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DNA羥甲基化測序/甲基化測序服務(wù)
康成生物為您提供羥甲基化測序/甲基化測序服務(wù),您只需要提供保存完好的組織或細胞標本,康成的技術(shù)服務(wù)人員就可為您完成全部實驗操作,并提供完整的實驗報告。
服務(wù)類別:測序/合成總訪問:2334
最后更新:2018-11-26半年訪問:16
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      DNA羥甲基化測序/甲基化測序服務(wù)

 

一、DNA羥甲基化測序服務(wù)

     DNA羥甲基化是一種重要的表觀遺傳修飾,對基因的表達起調(diào)控作用,在神經(jīng)分化和癌癥中發(fā)揮重要的作用。為深入了解5hmC的作用,我們就必須清楚5hmC在基因組的分布情況。然而,傳統(tǒng)的基于重亞硫酸鹽的方法無法區(qū)分5-hmC和5-mc。5-hmC單克隆抗體捕獲法是研究DNA羥基化修飾的利器,結(jié)合高通量測序技術(shù)以及生物信息分析,可以獲得全基因組羥甲基化分布圖,從而能幫助我們從一個新的角度來解析胚胎發(fā)育,神經(jīng)細胞分化以及癌癥發(fā)生的分子機制。
 

康成生物為您提供羥甲基化測序技術(shù)服務(wù),您只需要提供保存完好的組織或細胞標本,康成的技術(shù)服務(wù)人員就可為您完成全部實驗操作,包括超聲打斷基因組、羥甲基化DNA免疫共沉淀、hMeDIP與 Input DNA文庫構(gòu)建、高通量測序和數(shù)據(jù)分析、并提供完整的實驗報告。


DNA羥甲基化測序技術(shù)優(yōu)勢

*  特異性檢測羥甲基化: 5-hmC抗體能夠區(qū)分甲基化和羥甲基化信號,特異性的檢測羥甲基化區(qū)域。

*  靈活度高:能夠直接對任意物種的高羥甲基化片段進行測序,無需已知的基因組序列信息。

*  檢測范圍廣:覆蓋整個基因組范圍的羥甲基化區(qū)域。

*  精確度高:能夠在實際結(jié)合位點50個堿基范圍內(nèi)精確定位。

*  數(shù)字化信號:直接對羥甲基化片段進行測序和定量,不存在傳統(tǒng)芯片雜交的熒光模擬信號帶來的交叉反應(yīng)和背景噪音問題。


康成生物提供的DNA羥甲基化測序服務(wù)流程
1.  羥甲基化DNA免疫共沉淀(hMeDIP) 
2.  測序文庫構(gòu)建
3.  DNA成簇(Cluster)擴增
4.  高通量測序
5.  數(shù)據(jù)分析
6.  提供實驗報告


康成hMeDIP-seq技術(shù)服務(wù)優(yōu)勢

*  hMeDIP富集效果特異性佳hMeDIP是獲得準確測序數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。康成hMeDIP平臺經(jīng)過不斷地優(yōu)化,抗體富集效率高和特異性好。


*  嚴格的質(zhì)控體系:康成生物在hMeDIP-seq每個關(guān)鍵步驟都加入了 質(zhì)控實驗(圖2,3)。這些QC數(shù)據(jù)能夠評估每個步驟的質(zhì)量。如果達不到標準,我們會重復(fù)實驗步驟或者優(yōu)化實驗體系,使得每個樣品都能夠順利進入下個實驗環(huán)節(jié)。

圖2. hMeDIP-seq技術(shù)服務(wù)流程和關(guān)鍵步驟的質(zhì)量控制

圖3. hMeDIP-qPCR 質(zhì)控。hMeDIP特異地富集羥甲基化的Spike-in序列,且陽性信號遠高于背景噪音。


*  優(yōu)化的文庫制備流程: 起始量少至1μg乃至更少量的起始DNA樣品即可進行羥甲基化測序?qū)嶒;同時,對hMeDIP富集過程及測序文庫嚴格的質(zhì)量監(jiān)控保證了高品質(zhì)的測序結(jié)果。

*  對DNA羥甲基化水平進行數(shù)字化定量分析:通過對測序得到的大量序列進行深入分析,hMeDIP-seq得到的序列信息能夠轉(zhuǎn)換為可定量的羥甲基化水平信息。對基因組任意區(qū)域的羥甲基化水平給出定量的結(jié)果,并分析差異羥甲基化的區(qū)域。

