)，5個(gè)循環(huán)結(jié)束后，步進(jìn)電機(jī)也停止轉(zhuǎn)動(dòng)，取出適配器，取出樣品管振蕩離心，然后再上機(jī)器處理5個(gè)循環(huán)，接下來(lái)同樣取出適配器，取出樣品管振蕩離心，接下來(lái)再處理5個(gè)循環(huán)即可。同時(shí)也建議不要建立太微量的樣品體系，盡量多一些，這樣子就可以避開無(wú)效超聲。
 
4.最后建議大家的是一個(gè)原則，超聲時(shí)間能少則少
超聲時(shí)間不是越長(zhǎng)效果就越好，這也同樣遵循邊際效應(yīng)，如果通過(guò)5個(gè)超聲循環(huán)處理已經(jīng)獲得目的產(chǎn)物，6個(gè)循環(huán)沒有明顯的改善，以后就保證只用5個(gè)超聲循環(huán)處理。超聲波沒有選擇性地在破碎樣品，處理時(shí)間越長(zhǎng)往往導(dǎo)致更多的干擾項(xiàng)。所以奉勸大家，能少超堅(jiān)決不多超！