應(yīng)激是機(jī)體對(duì)不協(xié)調(diào)狀態(tài)或環(huán)境穩(wěn)定受到威脅時(shí)所做出的反應(yīng)。一般伴有神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫和行為的變化來(lái)完成身體對(duì)應(yīng)激的應(yīng)答[1]。導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)大小鼠應(yīng)激的原因有很多,如運(yùn)輸、飼養(yǎng)環(huán)境變化、實(shí)驗(yàn)操作等。今天,就讓小賽帶大家就實(shí)驗(yàn)大小鼠的運(yùn)輸應(yīng)激展開討論!
1 導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)大小鼠運(yùn)輸應(yīng)激的主要因素
(1)運(yùn)輸時(shí)間長(zhǎng)短:運(yùn)輸時(shí)間的增加可能會(huì)增加應(yīng)激的累積效應(yīng)。
(2)不同輸運(yùn)方式:如汽車陸運(yùn)車廂內(nèi)空氣不流通、航空運(yùn)輸需要在無(wú)法控溫的停機(jī)坪進(jìn)行裝卸。
(3)運(yùn)輸過(guò)程環(huán)境變化:如高溫、噪聲、振動(dòng)、通風(fēng)不良、運(yùn)輸籠盒中動(dòng)物密度大等。
(4)動(dòng)物自身原因:如孕鼠、老齡鼠、已實(shí)驗(yàn)造模的鼠等。
2 實(shí)驗(yàn)大小鼠運(yùn)輸應(yīng)激的常見(jiàn)表現(xiàn)
(1)體重減輕
舉例1:短途運(yùn)輸后的Wistar大鼠體重迅速下降,體重丟失率隨著運(yùn)輸時(shí)間的延長(zhǎng)呈增大趨勢(shì)(見(jiàn)圖1)[2]。
舉例2:作者以676只3-9周的大小鼠為研究對(duì)象,在溫控運(yùn)輸車內(nèi)運(yùn)輸約24h,大、小鼠平均體重分別下降3.71%和0.9%。不同品系小鼠體重變化不同,C57BL/6小鼠變化最明顯(平均下降4.69%),而ICR小鼠僅下降0.5%[3]。
(2)行為變化
舉例:如異常興奮/翻轉(zhuǎn)/轉(zhuǎn)圈
(3)大小鼠過(guò)熱流涎
舉例:大小鼠汗腺不發(fā)達(dá),高溫高濕環(huán)境下會(huì)出現(xiàn)唾液打濕嘴邊毛發(fā)的現(xiàn)象。圖中3只小鼠精神狀態(tài)較差,嘴部周圍毛發(fā)潮濕,明顯是小鼠過(guò)熱導(dǎo)致了流涎。
(4)動(dòng)物死亡
舉例:航空運(yùn)輸時(shí),為防止籠盒的通風(fēng)濾膜被刮破,通常要求在籠盒上下分別加珍珠棉,此時(shí)籠盒主要通過(guò)兩側(cè)濾膜進(jìn)行通風(fēng)。下圖中,為防止小鼠逃逸,在運(yùn)輸籠盒外還額外加了一層鐵絲網(wǎng),導(dǎo)致運(yùn)輸籠盒內(nèi)通風(fēng)不良,最終接收時(shí)整籠小鼠已死亡。
除了以上能直接觀察到的表現(xiàn),還有一些不易觀察的指標(biāo):
(5)生理參數(shù)(如心率、呼吸頻率、血壓、生理生化指標(biāo)等)發(fā)生改變
舉例:經(jīng)歷1.5h短途運(yùn)輸后的BALB/c和ICR小鼠的血糖、外周白細(xì)胞總數(shù)、血清皮質(zhì)酮、白介素2和β-內(nèi)啡肽等指標(biāo)均出現(xiàn)下降,在常規(guī)飼養(yǎng)條件下自然恢復(fù)至少需要72h[4]。
(6)組織臟器出現(xiàn)病理?yè)p傷
舉例:相關(guān)報(bào)道指出運(yùn)輸應(yīng)激能導(dǎo)致小鼠小腸(十二指腸、空腸和回腸)[5]、肺臟[6]及免疫器官(胸腺、淋巴結(jié)和脾臟)[7]等組織臟器出現(xiàn)不同程度的病理?yè)p傷。
(7)影響小鼠胚胎發(fā)育
舉例:作者對(duì)14只孕中期(懷孕8~10 d)的小鼠進(jìn)行約15h的長(zhǎng)途運(yùn)輸,結(jié)果顯示于對(duì)照組相比,運(yùn)輸應(yīng)激組的活胎率下降和死胎率增加[8]。
3 預(yù)防大小鼠運(yùn)輸應(yīng)激&加快恢復(fù)的措施
(1)運(yùn)輸前對(duì)大小鼠進(jìn)行全面的臨床觀察,確保動(dòng)物健康。
(2)根據(jù)不同動(dòng)物和不同運(yùn)輸方式選用合適的運(yùn)輸籠盒,若是汽車運(yùn)送小鼠,可選用紙箱、類紙箱;若是大鼠發(fā)貨或者航空運(yùn)送小鼠,則需要鐵絲籠+塑料盒配套使用。鐵絲籠使用前仔細(xì)檢查是否有凸出的倒刺,避免動(dòng)物受傷。
