HLA分型技術(shù)及原理介紹

人體所有細(xì)胞膜上都有一種叫做主要組織相容性復(fù)合體（Major histocompatibility complex, MHC）的分子標(biāo)志，這是一種特異的糖蛋白，是引起急性排斥反應(yīng)的同種異型抗原復(fù)合體。它分布在人體所有有核細(xì)胞的表面，包括多個系統(tǒng)，組成復(fù)雜的抗原系統(tǒng)。MHC基因是由一群緊密連鎖的基因群組成，定位于動物或人某對染色體的特定區(qū)域，呈高度多態(tài)性。其編碼的分子表達(dá)于不同細(xì)胞表面，參與抗原遞呈，制約細(xì)胞間相互識別及誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。不同種類哺乳動物MHC基因編碼產(chǎn)物的名稱各異，人類的MHC通常稱為HLA基因或HLA復(fù)合體，且由于其編碼的分子表達(dá)于白細(xì)胞上，稱為人類白細(xì)胞抗原（Human leucocyte antigen，HLA）。
 
一、HLA復(fù)合體的構(gòu)成
 
HLA復(fù)合體是人類多態(tài)性最豐富的遺傳系統(tǒng)，定位于第6號染色體短臂6P21.31區(qū)，長3600kb。1999年已完成全部序列分析及基因定位，其中39.8%和免疫功能相關(guān)。根據(jù)其結(jié)構(gòu)、分布和功能不同，可分為HLA-I、HLA-II、HLA-III類基因。
 
其中HLA-I包括HLA-A、HLA-B和HLA-C，且目前國際組織相容性組織已公布確認(rèn)的等位基因?yàn)锳位點(diǎn)1193個，B位點(diǎn)1800個，C位點(diǎn)829個。HLA-I類基因廣泛存在于各種組織細(xì)胞中，可在絕大部分有核細(xì)胞表面表達(dá)，但表達(dá)水平有所不同。HLA-II包括HLA-DP、HLA-DQ、HLA-DR，其中DRBl位點(diǎn)809個，DRB3位點(diǎn)52個，DRB4位點(diǎn)14個，DRB5位點(diǎn)19個，DQBl位點(diǎn)55個，DPBl位點(diǎn)112個；HLA-II存在于B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和活化T細(xì)胞中。HLA-III為補(bǔ)體系統(tǒng)（由20種不同的血清蛋白組成的多成分系統(tǒng)），包括C2和C4位點(diǎn)，存在于血清中。
二、HLA復(fù)合體的遺傳特性
 
作為人類多態(tài)性最豐富的遺傳系統(tǒng)，HLA復(fù)合體具備某些有別于其它真核基因系統(tǒng)的特征，包括單體型遺傳、多態(tài)性現(xiàn)象及連鎖不平衡現(xiàn)象。單體型遺傳指HLA復(fù)合體中緊密連鎖的基因群在一條染色體上，并且其上的等位基因很少發(fā)生同源染色體間的交換，構(gòu)成一個單體型并向下遺傳；多態(tài)性（polymorphism）是指在一隨機(jī)婚配的群體中，染色體同一基因座有兩種以上基因型，即可能編碼二種以上的產(chǎn)物；連鎖不平衡是分屬兩個或兩個以上基因座位的等位基因同時出現(xiàn)在一條染色體上的幾率,高于隨機(jī)出現(xiàn)的頻率。
 
同時，HLA分子抗原結(jié)合的氨基酸序列是由每個等位基因編碼的，因此HLA的多態(tài)性可能導(dǎo)致抗原結(jié)合位點(diǎn)的構(gòu)象及結(jié)合、遞呈抗原肽給T細(xì)胞的效率大大不同，這進(jìn)一步導(dǎo)致了不同的HLA基因?qū)�疾病的易感性不同�?strong>因此，在復(fù)雜的遺傳特性和大量等位基因的基礎(chǔ)上對HLA復(fù)合體進(jìn)行分型研究在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中具有重要意義。 三、HLA分型的意義
 
已知經(jīng)典的HLA- I和HLA-II分子具有不同的結(jié)構(gòu)和功能。
 
HLA-I類分子是細(xì)胞毒性T細(xì)胞反應(yīng)的重要參與者，每一個HLA-I類分子均與胞內(nèi)蛋白的特定多肽結(jié)合，并將其提呈給CD8+ T細(xì)胞。目前已有大量研究表明HLA基因體細(xì)胞突變率的增高與HLA功能異常顯著相關(guān)，是免疫逃逸的潛在機(jī)制，并參與腫瘤形成和腫瘤進(jìn)展。例如，腫瘤可以下調(diào)HLA-I類分子表達(dá)，且一些具有HLA-I類基因胚系雜和性的患者，其腫瘤細(xì)胞可以表現(xiàn)為HLA-I類分子體細(xì)胞的LOH，這就影響其接受ICI治療的療效。
 
此外，很多自身免疫病的發(fā)生也與個體特定的HLA表現(xiàn)型或HLA異常表達(dá)相關(guān)，現(xiàn)可通過HLA研究疾病發(fā)生遺傳背景或傾向或基因易感性，即將HLA作為遺傳標(biāo)記，尋找與某些疾病相關(guān)的HLA型別。因此，檢測HLA的型別有助于自身免疫病的診斷。同時，HLA分型在器官移植、血液病診斷、個體健康管理、親子鑒定及人種與進(jìn)化研究等領(lǐng)域中也具有重要意義！
 

HLA	I	II
經(jīng)典基因座位	A、B、C	DQ、DP、DR
分子結(jié)構(gòu)	α鏈、β2m微球蛋白	α鏈、β鏈
抗原肽結(jié)合域	α1、α2	α1、β1
表達(dá)特點(diǎn)	共顯性	1.2~1.8×10^5
分布	A、B、C	DQ、DP、DR
功能	識別遞呈內(nèi)源性抗原調(diào)節(jié)CTL殺傷作用	識別遞呈外源性抗原調(diào)節(jié)Th細(xì)胞功能
受體分子	CD8	CD4

四、IPHASE產(chǎn)品
 
鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑的引領(lǐng)者，憑借先進(jìn)的設(shè)備、專業(yè)的技術(shù)人員和多年的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，為客戶提供特定分型的PBMC，為藥物研發(fā)提供更有針對性的免疫細(xì)胞，在最大程度上為客戶節(jié)省時間和成本！
 

產(chǎn)品	規(guī)格	保存方式
HLA-A01:01,11:01	10 million	凍存
HLA-A02:01,24:02	10 million	凍存
HLA-A02:06,23:01	10 million	凍存
HLA-A02:07,24:02	10 million	凍存
HLA-A02:07,33:03	10 million	凍存
HLA-A24:02,33:03	10 million	凍存

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