下肢缺血試驗應用血管新生是缺血性心血管疾病血流阻塞后改善血流灌注的重要機制。然而,目前臨床上尚缺乏一種簡單、無創(chuàng)和特異的直接評價血管新生的方法。下肢缺血試驗是進行血管新生評價的重要試驗。方法是使用大鼠或小鼠予結(jié)扎一側(cè)下肢股動脈制備下肢缺血模型,另一側(cè)下肢作為對照組。術(shù)后使用激光多普勒血流成像儀對雙后肢進行掃描成像,分析后肢血流量。然后每周對雙后肢進行掃描成像,分析后肢血流恢復狀況。
下肢缺血試驗是進行缺血性心血管病與治療性血管新生研究的重要方法,可以將促血管新生因子注入體內(nèi),促進缺血局部血管新生與側(cè)支循環(huán),改善組織的血液供應與功能,進而評價促血管新生因子的作用。促血管新生因子可以是促血管新生藥物、蛋白、基因和干細胞治療。
除心臟血管疾病研究外,還可使用下肢缺血試驗評價糖尿病、外周血管疾病、傷口愈合等方面的血管新生研究。
所需設(shè)備
MoorLDI2-HIR點掃描激光多普勒血流成像(Gene&I,北京) AMG小動物麻醉機(Gene&I,北京)
剃毛刀和脫毛膏
試驗過程
將大鼠或小鼠使用麻醉機進行麻醉。
將后肢使用脫毛膏進行脫毛處理。
剪開其中一側(cè)后肢皮膚,分離肌肉分離出股動脈。
使用縫合線在緊貼腹股溝處對股動脈進行結(jié)扎。
縫合傷口,使用激光多普勒掃描儀對雙下肢進行血流掃描成像。
分析缺血側(cè)下肢與正常側(cè)血流灌注量對比。
試驗結(jié)果
手術(shù)后當天,缺血側(cè)肢體相對于正常側(cè)缺血率可達80-90%。
在使用促血管新生因子后,可觀察到缺血側(cè)肢體血流恢復過程。
Reference
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吉安得爾下肢缺血國內(nèi)合作單位
軍事醫(yī)學科學院6所
復旦大學基礎(chǔ)醫(yī)學院
華東師范大學
北京大學醫(yī)學部
中科院生物物理所
四川大學華西再生醫(yī)學研究中心
四川醫(yī)科大學