動物實驗之哈格里夫斯測試實驗方法全解析

哈格里夫斯測試，這一在1988年首度提出的科學(xué)方法，被專門用來量化小鼠和大鼠的后爪在遭受輻射或紅外熱刺激后的熱敏感度閾值。其核心目的在于評估嚙齒類動物，如大鼠和小鼠，對于熱痛的感知程度。這項測試已被廣泛應(yīng)用于探究神經(jīng)損傷與再生過程中，動物對疼痛刺激敏感性的變化或熱痛反應(yīng)恢復(fù)的研究中。

痛覺過敏，指的是個體對疼痛刺激反應(yīng)過度敏感的狀態(tài)。多項實驗證明，許多經(jīng)過臨床驗證的藥物，如阿片類藥物和GABA受體增強(qiáng)劑，能夠延遲動物爪子在熱刺激下敏感性的發(fā)作。同時，足底內(nèi)角叉菜膠作為一種常用的實驗手段，能夠加劇大鼠后爪的痛覺過敏，進(jìn)而被應(yīng)用于痛覺過敏的相關(guān)研究，比如探究嗎啡對熱痛覺過敏大鼠模型的影響。

在實驗過程中，有害的熱刺激通過特定的玻璃裝置，集中施加于后爪的足底表面。一旦動物因無法忍受熱刺激而將爪子移開，設(shè)備會自動記錄下這一縮爪的延遲時間，精確到0.1秒。為了確保實驗動物的安全，設(shè)定了20秒的截止延遲，以避免對動物組織造成損傷。

以下是實驗的具體測試步驟：

首先，選擇一個合適的房間進(jìn)行行為評估，確保環(huán)境安靜且沒有噪音和振動的干擾，以減少動物的焦慮反應(yīng)，確保測試結(jié)果的準(zhǔn)確性。

接著，將動物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到測試室，并讓它們在新環(huán)境中適應(yīng)一段時間，通常為30至60分鐘。在此過程中，動物可能會表現(xiàn)出對新環(huán)境的好奇心，但隨后會逐漸安靜下來。

為了讓動物更好地適應(yīng)測試環(huán)境，建議將它們放回飼養(yǎng)室，并重復(fù)上述適應(yīng)步驟至少兩天。之后，再進(jìn)行正式的哈格里夫斯測試。

在測試前，獲取基線讀數(shù)是非常關(guān)鍵的，這有助于實驗者了解每只動物對熱刺激的初始反應(yīng)，并優(yōu)化測試參數(shù)。

然后，根據(jù)實驗需要設(shè)置紅外強(qiáng)度，并將紅外發(fā)射器/探測器放置在容器上，確保其正對被測試的爪子中心。接下來，密切觀察動物的爪子，直到它們因感受到熱刺激而表現(xiàn)出退縮反應(yīng)。一旦動物因熱刺激而移動爪子，設(shè)備將自動記錄反應(yīng)時間并停止計時。如果動物的爪子移動不是由熱刺激引起的，則該次測試數(shù)據(jù)應(yīng)被排除。

為確保動物的安全，如果動物在20秒內(nèi)未能做出反應(yīng)，應(yīng)立即終止測試，避免潛在的傷害。

最后，為了獲得更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，建議至少重復(fù)測試三次，并計算平均反應(yīng)時間。測試結(jié)束后，小心地將動物放回飼養(yǎng)室，并對測試設(shè)備進(jìn)行徹底清潔，以準(zhǔn)備下一次實驗。