嘔吐毒素偶聯(lián)抗原(完全抗原)合成方法技術(shù)

         嘔吐毒素偶聯(lián)抗原(完全抗原)合成方法技術(shù)
　　　嘔吐毒素其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌侏，其主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物。嘔吐毒素具有雌激素作用，主要作用于生殖系統(tǒng)，可使家畜，家禽等產(chǎn)生雌性激素亢進癥。食用含嘔吐毒素的面粉制作的各種面食也可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中毒癥狀，如惡心、發(fā)冷、頭痛、神智抑郁和共濟失調(diào)等。妊娠期的動物(包括人)食用含嘔吐毒素的食物可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎，因此建立快速、靈敏、準確的嘔吐毒素檢測技術(shù)對人類健康具有重要意義。
　　　目前，嘔吐毒素的檢測方法有液相色譜法，酶聯(lián)免疫法，免疫膠體金法，
（1）嘔吐毒素半抗原合成（合成技術(shù)路線見下圖）
 20-100mg嘔吐毒素,與1-3mol馬來酸酐，在2-5ml甲苯中，于80℃攪拌反應，8-20h后，蒸干溶劑，酸化，萃取，重結(jié)晶后得到嘔吐毒素半抗原。
（2）嘔吐毒素全抗原合成
將嘔吐毒素半抗原與牛血清白蛋白歐聯(lián)得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS（0.01mol/L,pH5.0）溶液中，加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg嘔吐毒素半抗原，室溫攪拌1h,再加6mg EDC，暗處攪拌反應并過夜，用0.01mol/LPBS透析3天，每天換3次透析液，得到嘔吐毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。