Basic Fibroblasts Nucleofector® Kit——用于成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染
產(chǎn)品介紹
Basic Fibroblasts Nucleofector® Kit 適用于Nucleofector™ IIs/2b轉(zhuǎn)染儀,這是一種單孔細(xì)胞核轉(zhuǎn)染儀,支持單孔電轉(zhuǎn)杯的轉(zhuǎn)染平臺(tái),適用于難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系和原代細(xì)胞的高效轉(zhuǎn)染。
Basic Fibroblasts Nucleofector® Kit(成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒)用于哺乳動(dòng)物不同器官成纖維組織來源的細(xì)胞,可用來優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件。試劑盒有專門的操作手冊(cè),試劑盒內(nèi)除含有特異的核轉(zhuǎn)染液(Nucleofector™溶液),另外含有pmaxGFP™對(duì)照載體。轉(zhuǎn)染效率最高達(dá)到90%,細(xì)胞成活率98%。
Lonza公司有50多種原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒。
試劑盒組分(25 Test)
1. 細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)染液(2.25ml)
2. 添加劑(0.5ml)
3. 一次性吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)(25個(gè))
4 .pmaxGFP™ 陽(yáng)性質(zhì)粒(30μg)
5. 單孔電轉(zhuǎn)杯(100μl)(25個(gè))
*所有組分可儲(chǔ)存在4℃,長(zhǎng)期保存時(shí),陽(yáng)性質(zhì)粒保存在-20℃。
Nucleofector 細(xì)胞核轉(zhuǎn)染技術(shù)操作步驟(詳細(xì)Protocol請(qǐng)登錄Lonza官方網(wǎng)站查閱)
整個(gè)操作過程只需四步,非常簡(jiǎn)單、高效。
第1步:處理細(xì)胞,精確計(jì)數(shù)
第2步:混合DNA、轉(zhuǎn)染液,重懸細(xì)胞,加入轉(zhuǎn)染杯
第3步:將轉(zhuǎn)染杯放入轉(zhuǎn)染儀,按鍵選擇相應(yīng)程序,按"start"鍵開始轉(zhuǎn)染,10秒鐘左右
第4步:取出細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)。
延伸閱讀——原位轉(zhuǎn)染
“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細(xì)胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷,實(shí)現(xiàn)了貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。原位轉(zhuǎn)染技術(shù)實(shí)現(xiàn)了生理狀態(tài)下(貼壁培養(yǎng)過程中)的轉(zhuǎn)染,如Basic Neuron Nucleofector® AD 轉(zhuǎn)染試劑盒。
2010年,Lonza推出了4D系統(tǒng),其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條,推出了第一個(gè)原位核轉(zhuǎn)染試劑盒;
2010年,Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。
2011年,Lonza推出了Y unit,可以直接在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染
優(yōu)勢(shì):
– 可在神經(jīng)元貼壁生長(zhǎng)的任何階段進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染或多次進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染
– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后,神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,維持貼壁生長(zhǎng)的生理狀態(tài)
– 唯一轉(zhuǎn)染效率最高可達(dá)70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法
– 整個(gè)過程維持了細(xì)胞功能
– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析