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特殊血清種類與使用詳解

瀏覽次數(shù):2331 發(fā)布日期:2022-8-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負


 

特殊加工工藝血清
 

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透析血清

(貨號:C3820-0050/0100/0500)

 

常規(guī)細胞培養(yǎng)需要添加血清來維持細胞的增殖能力,盡管血清可以滿足一般細胞培養(yǎng)需求,但在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進行研究的實驗中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。

 

透析是將血清循環(huán)通過中空纖維,并在血清中補充生理鹽水以維持滲透壓,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白等。

 

因此透析胎牛血清主要用于關(guān)注小分子濃度的特殊研究,包括:研究蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細胞信號傳導(dǎo)和報告基因分析、報告基因細胞系的篩選等。

 

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碳吸附血清

(貨號:C3830-0050/0100/0500)

 

在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進行研究的實驗中,需要去除某些特定的背景成分,常用的去除方法有碳吸附,使用活性碳和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lipophilic)物質(zhì);钚蕴磕軌蚪Y(jié)合脂溶性分子,通過碳吸附可降低血清中許多激素及生長因子的濃度,如雌二醇、皮質(zhì)醇、皮質(zhì)酮、孕酮、B類維生素、睪酮及T3、T4、前列腺素等。該血清適用于上述一些分子可能干擾實驗結(jié)果的實驗中,對于那些需要這些分子的細胞培養(yǎng),也可能降低細胞生長性能。

 

適用于:培養(yǎng)干細胞、原代細胞、神經(jīng)細胞、人類癌細胞、人類骨髓細胞、白血病細胞、人類胚肺成纖維細胞、人類腦神經(jīng)細胞和瘤細胞等細胞。

 

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去外泌體血清

(貨號:C3801-0050/0100

 

外泌體由分泌性細胞分泌,存在于所有的生物體液中,包括血液、尿液、唾液、乳汁和腦脊液中。它們隨后被其他細胞吸收并發(fā)揮生物活性。

 

胎牛血清中含有大量的外泌體,但在外泌體研究中,如果仍然使用胎牛血清培養(yǎng)細胞,并通過收集上清液來提取外泌體進行實驗,那么胎牛血清中本身的牛源外泌體將會對實驗分析造成極大的干擾。去外泌體血清是將由無菌采集的健康胎牛血清經(jīng)過過濾,去除≥99%的胎牛血清內(nèi)源外泌體,還可使細胞在培養(yǎng)時與未處理的胎牛血清具有相同的增殖速率和形態(tài)。

 

因此,去外泌體血清主要用于細胞體外的增殖培養(yǎng),收獲目標(biāo)細胞的外泌體。

 

去外泌體血清與處理前的胎牛血清具有相同的細胞生長速率。適用于收集細胞分泌的外泌體時使用。
 

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低IgG血清

(貨號:C2730-0100/0500)

 

IgG是胎牛血清中發(fā)現(xiàn)的最常見的抗體,低IgG血清主要通過A-Sepharose處理,使血清能夠保留原有的生物活性,同時降低血清的IgG含量,低于5μg/ml。低IgG胎牛血清適用于培養(yǎng)雜交瘤細胞。

 

因此,低IgG胎牛血清有利于單克隆抗體的純化,用于研究抗體和病毒反應(yīng)、細胞表面抗原表位。
 

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四環(huán)素血清

(貨號:C2720-0100/0500)

 

普通胎牛血清中一般會含有四環(huán)素(Tet),當(dāng)使用非常敏感的Tet-誘導(dǎo)的基因表達系統(tǒng)時,研究人員往往會遇到非預(yù)期的基因表達的問題,為了確保精確地基因表達,建議使用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清,應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達系統(tǒng)的細胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對四環(huán)素敏感的實驗中。

 

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去脂胎牛血清

(貨號:C3840-0050/0100/0500/0050X10)

 

去脂胎牛血清通過固體基質(zhì)脫脂作用去除內(nèi)源性脂類、甘油三酯和膽固醇,含量僅為標(biāo)準胎牛血清的1/3。

 

