ATS細(xì)胞破碎專用設(shè)備在實(shí)驗(yàn)操作中的實(shí)用技巧

生物工藝過程流程圖

 
 

 

 

      如圖所述，細(xì)胞破碎是分離純化的關(guān)鍵第一步， 經(jīng)過發(fā)酵得到細(xì)胞后，由于目的產(chǎn)物都在細(xì)胞的內(nèi)部，需用通過高壓細(xì)胞破碎儀，將細(xì)胞破碎開，把胞內(nèi)產(chǎn)物釋放出來，后續(xù)的分離純化才好進(jìn)行。

 

 

 
ATS細(xì)胞破碎專用設(shè)備
 

 

 

設(shè)計(jì)原理與技術(shù)參數(shù)： 

    ATS 細(xì)胞專用破碎機(jī)主要從三個(gè)方面對設(shè)備進(jìn)行專門設(shè)計(jì)，用以滿足細(xì)胞破碎提取病毒方面的要求：

   1. ATS 專有的內(nèi)置冷卻模塊，可以保證破碎過程中樣品都處在 4 度的低溫狀態(tài)

 

   2. ATS 柱塞設(shè)計(jì)為 2 級夾套隔離，可保證與樣品接觸的那部分柱塞不與外界接觸，進(jìn)一步可保證生產(chǎn)過程中樣品不會染菌，同時(shí)設(shè)備可以通蒸汽滅菌，也可以用0.5mol以上濃度的 NAHO 溶液浸泡殺菌。

 

   3. ATS 專門針對哺乳動物細(xì)胞破碎設(shè)計(jì)的壓力微調(diào)模塊，破碎壓力可以精準(zhǔn)調(diào)節(jié)，精度可達(dá)到 1bar，調(diào)節(jié)后的壓力波動范圍在±5bar內(nèi)，可以保證壓力穩(wěn)定，不會破壞病毒的結(jié)構(gòu)。

細(xì)胞破碎關(guān)鍵技術(shù)細(xì)節(jié)

破碎率控制

      不同的細(xì)胞所需要的破碎壓力都不一樣，ATS 高壓細(xì)胞破碎的壓力可以從 0-2000bar 自由調(diào)節(jié)，可以滿足幾乎所有常用表達(dá)體系的細(xì)胞破碎的需求。

溫度控制

      由于破碎過程中隨著壓力的升高，樣品溫度也會升高，當(dāng)壓力每升高 100bar，樣品的溫度會升高 2.2℃，生物樣品都需要保持低溫才能保證樣品的活性，ATS 專業(yè)的內(nèi)置冷卻模塊，可通 4℃的冷凍水直接在樣品破碎產(chǎn)熱點(diǎn)對樣品降溫，所產(chǎn)生的熱量瞬間就會被吸走，可保證樣品溫度一直處在低溫狀態(tài)，樣品活性不受影響。

 

 
 

典型細(xì)胞破碎介紹

 
 
 

大腸桿菌破碎介紹/典型應(yīng)用：

     大腸桿菌一般需要800-1000bar的壓力破碎2-3遍，破碎率可以達(dá)到99%以上，常見的典型應(yīng)用：胰島素 、干擾素、 白介素 酶等。

 
 

酵母菌破碎介紹/典型應(yīng)用：

   酵母菌一般需要1300bar的壓力破碎3-4遍，破碎率可以達(dá)到 90%以上，常見的典型應(yīng)用：HPV疫苗、諾如病毒疫苗、乙肝疫苗、手足口病疫苗等。

 
 

 
 
 
 
 
 

 

 動物細(xì)胞破碎介紹/典型應(yīng)用：

 
 
       哺乳動物細(xì)胞主要成分是細(xì)胞膜，比較好破碎，一般500bar以內(nèi)的壓力破碎一遍都可以破碎的比較好，因?yàn)楸磉_(dá)病毒所耐受的壓力不同所以破碎壓力也不太一 樣，破碎壓力一般 20bar到500bar。高壓破碎儀不光可以破碎細(xì)胞，還可以將細(xì)胞內(nèi)部的粘性細(xì)胞液，團(tuán)聚的病毒等均質(zhì)分散開，可為后續(xù)工藝做鋪墊，提高病毒的收率。常見的典型應(yīng)用：水痘疫苗，甲肝疫苗，輪狀病毒疫 苗，溶瘤病毒（腺病毒，腺相關(guān)病毒，單純皰疹病毒等） 以及一些常見的動物用的滅活病毒疫苗。
 
 
 
 
 

 

 

 

 

 

 
 
 
 

      己欲立而立人，己欲達(dá)而達(dá)人----ATS

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