淺析家兔在檢查藥品熱原上的作用

熱原是能夠?qū)е聶C(jī)體發(fā)熱的一類物質(zhì)，可通過刺激哺乳動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生諸如IL-1β、IL-6、TNF 等細(xì)胞因子的內(nèi)源性致熱原，引起人體發(fā)生發(fā)熱、嘔吐、休克甚至死亡。對一些藥品如注射劑的熱原檢查，是保證輸注藥品安全的重要檢驗(yàn)項(xiàng)目之一。在臨床前毒性試驗(yàn)的特殊毒性試驗(yàn)研究中，熱原檢查法是檢驗(yàn)藥品及生物制品中熱原的經(jīng)典有效方法。由于家兔的體溫變化非常敏感，它們對許多病毒和致病菌非常敏感，具有能客觀反映各類藥品中熱原在生物體內(nèi)引起發(fā)熱情況的特點(diǎn)。通過家兔的預(yù)先感染，可以進(jìn)行許多抗傳染藥物的研究，因此可以作為熱原試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，常作為研究發(fā)熱、解熱藥和檢查致熱原。

熱原檢測是嚴(yán)格控制各種非腸道用藥制品質(zhì)量與安全性的重要技術(shù)手段。熱原檢查法是將一定劑量的供試品靜脈注入家兔體內(nèi)，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)，觀察家兔體溫升高的情況，以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定的要求。家兔是臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用的動(dòng)物模型之一，它性情溫順、容易飼養(yǎng)、繁殖率高、價(jià)格低廉，且容易找到條件類似的對照兔組，因此在許多實(shí)驗(yàn)研究中可以替代狗進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)和復(fù)制多種病理生理模型。

家兔熱原檢查法是世界許多國家檢查熱原的法定方法，也是我國生物制品熱原檢查的常規(guī)手段。我國比較常用的實(shí)驗(yàn)家兔品種有日本大耳白兔、新西蘭白兔、青紫藍(lán)兔和中國白兔四個(gè)品種。美迪西可以根據(jù)客戶的需求提供各種有效的動(dòng)物模型，用來檢測藥物的有效性。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有非人類靈長動(dòng)物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠等各種種類。目前，其已經(jīng)建立多個(gè)有效動(dòng)物模型，并經(jīng)過多方驗(yàn)證和長期實(shí)踐考驗(yàn)。

日本大耳白兔，原產(chǎn)日本，用中國兔與日本兔雜交培育而成。新西蘭白兔 原產(chǎn)美國，該兔于20世紀(jì)初在美國育成，也是美國用于實(shí)驗(yàn)研究較多的品種，已培育成近交品系。該品種性情溫和，易于管理，廣泛用于皮膚反應(yīng)試驗(yàn)、熱源實(shí)驗(yàn)等方面。青紫藍(lán)兔原產(chǎn)于法國，因毛色與南美的青紫藍(lán)絨鼠相像而得名。我國引入此兔年代較早，在國內(nèi)分布較廣，是國內(nèi)使用較多的實(shí)驗(yàn)用兔之一。如有研究者進(jìn)行了選擇符合生物制品熱原檢查要求的家兔的研究，發(fā)現(xiàn)普通級青紫蘭家兔（灰兔）和普通級日本大耳白家兔（白兔）在生物制品熱原檢查中均可使用。

研究者按照《中國藥典》三部(2015年版)中規(guī)定的熱原檢查法進(jìn)行:取灰兔和白兔，用同一劑量(3mL/kg)的抗狂犬病血清和破傷風(fēng)抗毒素及氯化鈉注射液(10mL/kg)，分別注入家兔體內(nèi)，每隔30min測量家兔體溫1次，連續(xù)測量6次，以6次體溫最高1次減去正常體溫即為該家兔升高溫度，以升高溫度或升高溫度的總和判定結(jié)果[1]。

研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，灰兔和白兔注射抗狂犬病血清，體溫檢測結(jié)果兩者之間相同，無明顯差別。但3批試驗(yàn)中，均有1批判為不合格，2批判為復(fù)試�；彝煤桶淄米⑸淦苽�風(fēng)抗毒素及氯化鈉注射液，兩者檢測結(jié)果也相同，無明顯差別，且全部試驗(yàn)均判為合格。

家兔是生物制品檢查熱原和效價(jià)測定等常用的臨床前動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停�但是家兔來源、品種、質(zhì)量直接影響檢查和測定的結(jié)果。家兔對細(xì)菌內(nèi)毒素的敏感性受動(dòng)物來源、所攜帶微生物、飼養(yǎng)環(huán)境、使用次數(shù)等多方面的影響。隨著對實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理的規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，一些影響因素可以被排除，如飼養(yǎng)環(huán)境、實(shí)驗(yàn)環(huán)境等，但是動(dòng)物來源、使用次數(shù)、時(shí)間等因素的影響有些因素仍然存在。有必要對熱原檢查用兔的敏感性進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)敏感性不符合要求的家兔，一律不能用于熱原試驗(yàn)。

[1] 不同種家兔用于生物制品熱原檢查的比較研究[J]