珀金埃爾默高內(nèi)涵系統(tǒng)助力中國科學(xué)家新冠肺炎研究

廈門大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院夏寧邵、張?zhí)煊�團(tuán)隊(duì)，與廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院李志勇團(tuán)隊(duì)、中國疾病預(yù)防控制中心黃保英團(tuán)隊(duì)聯(lián)合研究，基于VSV-SARS-CoV-2-Sdel18假病毒和ACE2過表達(dá)BHK21細(xì)胞構(gòu)建了一套穩(wěn)定的中和評價體系。本月初，該研究論文發(fā)表在預(yù)印本平臺bioRxiv上。
 

本研究對攜帶SARS-CoV-2全長或截短S蛋白的G蛋白缺陷型水泡性口炎病毒(VSVdG)的假病毒包裝效率以及不同細(xì)胞系用于假型病毒包裝和感染的效率進(jìn)行了評價。研究發(fā)現(xiàn)，VSV-SARS-CoV-2-Sdel18（C末端截短18個氨基酸的S蛋白）的病毒包裝和感染效率遠(yuǎn)高于VSV-SARS-CoV-2-S。而在本研究所使用的細(xì)胞系中，穩(wěn)定表達(dá)人ACE2的BHK21-hACE2對感染最敏感，Vero-E6對感染也有中等程度的敏感性，BHK21細(xì)胞對假病毒幾乎不敏感。基于VSV-SARS-CoV-2-Sdel18假病毒和ACE2過表達(dá)BHK21細(xì)胞(BHK21-hACE2)，建立了抗體篩選和驗(yàn)證的中和分析模型。通過對EGFP陽性的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)指征假病毒的感染情況，從而保證了高通量檢測能力。研究表明，用VSV-SARS-CoV-2-Sdel18假病毒法測定19例恢復(fù)期患者血清中和效價，與SARS-CoV-2活病毒法測定結(jié)果有較好的相關(guān)性。同時評價了7種抗SARS-CoV-2-S受體結(jié)合區(qū)(RBD)中和小鼠單克隆抗體(mAbs)的中和活性。該模型的高效性可助力針對SARS-CoV-2的新藥和疫苗研發(fā)。

不同細(xì)胞系假病毒感染效率比較。比較攜帶SARS-CoV-2 S蛋白或VSV G蛋白的VSVdG病毒在Vero-E6、BHK21、293T和BHK21-hACE2細(xì)胞系中的感染效率。