三種長肽合成技術(shù)簡述

蛋白質(zhì)化學(xué)合成研究中,固相合成方法是最常用也是最簡便的合成方法。該方法在合成長鏈多肽時(shí)同樣效果顯著，但是隨著肽鏈的延長，反應(yīng)會(huì)逐漸變得更難進(jìn)行（比如大于150個(gè)氨基酸），一些缺殘基的目標(biāo)肽就隨之產(chǎn)生。這些缺殘基的肽鏈也是長肽合成過程中所產(chǎn)生的主要雜質(zhì)。因此，長肽的合成過程中，我們需要克服的主要困難是探索更優(yōu)質(zhì)的反應(yīng)條件和反應(yīng)方法，從而使氨基酸縮合反應(yīng)進(jìn)行的更充分更徹底。同時(shí)縮短反應(yīng)時(shí)間，因?yàn)榉磻?yīng)時(shí)間越長，不可控的副反應(yīng)相對的就越多，副產(chǎn)物就越復(fù)雜，這些副產(chǎn)物同樣是整個(gè)反應(yīng)所產(chǎn)生雜質(zhì)的重要組成部分。
為了解決長肽合成過程中存在的諸多問題，我們國肽生物采取了一系列效果顯著的措施和方法：
（1）微波合成法：對于合成過程中出現(xiàn)的一些難以縮合的氨基酸，我們采用微波法進(jìn)行合成，該方法效果顯著，并且大大縮短了反應(yīng)時(shí)間，同時(shí)減少了兩種主要副產(chǎn)物的產(chǎn)生。
（2）片段合成法：當(dāng)某些多肽用常規(guī)合成方法合成困難，并且難以純化時(shí)，我們也會(huì)采用將多肽中某一段的某幾個(gè)氨基酸縮合之后作為一個(gè)整體縮合到肽鏈上去，這種方法也能夠解決許多合成中存在的問題。
（3）酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是固相合成的N末端Cys多肽和C末端多肽酰肼之間的化學(xué)選擇性反應(yīng)形成酰胺鍵而實(shí)現(xiàn)多肽連接的方法。該方法根據(jù)肽鏈中Cys的位置，將整條肽鏈分成多條序列分別合成，最終經(jīng)過液相合縮反應(yīng)得到目標(biāo)肽，該方法不僅大大縮短了長肽合成時(shí)間，而且顯著地提高了最終產(chǎn)物純度，因此廣泛適用于含有Cys的長鏈多肽的合成。
國肽生物一直以解決客戶需求為己任，我們發(fā)展的三種長肽合成方法，很好的解決了長肽合成過程中存在的縮合純化困難、雜質(zhì)多、純度低等問題，而且對于含有困難序列，HPLC峰型異常的多肽同樣效果顯著，國肽生物已經(jīng)掌握了成熟的長肽合成技術(shù)。
成功案例：
我們成功合成序列為
GHMDIKKEIEAIKKEQEAIKKKIEAIEKELRQLANETTQDLQLFLRDTTELRTFSILNRKDIDFLLQRMKQIEDKIEEIESKQKKIENEIARIKKLIGERY的包含101個(gè)AA的長肽。
HPLC分析:

MS分析：