(3)在運(yùn)輸籠盒中鋪上足量的墊料、添加適量飼料和補(bǔ)水果凍,可根據(jù)需要添加環(huán)境豐富物,如紙條、窩料、紅房子等。
(4)盡可能避免極端天氣運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。若在高溫天氣運(yùn)輸大小鼠,盡量選擇全程控溫的動(dòng)物運(yùn)輸專用車或晚上的航班進(jìn)行運(yùn)輸,同時(shí)降低運(yùn)輸籠盒中的動(dòng)物密度,并盡可能多的添加冰袋降溫。
(5)運(yùn)輸過(guò)程中,確保運(yùn)輸籠盒被妥善放置,盡量避免動(dòng)物摔落、或因通風(fēng)不良等意外的發(fā)生。
(6)動(dòng)物到目的地后,盡快安排接收。若無(wú)法馬上接收,則需要先通過(guò)觀察窗確認(rèn)動(dòng)物狀態(tài),若動(dòng)物狀態(tài)較好可先將其暫放在安靜且有空調(diào)的區(qū)域。
(7)動(dòng)物接收時(shí),可將原運(yùn)輸籠盒中的環(huán)境豐富物部分轉(zhuǎn)移至飼養(yǎng)籠盒中,減少動(dòng)物因環(huán)境變化引起的應(yīng)激。不同籠盒/籠格來(lái)源的大小鼠,盡量不做并籠飼養(yǎng),避免出現(xiàn)打架的情況。
(8)對(duì)運(yùn)輸后的大小鼠進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng):如經(jīng)歷短途運(yùn)輸(1.5h以內(nèi))的實(shí)驗(yàn)大鼠至少恢復(fù)3天[2]。若經(jīng)歷長(zhǎng)途運(yùn)輸,則應(yīng)適當(dāng)延長(zhǎng)適應(yīng)期,一般為5-7天。
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參考文獻(xiàn):
[1]周小江,邵青,張新創(chuàng).觀察分析不同環(huán)境因素對(duì)小鼠應(yīng)激反應(yīng)的作用[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展, 2013(02):33-36.
[2]楊斐.短途運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)實(shí)驗(yàn)大鼠和小鼠的影響及干預(yù)研究[D].復(fù)旦大學(xué),2008.
[3]Lee S , Nam H , Kim J ,et al.Body Weight Changes of Laboratory Animals during Transportation[J].Asian Australasian Journal of Animal Sciences, 2012, 25(2).
[4]胡櫻,楊斐.小鼠短途運(yùn)輸應(yīng)激及其營(yíng)養(yǎng)干預(yù)的研究[J].實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué), 2012, 29(3):5.
[5]溫宇婷,劉犇,章志濤,等.運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)小鼠腸道的病理?yè)p傷及Bcl-2和Bax表達(dá)的影響[J].中國(guó)畜牧雜志, 2020, 56(5):6.
[6]劉犇.運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)小鼠肺臟顯微和超微結(jié)構(gòu)及熱休克蛋白表達(dá)的影響[J].中國(guó)畜牧雜志, 2018, 54(9):5.
[7]胡威,鄭路程,易金鑫,等.運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)小鼠免疫器官結(jié)構(gòu)及熱休克蛋白表達(dá)的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2021(005):047.
[8]李小娟.長(zhǎng)途運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)孕中期小鼠胚胎發(fā)育的影響[J].中國(guó)畜牧雜志, 2019, 55(10):6.