為小鼠子孫滿堂助力--IVF VS 自然合籠

同學(xué)們有木有經(jīng)歷過小鼠繁殖了好幾代目標小鼠的數(shù)量卻一直達不到實驗需求的情況？遇沒遇到過實驗室某個傳了許多代的小鼠種群數(shù)量卻越來越少，最后只有一只獨苗的情況？

碰到這種自然繁育難題的時候，IVF(In vitro fertilization)技術(shù)就成為獲得更多小鼠和穩(wěn)定種群的最佳方式。所謂IVF就是將雌雄配子在體外受精并植入假孕母鼠體內(nèi)獲得子代小鼠的技術(shù)。

技術(shù)優(yōu)勢

通常的自然繁育方式是自然合籠，與自然合籠繁殖相比，IVF具有以下幾個優(yōu)勢：

其實IVF對自然合籠的優(yōu)勢，我們從二者的繁育方案也能窺見一斑。以2對雜合子起始擴繁16對雜合子為例：

IVF方案

自然合籠方案

我們可以看到，通過IVF的繁殖方式，經(jīng)過一輪繁殖只需要2對雜合雄鼠就可以得到目的數(shù)量的子代；而對比自然合籠方法，同樣兩只突變雄鼠，繁殖時間多了將近半年。因此，IVF 作為一種優(yōu)秀的代養(yǎng)繁殖手段應(yīng)用在多種繁殖項目中。

操作流程

說過了IVF的優(yōu)勢，我們再簡單和大家聊聊IVF的操作流程。

IVF操作具體分四步：

體外受精用培養(yǎng)皿準備

實驗開始前一天在35 mm培養(yǎng)皿中加入2個200 μL TYH培養(yǎng)基液滴

精子的采集

(1) 將符合要求的性成熟（8周以上）的雄鼠頸椎脫臼處死，取出附睪上體尾部，去除脂肪與血跡后，置于一個TYH液滴內(nèi)。

(2) 利用眼科剪在液滴內(nèi)橫斷附睪尾，當精子充分游離出附睪尾后，將組織從液滴內(nèi)取出，將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱。

圖1. 雄鼠取精操作

卵母細胞的收集

處死超排后的雌鼠，取出兩側(cè)的輸卵管，置入培養(yǎng)皿取出卵丘細胞團放入200 μL TYH培養(yǎng)基。

精卵混合

用10 μL移液器從精子滴吸取獲能后的精子，加到卵子液滴中，根據(jù)卵團大小情況以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。將精卵混合后，把培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

體外受精完成后將胚胎移入假孕母鼠子宮，21天后小鼠就會出生了。

圖2. 胚胎移植操作

今天的小鼠IVF的知識就跟大家聊到這里啦。百奧賽圖依托海門動物中心，致力于為您提供更好的實驗動物繁育服務(wù)，每年還會舉辦小鼠飼養(yǎng)、繁育培訓(xùn)，手把手帶大家學(xué)習(xí)IVF、精子冷凍和胚胎移植等小鼠繁育技術(shù)，請大家多多關(guān)注哦。
 

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