脂質(zhì)體藥物分析表征解決方案

正是由于脂質(zhì)體能夠?qū)⒍靖弊饔么蟆⒃谘�液中穩(wěn)定性差、降解快的藥物包裹，并將藥物濃集于病灶部位達(dá)到緩釋或靶向給藥的目的，正作為藥物載體被應(yīng)用于小分子藥物、蛋白質(zhì)藥物、核酸藥物和顯像劑等。目前，全球共有14個脂質(zhì)體產(chǎn)品獲批上市，分別是：

脂質(zhì)體最早由英國學(xué)者于1965年發(fā)現(xiàn)，是脂質(zhì)自組裝形成的雙層（單層）和/或同心多個雙層（多層）封閉中心水腔的藥物囊泡。脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)與細(xì)胞膜極其類似，使其具有高度的生物相容性和生物可降解性，將藥物包裹，可以提高藥物的穩(wěn)定性，降低藥物的毒性，提高給藥劑量。同時，脂質(zhì)體的雙親性磷脂形成的雙分子層表面，可以通過物理或者化學(xué)手段，與配體或者其他功能基團進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾使其具有組織靶向性。另外，通過改變雙分子層表面的電荷，可用于DNA和RNA藥物的包載和遞送。

脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)（來源：醫(yī)學(xué)百科）

脂質(zhì)體藥物根據(jù)結(jié)構(gòu)可將其分類為單室、多囊與多層。單室脂質(zhì)體是目前最常見的一種結(jié)構(gòu)，只具有一個可以載藥的空腔。如鹽酸阿霉素脂質(zhì)體（Doxil），由于脂質(zhì)體外殼的存在，鹽酸阿霉素在體內(nèi)的穩(wěn)定性更高，藥物濃度下降較慢，從而延長了其藥效。此外，脂質(zhì)體外殼還可以減少鹽酸阿霉素對心臟和造血系統(tǒng)的毒性。多囊脂質(zhì)體與多層脂質(zhì)體可以分別比喻為“石榴”和“洋蔥”，即多囊脂質(zhì)體具有多個蜂巢狀排列的空腔，而多層脂質(zhì)體具有多個層累堆疊的空腔，均具有出色的緩釋效果。如最早由美國Pacira公司研制的布比卡因脂質(zhì)體注射液，采用多囊脂質(zhì)體藥物遞送系統(tǒng)，可將鎮(zhèn)痛效果延長至數(shù)天。

由于脂質(zhì)體藥物的組成、結(jié)構(gòu)、尺寸、表面性質(zhì)、藥物包封率、載藥量、藥物存在形式等可顯著影響其穩(wěn)定性、藥物釋放以及脂質(zhì)體-生物膜之間的相互作用，進(jìn)而影響藥物的安全性和有效性。因此，需對脂質(zhì)體藥物的質(zhì)量進(jìn)行深入研究和有效控制。丹納赫生命科學(xué)擁有一些列脂質(zhì)體藥物的表征方案，可對脂質(zhì)體進(jìn)行多方位的分析。

對于脂質(zhì)體藥物的形態(tài)、粒徑及其分布，常采用電鏡、激光散射法或激光掃描法測定。丹納赫生命科學(xué)旗下徠卡顯微系統(tǒng)的EM GP2 自動投入冷凍儀，可對脂質(zhì)體樣本進(jìn)行冷凍透射電鏡前的載網(wǎng)冷凍處理，采用冷凍透射電鏡對脂質(zhì)體進(jìn)行觀察可以減少電子束對樣品的損傷，降低樣品的形變，獲得更真實的樣品形貌。EM GP2 的紅外線傳感器能夠精確控制濾紙吸附，使樣品分布均勻，結(jié)合單面平行吸附，能夠在不破壞碳膜的情況下，獲得更大面積的載網(wǎng)可用范圍。

徠卡顯微系統(tǒng)的EM GP2全自動快速投入冷凍儀

對脂質(zhì)體藥物進(jìn)行載網(wǎng)冷凍處理
（來源：電子顯微學(xué)報2012）

包封率是脂質(zhì)體藥物特有的質(zhì)量屬性，它是指被包裹物質(zhì)(如某藥物)在脂質(zhì)體懸液中占藥物總量的百分量。丹納赫生命科學(xué)旗下貝克曼庫爾特生命科學(xué)的分析型超速離心機AUC可通過離心沉降法進(jìn)行脂質(zhì)體藥物包封率的檢測。如對阿霉素脂質(zhì)體的檢測，AUC通過對阿霉素脂質(zhì)體、游離阿霉素以及空脂質(zhì)體的不同紫外吸收波長進(jìn)行包封率的測定和計算。AUC作為一種遵循第一性原理、使用樣品原始溶液的方法，通過檢測脂質(zhì)體藥物沉降系數(shù)分布，還可得到樣品的純度信息。

貝克曼庫爾特生命科學(xué)的分析型超速離心機

AUC對阿霉素脂質(zhì)體的包封率檢測

正是由于脂質(zhì)體藥物特有的質(zhì)量屬性，它在注入血液后，會存在脂質(zhì)體包封的藥物、非包封的藥物和空脂質(zhì)體三種形式。根據(jù)2015年FDA指南草案，要批準(zhǔn)具有持續(xù)釋放功能的新脂質(zhì)體制劑，必須考慮三個標(biāo)準(zhǔn)：脂質(zhì)體載體本身的清除率，被包封的藥物從脂質(zhì)體載體中釋放的速率以及自由藥物釋放后的清除和代謝。因此，檢測脂質(zhì)體相關(guān)藥物和游離(或非脂質(zhì)體)藥物的血漿濃度，對于脂質(zhì)體制劑的藥代動力學(xué)研究和安全性評價是必要的。而且，需要一種合適且可靠的樣品制備方法，將未包封藥物與脂質(zhì)體包封藥物分開。 

SPE法是常見的前處理方法，當(dāng)樣品加載到SPE柱中時，未封裝的藥物會保留在SPE柱上，脂質(zhì)體成分會通過并收集在洗脫液中。然后用有機溶劑洗脫柱，以收集未包封的藥物，洗脫液中的脂質(zhì)體需要進(jìn)一步處理以破壞脂質(zhì)體并釋放出藥物用于后續(xù)分析。

SPE法進(jìn)行脂質(zhì)體藥物前處理的典型步驟

丹納赫生命科學(xué)旗下艾杰爾-飛諾美擁有多種不同類型的SPE柱及96孔微孔板，可用于脂質(zhì)體藥物的制劑以及生物學(xué)分析前處理。其中SPE微孔板最低只需要25µL的洗脫體積，比傳統(tǒng)96孔板節(jié)省時間，并且能夠減少熱敏感型化合物回收率損失。

艾杰爾-飛諾美的SPE產(chǎn)品

由于理化結(jié)構(gòu)帶來的優(yōu)越生物相容性和可編輯性帶來的靶向給藥潛力，脂質(zhì)體遞送受到廣泛關(guān)注，并且在臨床上有進(jìn)一步的應(yīng)用。但是其工藝流程、保存、安全性等方面還具有一定的挑戰(zhàn)，企業(yè)需要不斷創(chuàng)新，加強產(chǎn)品研發(fā)和質(zhì)量控制，才能在市場中取得競爭優(yōu)勢。