細胞因子的作用特點及選型和使用注意事項
細胞因子（cytokine，CK）是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長以及損傷組織修復等多種功能。
細胞因子具有以下作用特點：
多向性和靶向性：一種細胞因子可由多種細胞產(chǎn)生，作用于不同的靶細胞。例如，IL-5既可以來源于Th2細胞，也可以來源于肥大細胞，既能活化B細胞增殖，又能促進嗜酸性粒細胞分化、成熟，
即時性：基本不儲存，隨時產(chǎn)生并發(fā)揮作用。
局部性：通常以自分泌或者旁分泌的形式作用于周圍細胞。
相互協(xié)調(diào)：以網(wǎng)絡形式發(fā)揮作用，不同細胞因子間相互抑制或促進。
多重調(diào)節(jié)：發(fā)揮的效應與細胞因子濃度、靶細胞類型、其他細胞因子種類以及種屬有關。
常見細胞因子的作用
| 名稱 | 功能 |
| FGF | 堿性成纖維細胞生長因子，bFGF，F(xiàn)GF basic 或 FGF 2 屬于一個大的 FGF 蛋白家族，后者與包括增殖、生長和分化的細胞發(fā)育的許多方面有關。FGF-basic 是一種維持胚胎干細胞在培養(yǎng)中保持未分化狀態(tài)的關鍵成分。 |
| IL | IL是一類能夠雙向調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的細胞因子家族，主要參與免疫細胞的分化和激活。IL可劃分為IL-1細胞因子家族、共γ鏈細胞因子家族、IL-10細胞因子家族、IL-12細胞因子家族等； |
| EGF | 表皮生長因子，是一種有效的促有絲分裂因子，在體內(nèi)和體外的生長、增殖和各種表皮和上皮組織 和細胞培養(yǎng)中的一些成纖維細胞中起重要作用。EGF 產(chǎn)生的失調(diào)與某些癌癥的生長和進展有關。 |
| INF | 干擾素，具有抗病毒、抑制細胞增殖、調(diào)節(jié)免疫及抗腫瘤作用。 |
由于天然的細胞因子表達量低，分泌具有短時自限性，難以收集提純，一般通過蛋白重組技術(shù)獲得，即先用基因克隆或化學合成技術(shù)獲得目的基因，連接到適合的表達載體，導入到特定的宿主細胞，利用宿主細胞的遺傳系統(tǒng)，表達出有功能的蛋白質(zhì)分子。目前常用的有原核、真核、昆蟲、哺乳動物四種表達系統(tǒng)。
| 表達系統(tǒng) | 特點 |
| 原核 | 產(chǎn)量高、蛋白常為包涵體，無翻譯后修飾，大分子蛋白表達困難 |
| 酵母 | 便于純化，部分翻譯后修飾有時出現(xiàn)蛋白切割問題，糖基化不能滿足要求 |
| 昆蟲 | 表達的大多數(shù)蛋白是可溶的，適合毒性蛋白，表達激酶等定位于細胞內(nèi)的真核蛋白 |
| 哺乳動物 | 完善的翻譯后加工，活性接近天然蛋白，技術(shù)要求高，表達量低 |
選擇細胞因子時要注意以下幾個問題：
·細胞因子作為動物免疫抗原進行檢測類抗體的研究，蛋白純度需大于80%；若用于晶體及晶體結(jié)構(gòu)研究，蛋白純度需大于95%；
·若需選擇不同種屬來源的細胞因子，則要判斷兩種種屬的細胞是否有交叉反應活性。一般來說，不同種屬之間蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上可確定為有交叉活性。
·根據(jù)實驗目的選擇想要的產(chǎn)品時，我們還需要關注一下內(nèi)毒素的水平，特別是作為細胞添加物使用時。
許多老師在收到凍干粉之后由于保存或者溶解不當造成實驗結(jié)果不理想，小愛也遇到過很多老師詢問，產(chǎn)品室溫保存了兩個月還能用嗎？溶解不了怎么回事？細胞因子儲存和溶解其實都很簡單，愛必信的細胞因子說明書中給了明確標注。
1.收到的凍干粉如何處理？
我們收到的凍干蛋白一般不會立即使用，這種情況下可放置-20℃儲存，室溫一般儲存三周左右，具體時間可參照說明書，請老師們妥善保存收到的產(chǎn)品。
2.凍干蛋白一般如何溶解？
敲黑板！��！溶解前，一定要將凍干粉離心收集于離心管底部，不同的凍干蛋白需要的溶解劑不同，比如，abs04698重組人IL4使用中蒸餾水即可溶解， abs04177 IGF-I蛋白需溶解在500mM乙酸中，這是由PH和離子濃度能多種因素決定的，大家一定要仔細閱讀說明書，此外，一定要溶解到說明書推薦的濃度范圍，否則可能會造成不完全溶解或活性減弱。
3.溶解方式
用槍頭輕輕捶打即可，對于相對較難溶解的，可以在低速搖床上靜止兩小時左右，切不可劇烈震蕩。
4.溶解后的蛋白如何儲存呢？
重組蛋白溶液一般可在4-7°C下儲存2-7天。避免反復凍融可將溶液分裝于聚丙烯管中（不會吸附蛋白），在<-20°C下穩(wěn)定保存3個月左右，適當加入載體蛋白（BSA、HAS、FBS等）可減少管壁對重組蛋白的吸附損耗。
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