部分客戶:中科院遺傳與發(fā)育研究所、北京師范大學(xué)、國家體育總局體育科學(xué)研究所、河北醫(yī)科大學(xué),中國醫(yī)科大學(xué)、山東大學(xué)、齊魯醫(yī)院、復(fù)旦大學(xué)、瑞金醫(yī)院、中科院上海藥物研究所、上海交通大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南方醫(yī)科大學(xué)、武漢協(xié)和、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院等均使用本單位提供動(dòng)物進(jìn)行研究
Apoe基因敲除小鼠原理是利用基因打靶技術(shù)產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的程序,基因敲出小鼠程序一般為:(1)構(gòu)建基因打靶載體; (2)將基因打靶載體通過一定的方式(常用電穿孔法)導(dǎo)入同源的胚胎干細(xì)胞中,使外源DNA與胚胎干細(xì)胞基因組中相應(yīng)部分發(fā)生同源重組,將打靶載體中的DNA序列整合到內(nèi)源基因組中從而得以表達(dá); (3)篩選發(fā)生同源重組的陽性克隆,基因敲除小鼠構(gòu)建通過顯微注射或者胚胎凝集的方法將經(jīng)過遺傳修飾的ES細(xì)胞引入受體胚胎內(nèi)制作嵌合體小鼠,在生物活體中研究特定基因的功能;蚯贸∈笫沟醚芯空邆兡軌蛴^察到某一特定基因完全失活后小鼠表型的改變,從而推斷出特定基因的作用;蚯贸鲂∈蠡虼虬械脑瓌t是, 外源DNA 片段含有與目的基因的某一段核酸序列相同或接近的同源序列, 同源重組就發(fā)生在這兩個(gè)序列之間。外源DNA 序列的定位整合有兩種方式, 即插入型(又稱O 型) 和置換型(又稱8 型)。與此相對(duì)應(yīng), 基因敲出小鼠打靶載體可分為兩類: 插入型載體和置換型載體;
基因敲除小鼠第一步,胚泡時(shí)期發(fā)育胚胎的分離。此胚胎來源于灰色品系的小鼠。
基因敲除小鼠第二步,從灰色小鼠胚泡中分離胚胎干細(xì)胞,在體外進(jìn)行培養(yǎng)。
基因敲除小鼠第三步,用同源重組載體轉(zhuǎn)染胚胎干細(xì)胞,用含有新霉素和更昔韋洛的培養(yǎng)基篩選發(fā)生了同源重組的細(xì)胞。
基因敲除小鼠第四步,將篩選得到的胚胎干細(xì)胞植入白色小鼠的早期胚胎(胚泡時(shí)期)中。
基因敲除小鼠第五步,將上述胚胎植入假孕母鼠(白色)子宮中。
基因敲除小鼠第六步,在母鼠所產(chǎn)的小鼠中,有一些是正常的白色,另一些則是嵌合體灰白相間的小鼠。這些嵌合體小鼠的細(xì)胞一部分起源于白色皮毛的胚泡細(xì)胞,另一部分則起源于重組的胚胎干細(xì)胞。起源于重組胚胎干細(xì)胞的皮毛顯示出灰色斑塊,很好辨認(rèn)。
基因敲出小鼠第七步,嵌合體小鼠與野生型白色小鼠進(jìn)行雜交,如果嵌合體小鼠的生殖細(xì)胞恰好是起源于重組胚胎干細(xì)胞,那么其子代小鼠就都應(yīng)該呈現(xiàn)灰色。而這些灰色小鼠的所有細(xì)胞都是雜合體。
基因敲除小鼠第八步,雜合體灰色小鼠(+/H)之間進(jìn)行雜交,得到灰色和白色的子代。從灰色子代中篩選出純合小鼠(H/H),其一對(duì)同源染色體上的等位基因都失活,此純合小鼠即為 “基因敲除小鼠”。
APOE基因敲除小鼠原理描述,價(jià)格優(yōu)惠 中科院實(shí)驗(yàn)室保質(zhì)保量
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至善健康醫(yī)學(xué)研究院成立于2005年,專業(yè)從事胚胎干細(xì)胞、分子生物醫(yī)學(xué)及基因工程動(dòng)物模型敲除的技術(shù)研發(fā)、大鼠小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)及大鼠小鼠海馬側(cè)腦室aav病毒立體定位注射動(dòng)物實(shí)驗(yàn)服務(wù),視網(wǎng)膜玻璃體定位注射實(shí)驗(yàn)服務(wù),分子生物醫(yī)學(xué)科研動(dòng)物病理生理實(shí)驗(yàn)外包動(dòng)物病理醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)外包技術(shù)服務(wù),提供老年老齡sd大鼠及c57老年小鼠,設(shè)有干細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)和基因工程動(dòng)物表型分析實(shí)驗(yàn)室,可提供用于科學(xué)研究和藥物研發(fā)的各類動(dòng)物胚胎干細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞、成體細(xì)胞、基因工程干細(xì)胞株、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及相關(guān)培養(yǎng)基,同時(shí)提供基因敲除小鼠訂購、轉(zhuǎn)基因小鼠訂購、基因沉默小鼠和轉(zhuǎn)基因小鼠等基因工程動(dòng)物模型的構(gòu)建和基于干細(xì)胞的藥物研發(fā)服務(wù)。
隨業(yè)務(wù)范圍的擴(kuò)大,公司面向海內(nèi)外征集細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)相關(guān)產(chǎn)品的合作伙伴。 經(jīng)營范圍:基因敲除小鼠模型建立、銷售基因敲除小鼠、銷售轉(zhuǎn)基因小鼠、顯微注射、基因打靶、條件性敲除、定點(diǎn)敲除轉(zhuǎn)基因載體、基因沉默(siRNA)和質(zhì)粒DNA表達(dá)載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù);胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù);基因敲除小鼠、基因沉默小鼠和轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建;各種細(xì)胞株(人胚胎干細(xì)胞、小鼠胚胎干細(xì)胞、iPS細(xì)胞、成體干細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞);細(xì)胞培養(yǎng)基;質(zhì)粒載體;超純水、雙蒸水、去離子水、醫(yī)用蒸餾水銷售小鼠基因敲除小鼠服務(wù)價(jià)格,RNA干擾載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù),人胚胎干細(xì)胞、小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù),基因沉默小鼠構(gòu)建技術(shù)服務(wù),siRNA載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù),基因沉默構(gòu)建技術(shù)服務(wù),載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù),RNAi表達(dá)載體構(gòu)建服務(wù),轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建,細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)服務(wù),分子生物學(xué)技術(shù)服務(wù), pcDNA載體構(gòu)建實(shí)驗(yàn)服務(wù),siRNA質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù),細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)服務(wù)。
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