賽默飛離心小課堂 |如何利用超速離心法純化外泌體

細(xì)胞作為我們生命最小的單位，我們有宏觀的溝通，他們自然也有微觀的溝通。而這細(xì)胞的“語言”，就是外泌體系統(tǒng)。

外泌體系統(tǒng)的意義

簡單的來說，細(xì)胞通過分離自己的一部分膜，把自己“情話”（核酸，蛋白等）包裹成外泌體釋放出去，最后融入到別的細(xì)胞里進(jìn)行溝通。對(duì)于我們?nèi)祟悂碚f，破解了外泌體系統(tǒng)等于破解了細(xì)胞溝通的密碼，對(duì)于我們生命科學(xué)發(fā)展意義非凡。

用超速離心法純化外泌體

研究外泌體的第一步，那一定是得先把這些小家伙給抓住。雖外泌體分離市場(chǎng)上百花齊放。 但這些分離技術(shù)都在純度上不盡人意。得到最純的外泌體，揭開他們背后的故事，超速離心技術(shù)是最好的選擇。

那么，

如何選擇合適的離心機(jī)

進(jìn)行外泌體離心分離？

賽默飛世爾是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的世界領(lǐng)導(dǎo)者，旗下離心機(jī)產(chǎn)品一直以安全可靠與無微不至的便捷性著稱。

▶Thermo Scientific Sorvall WX+系列超速離心機(jī)

卓越的離心性能：最大離心力達(dá)802,000 xg，滿足外泌體純化實(shí)驗(yàn)需要

多樣的轉(zhuǎn)頭選擇可離心從1.5 mL離心管到250 mL離心瓶的各式離心容器，滿足您實(shí)驗(yàn)室離心各種應(yīng)用的需要，盡顯無以倫比的便捷性。

·Auto-Lock轉(zhuǎn)頭自鎖，3秒即可更換轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn)一機(jī)多用；Auto-ID瞬時(shí)轉(zhuǎn)頭自動(dòng)識(shí)別

·第三方認(rèn)證Clickseal生物安全性密封技術(shù)，防止氣溶膠產(chǎn)生，保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全

·永不疲勞的Fiberlite轉(zhuǎn)頭，重量輕，硬度大，耐腐蝕，提供15年質(zhì)保，終身無需減速使用

 
 

近日，麻省綜合醫(yī)院（MGH）的研究人員開發(fā)的一款新型微流體裝置。 該裝置可以利用微流控技術(shù)快速檢測(cè)血液中癌癥細(xì)胞來源的外泌體，以此作為癌癥診斷手段。

通訊作者Shannon Stott教授說，他們的設(shè)備能夠從在血液中數(shù)十億細(xì)胞外囊泡中挑選出腫瘤特異的細(xì)胞外囊泡。這將為未來癌癥診斷及監(jiān)控提供新的方法。[1]

由此看來，外泌體的應(yīng)用可謂是越來越廣泛了。這一技術(shù)也符合了當(dāng)今精準(zhǔn)醫(yī)療的熱點(diǎn)“液體活檢”思想， 應(yīng)用前景可謂十分的光明。關(guān)于液體活檢，它另一個(gè)簡單粗暴的名字叫“滴血驗(yàn)癌”。想了解“液體活檢”的看官可以繼續(xù)關(guān)注我們的微信公眾號(hào)。我們往后會(huì)有詳細(xì)敘述。

那么，超速離心技術(shù)在外泌體研究中到底是如何運(yùn)用的呢？

用超速離心法純化外泌體

參考實(shí)驗(yàn)流程

1.首先取細(xì)胞培養(yǎng)液上清或體液作為樣本，低速離心300 xg，10 min，分離出細(xì)胞；留上清 2000 x g離心，10 min，去除死細(xì)胞。

2.剩下上清繼續(xù)提高離心力到10000 xg，30 min，去除細(xì)胞碎片，處理好后的上清可準(zhǔn)備進(jìn)行超速離心步驟。以100,000 xg的離心力，離心70 min，得到粗制外泌體沉淀（含有少量雜蛋白）。

3.用PBS重懸外泌體沉淀，再次100,000 xg，離心70 min，即可得到純凈的外泌體。[2]

如何選擇合適的離心機(jī)進(jìn)行外泌體離心分離？

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Auto-Lock™ III 轉(zhuǎn)頭自鎖系統(tǒng)，3秒即可更換轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn)一機(jī)多用；Auto-ID瞬時(shí)轉(zhuǎn)頭自動(dòng)識(shí)別

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*此方案僅供參考，并未涵蓋所有轉(zhuǎn)頭、吊籃、適配器及離心管。 如有需要詳細(xì)配置方案，請(qǐng)聯(lián)系當(dāng)?shù)劁N售。

文章來源：

[1] Engineered nanointerfaces for microfluidic isolation and molecular profiling of tumor-specific extracellular vesicles. Nat. Commun. 2018,9(1):175.

[2] Théry, Clotilde, et al. “Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Supernatants and Biological Fluids.” Current Protocols in Cell Biology, 2006, doi:10.1002/0471143030.cb0322s30.