去脂胎牛血清在細胞培養(yǎng)中用量較多,其含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成分,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。

 

  • 提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物以及主要的低分子營養(yǎng)物。

  • 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

  • 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱源質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

  • 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基上所需因子來源。

  • 起酸堿緩沖液作用。

  • 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

 

去脂胎牛血清可用于蛋白激酶CK2-α’與腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移相關(guān)性研究:

 

  • 蛋白激酶是酶類這個家族中最龐大的一員,被用來完成蛋白磷酸化作用的催化,這是控制細胞生命活動中最通常的機制。其中最具有效性的蛋白激酶之一可能就是CK2。蛋白激酶CK2(protein kinase CK2, PKCK2),過去曾經(jīng)被稱為酪蛋白激酶-2或Ⅱ(cascin kinase2 or Ⅱ)。它是由兩個催化亞基(aa’)和兩個調(diào)節(jié)亞基(ββ)構(gòu)成的不均一四聚體。

  • 蛋白激酶CK2是由兩個分別為42—44KDa和38KDa的aa’ββ型異四聚體結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)很穩(wěn)定,在體外只有在變性的條件下才能被解離。除了細胞基質(zhì),一些病毒蛋白也被CK2所磷酸化。蛋白激酶CK2在轉(zhuǎn)錄、信號、增殖,并且在導(dǎo)致腫瘤發(fā)生的各細胞步驟中發(fā)揮作用。

 

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IR(輻照)血清

 

輻照型血清是將正常血清經(jīng)過三次無菌過濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細胞培養(yǎng)中最重要的天然培養(yǎng)基,它具有促進細胞增殖和誘導(dǎo)細胞分化等的生物學(xué)功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。

 

功能:

  1. 提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

  2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

  3. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

  4. 起酸堿度緩沖液作用。

  5. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。應(yīng)用適用于正常封閉與增殖旺盛的常規(guī)細胞系的培養(yǎng)等。

 

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HI(熱滅活)處理血清

 

加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體系統(tǒng)參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

 

實驗顯示,熱滅活血清對大多數(shù)的細胞而言是非必需的,對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長可能造成生長速率降低,沉淀物還會顯著增多,不利于細胞觀察。因此,若非必須,不需要對血清進行滅活處理。

 

如若需要使用熱滅活血清,可通過提高血清溫度到56℃,并且保持該溫度30分鐘完成。建議加放空白對照(同體積水)使用溫度計測溫,以測得溫度為56℃時為計時起始點,加熱中可不時輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。

 

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胚胎干細胞(ES)專用血清

(貨號:C04002-050/100/500)

 

是從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號的血清,適用于人及小鼠胚胎干細胞、成體干細胞及原代細胞長期培養(yǎng)的血清。

 

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間充質(zhì)干細胞(MSC)專用血清

(貨號:C04400-050/100/500)

 

從多個批次的胎牛血清篩選出特定批號的血清,經(jīng)過骨髓,脂肪組織及臍帶來源的間充質(zhì)干細胞的細胞活性嚴格測試,通過傳代及分化比例測試。

 

 

其他動物血清

 

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馬血清

(貨號:C2510-0100/0500/1000)

 

10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。

 

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豬血清

(貨號:C2500-0100/0500/1000)

 

豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng),疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體)中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV),用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化,作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)中的標(biāo)準陰性參考。

 

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兔血清

(貨號:C2520-0100/0500)

 

正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學(xué)和免疫細胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。

 

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羊血清

(貨號:C2530-0010/0100/0500)

 

  • 用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。

  • 用作魚類細胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。

  • 可成功地代替胎牛血清在生長培養(yǎng)基中長期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。

 

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雞血清

(貨號:C2550-0100/0500)

 

適用于單抗研制、規(guī);囵B(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。

 

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驢血清

(貨號:C2540-0010/0100/0500)

 

適用于單抗研制、免疫組化、規(guī)模化培養(yǎng)的疫苗生產(chǎn)、生物醫(yī)學(xué)研究和診斷試劑生產(chǎn)。


 

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