納米流式細(xì)胞儀在腫瘤微環(huán)境對CART細(xì)胞功能影響機(jī)制研究的應(yīng)用
瀏覽次數(shù):1897 發(fā)布日期:2021-3-11
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CART細(xì)胞免疫治療作為新興癌癥治療方法,尤其是在血液惡性腫瘤患者治療中獲得了空前的積極成果。然而,腫瘤微環(huán)境對CART細(xì)胞的抑制,阻礙了其更廣泛的成功應(yīng)用。
近日,來自妙佑醫(yī)療國際發(fā)表在Cell子刊 Molecular Therapy上的新成果1,在揭示腫瘤微環(huán)境對CART細(xì)胞功能影響機(jī)制方面取得了重要進(jìn)展:通過利用慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)模型,研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞間信號傳重要遞媒介細(xì)胞外微囊泡可誘導(dǎo)CART細(xì)胞功能紊亂(圖1)。
圖1,圖文摘要-CLL細(xì)胞胞外微囊泡誘導(dǎo)CART細(xì)胞功能紊亂1
作為這一發(fā)現(xiàn)的關(guān)鍵角色,細(xì)胞外微囊泡在整個研究過程中,對其進(jìn)行快速,精準(zhǔn)和穩(wěn)定分析,獲得最可靠結(jié)果尤為重要。該研究涉及大量微囊泡分析鑒定工作,包括來源于不同細(xì)胞系/不同處理產(chǎn)生的微囊泡,其大小分析,絕對濃度定量,蛋白表達(dá)分析,處理用微囊泡稀釋定量等工作。來自妙佑醫(yī)療國際的研究人員,此次選用英國Apogee Flow公司的納米流式分析儀,為其上述重要分析工作提供分析方案。特別是,該研究工作做了大量實驗工作,驗證Apogee納米流式分析儀分析微囊泡性能,包括靈敏度分析,可靠性比對(圖2),線性稀釋驗證,抗體標(biāo)記滴定優(yōu)化等。詳細(xì)分析工作及數(shù)據(jù),可參考文章全文及補(bǔ)充材料數(shù)據(jù)。
圖2, Apogee納米流式分析定量微囊泡和Western Blot分析數(shù)據(jù)高度一致
Apogee Flow納米流式分析儀, 作為第一個推出可通過散射光檢測<100nm顆粒的分析設(shè)備,也是唯一一個可通過多個角度散射光分析<100nm顆粒的分析設(shè)備,多年來專注分析外泌體微囊泡等納米小顆粒,參與發(fā)表數(shù)百篇相關(guān)研究工作,可為外泌體微囊泡等納米顆粒的大小,蛋白/核酸標(biāo)記物,絕對濃度顆粒計數(shù)等分析工作,提供快速,精準(zhǔn),穩(wěn)定和高通量的理想分析方案。
參考資料:
1.Cox M J, Lucien F, Sakemura R, et al. Leukemic Extracellular Vesicles Induce Chimeric Antigen Receptor T Cell Dysfunction in Chronic Lymphocytic Leukemia[J]. Molecular Therapy, 2020.
2.http://www.apogeeflow.com/micro-flow-cytometer.php
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