黑膠蟲鑒定結(jié)果技術(shù)分析要點（上）
今天與大家一起揭開黑膠蟲的神秘面紗。
江湖上流傳很久的黑膠蟲，到底真實身份是啥？
我們一起來扒一扒~
逍鵬生物收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進行DNA提取、測序、數(shù)據(jù)庫比對，得到了鑒定結(jié)果，一起和大家分享一下吧。
表：黑膠蟲檢定
| 微生物種屬 | 樣本數(shù) | G+/G- | 形狀 | 直徑大小 |
| Mycoplasma hyorhinis （豬鼻支原體） |
3 | / | / | 0.15~0.3 μm |
| Mycoplasma bovis （牛支原體） |
1 | / | / | 0.15~0.3 μm |
| Mycoplasma pulmonis （鼠肺支原體株） |
1 | / | / | 0.15~0.3 μm |
| Mycoplasma yeatsii （山羊支原體） |
6 | / | / | 0.15~0.3 μm |
| Actinobacterium sp. （放線菌屬） |
1 | G+ | 絲狀 | 寬度近于桿狀細菌，直徑0.5~1 μm |
| Ralstonia sp. （羅爾斯通菌屬） |
1 | G- | 桿狀 | 1.2×2.5~3.5 μm |
| Brevundimonas sp. （短波單胞菌屬） |
1 | G- | 桿狀 | 0.4~0.5×1-2 μm |
| Blastomonas natatoria （泳池芽殖單胞菌） |
1 | G- | 卵圓形或桿狀 | / |
| Pseudomonas sp. （假單胞菌） |
1 | G- | 桿狀 | (0.5～1)×(1.5～4) μm |
| Sphingobium sp. （鞘脂菌屬） |
1 | G- | 桿狀 | / |
| Sphingomonas sp. （鞘氨醇單胞菌） |
5 | G- | 桿狀 | 0.3~0.8×1.0~2.7 μm |
| Methylobacillus sp. （甲基菌屬） |
1 | G- | 桿狀 | 0.8~1.0×1.0~8.0 μm |
| Microbacterium sp. （微桿菌屬） |
2 | G+ | 桿狀 | 1~10×0.2~0.6 μm |
| Herbaspirillumhuttiense （赫氏草螺菌） |
4 | G- | 螺旋型 | 長度至數(shù)十微米；螺旋波長為5~15 μm，螺旋幅度約一乃至數(shù)微米 |
如上表格所示：在這29個樣本中，有11個樣本鑒定為支原體，種類分別為豬鼻支原體、牛支原體、鼠肺支原體、山羊支原體。18個樣本鑒定為細菌，種類分別為放線菌屬、羅爾斯通菌屬、短波單胞菌屬、泳池芽殖單胞菌、假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、甲基菌屬、微桿菌屬、赫氏草螺菌。
# 支原體污染 #
本次實驗中，有11個樣本鑒定為支原體污染。首先，我們先來了解一下支原體的基本特征。
逍鵬生物實驗室在做沉降菌檢測的時候，竟然出乎意外地培養(yǎng)出了一株支原體。支原體集落呈“荷包蛋樣”：圓形，核心部分較厚，向下長入培養(yǎng)基，周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。
圖1. 支原體菌落
圖2. 電鏡下的支原體
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學習用
在電子顯微鏡下，支原體大小為0.15~0.3 μm，無細胞壁，不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性，呈球形、球桿形、長絲狀及分支狀等。
豬鼻支原體 //
圖3. 固體培養(yǎng)基上的豬鼻支原體集落
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學習用
鑒定結(jié)果：樣本1，6，15 為 Mycoplasma hyorhinis（豬鼻支原體）
大�。�0.15~0.3 μm
感染宿主：其感染豬的上呼吸系統(tǒng)的上皮細胞，通過口鼻途徑傳播。小豬可以被母豬或它們的同伴（無癥狀攜帶者）感染
污染細胞途徑：推測胰蛋白酶主要是從豬的胰臟提取，純化獲得的結(jié)晶，再制成的凍干制劑，過濾除菌不當?shù)囊让溉芤嚎赡軘y帶豬鼻支原體，建議大家買知名品牌胰酶，降低污染風險
鼠肺支原體 //
圖4. 固體培養(yǎng)基上的鼠肺支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學習用
鑒定結(jié)果：樣本12 為 Mycoplasma pulmonis（鼠肺支原體）
大�。�0.15~0.3 μm
感染宿主：大鼠和小鼠是主要的宿主。寄生于呼吸道上皮頂膜，附著感染從鼻前通道到肺泡的任何地方，可能是由表面糖蛋白介導的
污染細胞途徑：在提取鼠源的細胞，例如鼠巨噬細胞，鼠肺動脈上皮細胞，鼠原代海馬神經(jīng)元時，如果提取的鼠帶有鼠肺支原體，就有可能會引入污染
牛支原體 //
圖5. 固體培養(yǎng)基上的牛支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學習用
鑒定結(jié)果：樣本28 為 Mycoplasma bovis（牛支原體）
大�。�0.15~0.3 μm
感染宿主：主要寄生于牛體內(nèi)，感染部位廣泛，感染牛的呼吸道，會引起肺炎、中耳炎、關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎
污染細胞途徑：推測細胞增殖的主要營養(yǎng)之一就是胎牛血清。胎牛血清來源于動物，其主要通過0.1μm濾膜過濾除菌。如果血源及過濾除菌不當，就會給細胞帶來潛在的支原體污染，因此建議大家購買知名品牌的胎牛血清
山羊支原體 //
圖6. 固體培養(yǎng)基上的山羊支原體株
圖源網(wǎng)絡(luò)，僅供參考學習用
鑒定結(jié)果：樣本9，10，17，18，19，20 為Mycoplasma yeatsii（山羊支原體）
大�。�0.15~0.3 μm
感染宿主：主要寄生于山羊體內(nèi)，感染部位廣泛，寄生于羊的外耳道，咽后淋巴結(jié)、肺、脾
污染細胞途徑：此類污染來源異常詭異，因為大家平時培養(yǎng)的細胞來源或營養(yǎng)體系，很難接觸到此類污染的環(huán)節(jié)，故很難推測到污染源頭。若培養(yǎng)相關(guān)的細胞或者使用相關(guān)的營養(yǎng)體系，就比較容易推測污染來源了
// 小結(jié) //
如果黑膠蟲的真實身份是支原體，那么支原體本身不會游動，不符合黑膠蟲污染活躍游動或原地打轉(zhuǎn)、顫動的特征，故推測可能細胞本身存在潛在的支原體污染，剛好被檢測出來了。
好啦~
本期分析到這里也就結(jié)束啦~
剩余的18個被鑒定為細菌的黑膠蟲樣本我們將在下期分析，不要錯過哦！
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