曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)測(cè)試方法、指標(biāo)評(píng)價(jià)及注意事項(xiàng)

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)是經(jīng)典的情緒相關(guān)行為學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn), 最早由 Hall 設(shè)計(jì)。 是用于檢測(cè)動(dòng)物在陌生環(huán)境中的行為表現(xiàn),包括自發(fā)活動(dòng)行為和探索行為,是評(píng)價(jià)動(dòng)物在新異環(huán)境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。 檢測(cè)指標(biāo)為動(dòng)物首次進(jìn)入中央?yún)^(qū)的潛伏期、中央?yún)^(qū)停留時(shí)間和穿行次數(shù);結(jié)合抑郁模型可檢測(cè)動(dòng)物的“抑郁樣”行為和藥物的抗抑郁作用,檢測(cè)指標(biāo)為動(dòng)物的開(kāi)場(chǎng)活動(dòng)性,可人工計(jì)數(shù)動(dòng)物的水平爬格次數(shù)和垂直站立次數(shù)作為行為指標(biāo),也可采用自動(dòng)攝像記錄動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡,并采用行為學(xué)分析軟件進(jìn)行分析運(yùn)動(dòng)距離、運(yùn)動(dòng)速度、休息時(shí)間等行為指標(biāo)。 該實(shí)驗(yàn)亦可用于評(píng)價(jià)抗抑郁藥物的起效速率。

實(shí)驗(yàn)材料

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱通常分為大鼠和小鼠兩種規(guī)格，其中大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱建議尺寸為100cm*100cm*40cm，小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱尺寸建議為50cm*50cm*40cm。實(shí)驗(yàn)箱材質(zhì)采用黑色或者白色單面磨砂亞克力為宜，也可以使用中性顏色（如藍(lán)色）的醫(yī)用ABS工程塑料，內(nèi)壁不可反光。

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的分析軟件可使用VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件（上海欣軟），自動(dòng)跟蹤目標(biāo)老鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡，識(shí)別動(dòng)物的頭部、重心及尾巴，直接生成活動(dòng)軌跡圖、區(qū)域偏好指數(shù)圖和活動(dòng)量熱圖等。
 

實(shí)驗(yàn)方法

曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單,在用于抑郁行為學(xué)評(píng)價(jià)中,無(wú)適期階段,操作步驟如下 :

(1) 實(shí)驗(yàn)前,動(dòng)物應(yīng)適應(yīng)檢測(cè)環(huán)境 30 ~ 60 min；

(2)實(shí)驗(yàn)人員在VisuTrack軟件中預(yù)先設(shè)置好相應(yīng)的參數(shù)，記錄好動(dòng)物的編號(hào)、日期、狀態(tài)信息；

(3) 動(dòng)物放入測(cè)試箱后,即開(kāi)始檢測(cè),檢測(cè)時(shí)間宜為5~10 min;

(4) 每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)從同一位置同一方向?qū)��?dòng)物放入測(cè)試箱中央。

大小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱，型號(hào)：XR-XZ301，上海欣軟
評(píng)價(jià)指標(biāo)

(1) 總路程(total distance)：動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的物理位移累積；

(2) 速度(speed)：動(dòng)物在單位時(shí)間產(chǎn)生的物理位移。 5min內(nèi)正常動(dòng)物總路程多為1000~2500cm,速度為3~8cm/ s。 動(dòng)物出現(xiàn)抑郁行為時(shí),速度減少；

(3) 運(yùn)動(dòng)總時(shí)間(total move time)：動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)的產(chǎn)生物理位 移時(shí)所需的時(shí)間累積。 正常動(dòng)物運(yùn)動(dòng)時(shí)間多大于檢測(cè)時(shí)間的30%;抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):與對(duì)照組相比有顯著性減低(P<0. 05)；

(4) 站立次數(shù)(number of standing)：動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)記錄時(shí)間內(nèi)的站立總次數(shù)。10min檢測(cè)時(shí)間,正常大鼠站立次數(shù) 20 ~ 50 次。10min檢測(cè)時(shí)間,空白對(duì)照組小鼠站立次數(shù) 60~130次；抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):與對(duì)照組相比顯著減低 (P < 0. 05)。

