大小鼠尾靜脈注射難點指導(dǎo)

實驗動物中采用的給藥方法眾多，根據(jù)藥物性質(zhì)和實驗?zāi)康牟煌�，需要采用不同的給藥方式，如上一期介紹的灌胃、腹腔、皮下注射及靜脈注射給藥，在這幾種給藥方式中尾靜脈給藥難度最大，卻也是我們不可或缺的實驗技能。今天，就和大家分享下尾靜脈注射的技巧。

本次文章內(nèi)容豐富全面，主要分為2部分，尾靜脈注射基本步驟和技術(shù)深度分析與拓展，涵蓋幾種小鼠品系的尾靜脈注射技巧，并附有專業(yè)視頻分析，非常值得大家閱讀哦！

Part Ⅰ   實驗基本步驟

1. 準備工作 （1ml注射器，酒精棉球，小鼠固定器）如下圖：

2. 小鼠的固定  （3種方式）

尾靜脈注射時需要把小鼠固定，前部有氣孔保證小鼠呼吸，后部可以將尾部拉出，露出尾巴即可。最好使用小鼠固定器，不要讓小鼠在固定器中有太多活動空間，防止注射時亂動。

然而我們卻總是面臨小鼠固定器損壞或丟失的情況，或者有的同學(xué)壓根嫌棄固定器，覺得安裝起來太麻煩，這里分享給大家2個替補的好方案，簡單快捷。

籠蓋壓尾法：動物籠蓋子露出尾巴，注射時最好讓人幫你扶住籠子，固定住小鼠。

離心管固鼠法： 用手邊50ml離心管，底部開若干小口便于小鼠呼吸，然后把蓋子戳一個洞，拉出鼠尾，為了讓小鼠順利進入離心管，可用黑布包裹試管，注射時用膠帶把離心管固定在實驗臺上。

3. 找準尾靜脈，并擴張血管

相信有一個困惑很多人的問題，尾靜脈到底是哪條？這么細小，能扎進去嗎？

首先，想找準小鼠靜脈血管，必須了解尾靜脈組成。結(jié)合下圖所示：

一般來講，小鼠尾部有3條靜脈，位于背側(cè)和左右兩側(cè)，由于背部靜脈較深且細，一般選擇左右兩側(cè)尾靜脈進行注射；另外1條動脈，位于腹側(cè)。

第二步：擴張靜脈血管（3種途徑）

鑒于小鼠尾靜脈細小并且不明顯，所以在注射之前需要將血管擴張，便于注射。

① 可以將小鼠尾部在45~50℃左右溫水浸浴2min，以擴張靜脈；

② 用酒精擦拭血管，可使血管擴張，同時也可軟化表皮角質(zhì)；

③ 利用紅外線烤燈加熱鼠尾3-5min，使靜脈充盈。

4. 注射（最關(guān)鍵最困難部分）

當我們準備好注射藥物，找準尾靜脈固定后，就開始進行注射了。具體步驟如下：

①左手固定鼠尾，右手持注射器，第一次注射從距尾尖2~3cm處（1/3處）進針。在這進針的原因有2個：此處皮膚較薄，血管清晰，進針容易；而且一旦注射不成功，再次注射時有更多近端注射的余地；

