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宏基因組從頭測(cè)序
原始數(shù)據(jù)整理、過(guò)濾及質(zhì)量評(píng)估,基因集分析,基于物種豐度分析,基于群落結(jié)構(gòu)分析,微生物基因組序列組裝和拼接
服務(wù)類別:測(cè)序/合成總訪問(wèn):1402
最后更新:2013-9-3半年訪問(wèn):15
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宏基因組從頭測(cè)序
簡(jiǎn)介:宏基因組學(xué)(Metagenomics)也稱為元基因組學(xué),是以樣品中的微生物群落作為整體進(jìn)行研究的學(xué)科。宏基因組de novo測(cè)序是指對(duì)環(huán)境樣品中所有微生物基因組DNA片段化后進(jìn)行高通量測(cè)序,進(jìn)行序列組裝和基因注釋,獲得部分不可純培養(yǎng)微生物的基因組序列,分析該環(huán)境下所有微生物基因集信息。

 

一、技術(shù)路線

 

  

推薦平臺(tái):Roche 454 FLX+、Illumina HiSeq 2000

 

 

二、信息分析

1.原始數(shù)據(jù)整理、過(guò)濾及質(zhì)量評(píng)估

 

2.基因集分析:

 基因功能注釋

 基因功能豐度差異分析

 豐度差異的基因 GO 富集分析

 豐度差異的基因 KEGG 富集分析

 聚類分析(熱圖)

 多元統(tǒng)計(jì)分析(根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)) 

 

3.基于物種豐度分析:

 稀釋曲線

 Alpha多樣性分析

 物種豐度差異分析

 聚類分析(熱圖)

 多元統(tǒng)計(jì)分析(根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)) 

 

4.基于群落結(jié)構(gòu)分析:

 單樣品物種分布

 多樣品物種分布

 

5.微生物基因組序列組裝和拼接

 

6.根據(jù)客戶需求進(jìn)行個(gè)性化分析

 

 

三、送樣要求

1、 樣品采集:采集條件的一致是最為重要的環(huán)節(jié),需嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)采樣,采樣后立即冷凍保存。

 

2、 樣品DNA:環(huán)境因素異常復(fù)雜,許多物質(zhì)或抑制因子會(huì)影響后續(xù)PCR、測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建和序列測(cè)定,常規(guī)提取方法不一定適合,建議按公司要求采用專用試劑盒提取;蚪MDNA濃度>100 ng/μl,總量>20 μg,OD 260/280在1.8-2.0之間,并確保電泳檢測(cè)無(wú)明顯RNA條帶,基因組條帶清晰、完整;基因組DNA完全無(wú)降解;提供DNA電泳檢測(cè)照片,用自封袋密封后隨樣品一起送樣。

 

3、 送樣管務(wù)必標(biāo)清樣品編號(hào),管口使用Parafilm膜密封。


 

四、派森諾優(yōu)勢(shì)

1. 先進(jìn)的平臺(tái)優(yōu)勢(shì):Roche 454 FLX+超長(zhǎng)讀長(zhǎng)保證了三個(gè)V區(qū)的完整測(cè)序,大大提高了環(huán)境微生物檢測(cè)靈敏度。Illumina 測(cè)序平臺(tái)的高通量確保了檢測(cè)的準(zhǔn)確度并大大降低了測(cè)序費(fèi)用。

2. 開(kāi)發(fā)了一套成熟的平行測(cè)序方案,可支持超過(guò)200個(gè)樣本的平行測(cè)序。

3. 完備的樣品檢測(cè)和預(yù)實(shí)驗(yàn)體系,為后續(xù)測(cè)序順利開(kāi)展奠定了基礎(chǔ)。

4. 豐富的經(jīng)驗(yàn),成熟的數(shù)據(jù)處理和分析系統(tǒng)。

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