原代細(xì)胞、細(xì)胞株與細(xì)胞系概述和選擇方法
從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。這類細(xì)胞生命周期有限，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞的生長(zhǎng)空間，以保持細(xì)胞群中基因型和表型的一致性。
原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，一般認(rèn)為，原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。
原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。
細(xì)胞株(cell strain)是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。一般認(rèn)為，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
細(xì)胞系(cell line)是原代細(xì)胞經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line)， 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長(zhǎng)穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
原代細(xì)胞與細(xì)胞系該如何選？
原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，一般認(rèn)為，原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞系因其容易培養(yǎng)、種類多、產(chǎn)量可觀的優(yōu)點(diǎn)一直是細(xì)胞水平研究的Shou選，且價(jià)格相對(duì)低廉，但細(xì)胞系“價(jià)廉卻不一定物美”。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程會(huì)不斷發(fā)生突變，長(zhǎng)時(shí)間的多次傳代可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞系的基因型和表型都發(fā)生變化，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如有研究報(bào)道，HEK293經(jīng)腺病毒轉(zhuǎn)染后得到的細(xì)胞更接近未成熟神經(jīng)元細(xì)胞；MDA-435作為乳腺癌細(xì)胞被廣泛用于各種研究，但近年來(lái)越來(lái)越多證據(jù)表明其可能為一種黑色素瘤細(xì)胞。
原代細(xì)胞則不存在這些問(wèn)題，雖然原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)的成本可能相對(duì)更高，但原代細(xì)胞作為更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型，可讓你的研究結(jié)論更加接近“事實(shí)”，且原代細(xì)胞的使用可減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的成本開支。另外在某些人體體內(nèi)無(wú)法進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，原代細(xì)胞因其高度保持了在體內(nèi)的生物學(xué)特性，可在一定程度解決這個(gè)問(wèn)題。
由于永生化的細(xì)胞系與體內(nèi)組織細(xì)胞的生物特性相差甚遠(yuǎn)，導(dǎo)致許多生理和病理的過(guò)程難以重復(fù)，近年來(lái)，原代細(xì)胞正逐步成為細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的Shou選工具，為疾病機(jī)制、藥物研發(fā)等提供了高質(zhì)量的模型。但不可能否認(rèn)的是，細(xì)胞系在科研中的地位仍十分重要，例如在標(biāo)準(zhǔn)化方案的確立上細(xì)胞系是良好的工具，某些需要大量細(xì)胞的研究如全基因組遺傳篩選，由于原代細(xì)胞數(shù)量有限且對(duì)培養(yǎng)條件要求苛刻，細(xì)胞系也是第1選擇。
原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，一般認(rèn)為，原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。
原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞，稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代，進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。
細(xì)胞株(cell strain)是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。一般認(rèn)為，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
細(xì)胞系(cell line)是原代細(xì)胞經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限， 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line)， 如可以連續(xù)培養(yǎng)， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line)， 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長(zhǎng)穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
原代細(xì)胞與細(xì)胞系該如何選？
原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，一般認(rèn)為，原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過(guò)“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)”，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無(wú)限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞系因其容易培養(yǎng)、種類多、產(chǎn)量可觀的優(yōu)點(diǎn)一直是細(xì)胞水平研究的Shou選，且價(jià)格相對(duì)低廉，但細(xì)胞系“價(jià)廉卻不一定物美”。研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)的過(guò)程會(huì)不斷發(fā)生突變，長(zhǎng)時(shí)間的多次傳代可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞系的基因型和表型都發(fā)生變化，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如有研究報(bào)道，HEK293經(jīng)腺病毒轉(zhuǎn)染后得到的細(xì)胞更接近未成熟神經(jīng)元細(xì)胞；MDA-435作為乳腺癌細(xì)胞被廣泛用于各種研究，但近年來(lái)越來(lái)越多證據(jù)表明其可能為一種黑色素瘤細(xì)胞。
原代細(xì)胞則不存在這些問(wèn)題，雖然原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)的成本可能相對(duì)更高，但原代細(xì)胞作為更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型，可讓你的研究結(jié)論更加接近“事實(shí)”，且原代細(xì)胞的使用可減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的成本開支。另外在某些人體體內(nèi)無(wú)法進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，原代細(xì)胞因其高度保持了在體內(nèi)的生物學(xué)特性，可在一定程度解決這個(gè)問(wèn)題。
由于永生化的細(xì)胞系與體內(nèi)組織細(xì)胞的生物特性相差甚遠(yuǎn)，導(dǎo)致許多生理和病理的過(guò)程難以重復(fù)，近年來(lái)，原代細(xì)胞正逐步成為細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的Shou選工具，為疾病機(jī)制、藥物研發(fā)等提供了高質(zhì)量的模型。但不可能否認(rèn)的是，細(xì)胞系在科研中的地位仍十分重要，例如在標(biāo)準(zhǔn)化方案的確立上細(xì)胞系是良好的工具，某些需要大量細(xì)胞的研究如全基因組遺傳篩選，由于原代細(xì)胞數(shù)量有限且對(duì)培養(yǎng)條件要求苛刻，細(xì)胞系也是第1選擇。
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