②右手進針時針頭與桌面平行，一旦進入，將針頭稍稍上挑；

③待針頭進入血管后見回血，立即注射，注射時可明顯地感覺到針行通暢，毫無阻力，代表注射成功；若針頭不在靜脈血管中，手感針行有阻力，注射失��；

④注射完畢后，為了避免藥物流出，針頭緩慢旋轉(zhuǎn)抽出；

⑤注射后小鼠傷口處理，用紗布或者酒精棉球按壓傷口，直到不出血為止，一般3-5min，這樣有利于創(chuàng)口盡快恢復(fù)，以利于下次注射。

注意事項：

① 進針時不要太深，針頭入血管后馬上把針頭略往上，平行進針；

② 注射時如果阻力較大，甚至出現(xiàn)滲液，則說明不在靜脈內(nèi)，需要拔出再次注射；

③注射時推液時不要過快，平緩注射；

④注射器吸入藥液后，務(wù)必一定要將空氣推出，防止因空氣進入心臟，造成小鼠死亡，切記：不可注射含有空氣的液體。

便于更好理解，以裸鼠和小白鼠為例，請大家花1min時間，觀看下面視頻：

https://v.qq.com/x/page/x0395gqs2tf.html

Part Ⅱ   技術(shù)深度分析與拓展

1. 注射成功案例分析

結(jié)合上面動圖，我們可以看到注射成功的特點：

① 進針時，針頭可見少量回血，代表注射到靜脈

② 注射到靜脈，推液幾乎沒有阻力

③ 隨著藥液推進，能清晰看到液體在血管流動

④ 拔針時，傷口處會有少量血液和藥液的混合物

如下圖為注射成功后的尾巴：傷口處會有少量血液和藥液的混合物

2. 注射失敗案例分析

結(jié)合上面動圖，我們可以看到注射失敗的特點：

① 如果注射到靜脈以外，強行推液，阻力較大

② 注射時，液體無法進入從而導(dǎo)致血管變白

③ 出針后，對于有大量血或者藥液大量滲出

④ 由于失敗后尾部會有淤血，尾巴顏色變暗并腫脹

如下圖為注射失敗的尾巴：有大量血液和藥液的混合液滲出

3. 不同品系的小鼠如何對待

不同品系的小鼠尾靜脈的組成幾乎是一樣的，只是不同品系和膚色的小鼠尾巴的識別度不一樣，所以我們需要區(qū)別對待。

① 裸鼠（注射最簡單）尾巴如下圖：

因為裸鼠的靜脈血管呈扁平狀且細小，但特別容易識別，因此在各類小鼠品系中注射最簡單；按上述操作即可。

② 小白鼠 （注射比較簡單）尾巴如下圖：

一般小白鼠的靜脈血管在酒精擦拭后，比較清晰可見，注射時比較簡單。

③ 小黑鼠（注射最難）尾巴如下圖：

小黑鼠的血管不易辨別，所以需要紅外燈等外界條件輔助下，充分刺激后使其血管盡量擴張，便于識別；另外尾巴皮膚較硬，適當控制力度。

4. 靜脈注射物為：細胞系、病毒、細菌時等如何處理？

尾靜脈注射除了作為一種常見的給藥方式，也有很多其他應(yīng)用。如全身性的白血病模型、小鼠乳腺癌肺部轉(zhuǎn)移模型，均需要將腫瘤細胞利用尾靜脈方式注射。例如還有模擬其他細菌、病毒等感染模型，也常需要尾靜脈注射。

注射手法和藥物注射基本一樣，但還是需要注意一下幾點！

① 相比藥液，注射的細胞更加粘稠，所以一定要均勻稀釋后，吸入注射器；

②確認靜脈血管后，由于細胞，細菌及病毒等對小鼠身體傷害大，一定緩慢注射，過快會造成小鼠休克，嚴重的話會造成小鼠死亡；

③ 注射大量細胞或者病毒后，小鼠會變得虛弱，體溫變涼，需放置于37℃的恒溫平臺上；

④ 腫瘤細胞、病毒及細菌等注射時，一定要做好防護工作，避免液體濺出，造成自身傷害。

5. 對于SD大鼠的注射

基本操作步驟和小鼠差不多，重點是在于：

① 老鼠個體大，一定要固定好保證一定不能亂動；

② 充分暴露尾靜脈，可以拿溫水多泡或者酒精多擦試幾次。

看了咱們這篇圖文并茂的文章，有沒有覺得尾靜脈注射并不難呢，牢記文章所說的幾點實驗技巧，并且心平氣和地地多加練習(xí)，相信你一定可以完成。當然了，如果你的實踐操作中有任何難題，可以給我們留言，我們盡力幫你解答。