（5）糞便數(shù)量反應(yīng)大鼠的焦慮情況。（VisuTrack軟件是目前市面上唯一一款能夠自動(dòng)檢測(cè)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱中糞便數(shù)量的動(dòng)物行為學(xué)分析軟件）

注意事項(xiàng)

1、實(shí)驗(yàn)前需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物每天撫摸1-2min以減少非特異性應(yīng)激刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)中的影響。

2、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要弱光照明，觀察者盡量與測(cè)試動(dòng)物分隔。

3、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要環(huán)境安靜。

4、進(jìn)行曠場(chǎng)檢測(cè)時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行篩選，有些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在正常情況下水平方向或垂直方向的活動(dòng)情況顯著低于同批動(dòng)物平均水平，則需要將這些動(dòng)物預(yù)先剔除。

5、實(shí)驗(yàn)前需要提前至少3小時(shí)將動(dòng)物帶入實(shí)驗(yàn)室，降低動(dòng)物對(duì)新環(huán)境的不安情緒。

6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的性別、周齡盡量保持一致，因?yàn)榧に厮�平可能�?huì)影響動(dòng)物行為。

7、注意實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的晝夜節(jié)律，在24h內(nèi)有其活動(dòng)周期，盡量選擇同一時(shí)間段開(kāi)展實(shí)驗(yàn)。

8、OFT實(shí)驗(yàn)對(duì)動(dòng)物各方面影響較小，而其他行為學(xué)實(shí)驗(yàn)（如強(qiáng)迫游泳、水迷宮、懸尾實(shí)驗(yàn)）影響較大，因此同一批動(dòng)物進(jìn)行不同行為學(xué)測(cè)試時(shí)，應(yīng)先進(jìn)行OFT實(shí)驗(yàn)。

9、實(shí)驗(yàn)應(yīng)在隔音，光強(qiáng)度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。

10、兩次實(shí)驗(yàn)之間清洗實(shí)驗(yàn)設(shè)備，以免上次動(dòng)物余留信息影響下次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
 

上海欣軟是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售于一體的的高新技術(shù)企業(yè)，是專(zhuān)業(yè)的動(dòng)物行為視頻分析方案解決商。我司專(zhuān)注于動(dòng)物神經(jīng)科學(xué)與行為學(xué)產(chǎn)品的研究且致力于向高校、科研機(jī)構(gòu)等領(lǐng)域提供實(shí)驗(yàn)室一體化方案，業(yè)務(wù)范圍遍布全國(guó)上百家實(shí)驗(yàn)室。公司主營(yíng)產(chǎn)品均為自主開(kāi)發(fā), 擁有100%核心技術(shù)，同時(shí)公司擁有數(shù)位動(dòng)物行為學(xué)儀器行業(yè)從事10年以上的資深服務(wù)工程師，可為我們的產(chǎn)品提供全方案的售前及售后服務(wù)。我司開(kāi)發(fā)的儀器設(shè)備都是科學(xué)研究所必備且不可替代的。

• 動(dòng)物行為分析軟件：

1、VisuTrack軟件

2、SuperMaze軟件

3、FishTrack斑馬魚(yú)分析軟件

• 動(dòng)物行為儀器：

1、自身給藥、條件恐懼、斯金納、震驚反射（PPI）、跑步機(jī)、各類(lèi)經(jīng)典迷宮等

2、動(dòng)物抓撓分析儀、動(dòng)物震顫行為分析儀、動(dòng)物捕食行為分析儀

3、動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析（內(nèi)測(cè)中）

4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測(cè)痛儀等

• 神經(jīng)電生理：

1、光遺傳、無(wú)線光遺傳

2、光纖記錄系統(tǒng)（單通道、多通道）

3、電生理信號(hào)采集系統(tǒng)（腦電、肌電等）

如果您也對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)感興趣，歡迎聯(lián)系我們：13248008925；也可以關(guān)注和推薦關(guān)注知乎號(hào)：腦聲常談和微信公眾號(hào)：bioviewer（動(dòng)物神經(jīng)科學(xué)與行為學(xué)），專(zhuān)注于動(dòng)物神經(jīng)科學(xué)與行為學(xué)的實(shí)驗(yàn)知識(shí)的方法傳播與分享交流，您可以推薦給您身邊的朋友、同學(xué)以及老師，我們會(huì)定期更新您需要的相關(guān)實(shí)驗(yàn)方
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