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高通量測(cè)序服務(wù)——細(xì)菌基因組測(cè)序
應(yīng)用Roche 454長(zhǎng)片段測(cè)序、Illumina Solexa短片段高覆蓋測(cè)序,結(jié)合454雙末端測(cè)序及Solexa末端配對(duì)測(cè)序技術(shù),針對(duì)不同的基因組測(cè)序類型,提供專業(yè)的測(cè)序服務(wù)。
服務(wù)類別:測(cè)序/合成總訪問:5905
最后更新:2015-7-14半年訪問:79
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高通量測(cè)序服務(wù)——細(xì)菌基因組測(cè)序

詳細(xì)描述:
隨著細(xì)菌基因組研究的迅速發(fā)展,全基因組測(cè)序已逐步成為微生物基礎(chǔ)研究的重要手段之一。截至2010年11月,全世界已發(fā)布了1748個(gè)細(xì)菌基因組、61個(gè)真菌基因組和103個(gè)古細(xì)菌基因組序列。新一代高通量測(cè)序技術(shù)大大減少了基因組測(cè)序的成本和時(shí)間,讓更多實(shí)驗(yàn)室可以開展微生物基因組測(cè)序項(xiàng)目。
根據(jù)不同的研究目的和測(cè)序要求,細(xì)菌基因組測(cè)序可分為四種類型:細(xì)菌基因組Scanning、細(xì)菌基因組框架圖、細(xì)菌基因組精細(xì)圖和細(xì)菌基因組完成圖。美吉生物靈活應(yīng)用Roche 454長(zhǎng)片段測(cè)序、Illumina Solexa短片段高覆蓋測(cè)序,結(jié)合454雙末端測(cè)序(Paired-End Sequencing)及Solexa末端配對(duì)測(cè)序(Mate-Pair Sequencing,MP)技術(shù),針對(duì)不同的基因組測(cè)序類型,提供專業(yè)、合理、高性價(jià)比的測(cè)序服務(wù)。
 
美吉優(yōu)勢(shì)
1. 擁有自主實(shí)驗(yàn)室和高通量測(cè)序平臺(tái),可以根據(jù)合作伙伴要求靈活安排實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)周期短,質(zhì)量可靠。
2. 擁有ABI3730xl常規(guī)測(cè)序平臺(tái)、Roche 454高通量測(cè)序平臺(tái)和Illumina Solexa高通量測(cè)序平臺(tái),三種平臺(tái)聯(lián)合應(yīng)用,優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),在微生物基因組測(cè)序中取得1+1+1>3的效果。
3. 技術(shù)人員經(jīng)驗(yàn)豐富,每年完成數(shù)百個(gè)BAC全長(zhǎng)測(cè)序、幾十個(gè)微生物基因組測(cè)序的Gap Closing工作。
4. 擁有專業(yè)的生物信息團(tuán)隊(duì)和大型計(jì)算機(jī)平臺(tái),可以為合作伙伴提供個(gè)性化的生物信息分析服務(wù)。
 
一. 細(xì)菌基因組Scanning
細(xì)菌基因組Scanning采用Illumina 測(cè)序技術(shù),對(duì)基因組進(jìn)行50×低深度測(cè)序,根據(jù)序列組裝結(jié)果,以獲取基因組序列的基本信息。
 
二. 細(xì)菌基因組框架圖
細(xì)菌基因組框架圖采用Illumina短片段測(cè)序技術(shù)和末端配對(duì)測(cè)序(MP)技術(shù),對(duì)基因組進(jìn)行100×深度測(cè)序。MP測(cè)序數(shù)據(jù)用來確定Contigs之間的排列關(guān)系,結(jié)合100×測(cè)序深度,可以得到較佳的基因組拼接結(jié)果和較高的基因區(qū)覆蓋度,為隨后的基因組信息挖掘提供良好基礎(chǔ)。
 
生物信息分析
1. 原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2. 序列組裝
3. 基因預(yù)測(cè)
4. 常規(guī)基因功能注釋
 
三.   細(xì)菌基因組精細(xì)圖
為了避免單個(gè)平臺(tái)的測(cè)序偏向性以及短片段造成的基因組組裝錯(cuò)誤,細(xì)菌基因組精細(xì)圖采用Roche 454長(zhǎng)片段雙末端測(cè)序技術(shù)(Paired-End)搭建基因組框架,然后進(jìn)行Illumina 短片段高覆蓋測(cè)序(100×),將短片段序列mapping到基因組框架中,即可獲得高質(zhì)量的基因組精細(xì)圖。在此基礎(chǔ)上,可以借助ABI3730xl測(cè)序平臺(tái)對(duì)整個(gè)基因組或其中的某一區(qū)域進(jìn)行Gap Closing。
 
生物信息分析
1. 原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2. 序列組裝
3. 基因預(yù)測(cè)
4. 基因功能注釋
 
四.   細(xì)菌基因組完成圖
細(xì)菌基因組完成圖采用Roche 454長(zhǎng)片段雙末端測(cè)序技術(shù)(Paired-End)搭建基因組框架,然后進(jìn)行Illumina 短片段高覆蓋測(cè)序(100×),將短片段序列mapping到基因組框架中,獲得基因組精細(xì)圖,再借助ABI3730xl測(cè)序平臺(tái)對(duì)整個(gè)基因組進(jìn)行Gap Closing,即可得到基因組完成圖。
 
生物信息分析
1. 基因組序列拼接
原始數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)、基因組覆蓋度計(jì)算、Contigs長(zhǎng)度分布等。
2. 基因注釋
編碼基因預(yù)測(cè),基因功能注釋(NR、Swissprot、Interpro等)、Non-coding RNA注釋、重復(fù)序列注釋等。
3.  基因功能分類
COG功能分類、KEGG通路分析等。
4. 比較基因組及進(jìn)化分析
與近源物種的基因組序列對(duì)比,進(jìn)行SNP、SV等變異結(jié)構(gòu)檢測(cè)、pan-genome和core-genome組成分析、同源基因分析、進(jìn)化分析等。
 
成功案例
美吉生物已成功完成細(xì)菌精細(xì)圖26例和細(xì)菌完成圖15例。部分完成圖數(shù)據(jù)如下:

細(xì)菌名稱
雙歧桿菌
芽孢桿菌
某海洋菌
鏈霉菌
單胞菌
基因組大小
2.1Mb
4Mb
7.2Mb
11Mb
5Mb
基因組復(fù)雜度
簡(jiǎn)單
中等
中等
高GC
IS多,部分區(qū)域結(jié)構(gòu)復(fù)雜
GC含量
59%
46.6%
34.4%
71%
63.9%
測(cè)序方法
454 Single
& Sanger
454 Single
& Sanger
454 Paired-
End & Sanger
454 Paired- End & Solexa
454 Paired- End & Solexa
Scaffolds(個(gè))
5
37
13
24
17
Contigs(個(gè))
5
37
82
125
47
精細(xì)圖周期
1個(gè)月
1個(gè)月
1個(gè)月
1個(gè)月
1個(gè)月
完成圖周期
1個(gè)月
1個(gè)月
2.5個(gè)月
2個(gè)月
3個(gè)月

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