*  可視化分析: 提供50bp精度的全基因組DNA羥甲基化信號可視化數(shù)據(jù)。通過UCSC基因組瀏覽器(UCSC genome browser),任意區(qū)域的羥甲基化水平能夠直觀的進行展示和比較。
 

 

二、DNA甲基化測序服務(wù)

       DNA甲基化是表觀遺傳(Epigenetics)調(diào)控的重要組成部分,在維持正常細胞功能、遺傳印記、胚胎發(fā)育以及人類腫瘤發(fā)生中起著重要的作用,是目前新的研究熱點之一。在哺乳動物中,甲基化一般發(fā)生在CpG的胞嘧啶5位碳原子上,通過使用5’-甲基胞嘧啶抗體富集高甲基化的DNA片段,并結(jié)合Illumina高通量測序平臺,對所有富集的DNA片段進行高通量測序,研究人員能夠獲得全基因組范圍內(nèi)高精度的甲基化狀態(tài),為深入的表觀遺傳調(diào)控分析提供了更有利的切入點。
 

康成生物為您提供甲基化測序技術(shù)服務(wù),您只需要提供保存完好的組織或細胞標本,康成的技術(shù)服務(wù)人員就可為您完成全部實驗操作,包括超聲打斷基因組、甲基化DNA免疫共沉淀、MeDIP與 Input DNA文庫構(gòu)建、高通量測序和數(shù)據(jù)分析、并提供完整的實驗報告。

 

DNA甲基化測序技術(shù)優(yōu)勢 
* 靈活度高:能夠直接對任意物種的高甲基化片段進行測序,無需已知的基因組序列信息。

檢測范圍廣:覆蓋整個基因組范圍的甲基化區(qū)域。

精確度高:能夠在實際結(jié)合位點50個堿基范圍內(nèi)精確定位。

數(shù)字化信號:直接對甲基化片段進行測序和定量,不存在傳統(tǒng)芯片雜交的熒光模擬信號帶來的交叉反應(yīng)和背景噪音問題。

 


康成MeDIP-seq技術(shù)服務(wù)優(yōu)勢
*MeDIP富集效果特異性佳:MeDIP是獲得準確測序數(shù)據(jù)的關(guān)鍵?党蒑eDIP平臺經(jīng)過不斷地優(yōu)化,抗體富集效率高和特異性好。

 

*圖釋:康成優(yōu)化后的MeDIP平臺效果。橫坐標為MeDIP-score其數(shù)值大小代表基因啟動子甲基化水平,縱坐標為基因的數(shù)目。左圖為用經(jīng)典MeDIP方法構(gòu)建測序文庫的效果,陽性基因H19和Xist的信號無法和陰性基因GAPDH進行區(qū)分。右圖為優(yōu)化后的結(jié)果展示,陽性基因的MeDIP-score值遠高于陰性基因,證明抗體富集的特異性。

嚴格的質(zhì)控體系:康成生物在MeDIP-seq每個關(guān)鍵步驟都加入了質(zhì)控實驗。這些QC數(shù)據(jù)能夠評估每個步驟的質(zhì)量。如果達不到標準,我們會重復(fù)實驗步驟或者優(yōu)化實驗體系,使得每個樣品都能夠順利進入下個實驗環(huán)節(jié)。

 

*圖釋: MeDIP-qPCR 質(zhì)控。測序?qū)嶒炛跋葘eDIP實驗效果進行評估,確定抗體富集的特異性。圖中H19的啟動子區(qū)域為陽性對照,管家基因GAPDH啟動子區(qū)域為陰性對照,檢測結(jié)果以MeDIP樣品和Input樣品的qPCR數(shù)據(jù)的比值表示?梢钥闯觯篗eDIP特異地富集甲基化的DNA區(qū)域,且陽性信號遠高于背景噪音。

*圖釋: MeDIP-seq技術(shù)服務(wù)流程和關(guān)鍵步驟的質(zhì)量控制

優(yōu)化的文庫制備流程: 起始量少至1μg乃至更少量的起始DNA樣品即可進行甲基化測序?qū)嶒灒煌瑫r,對MeDIP富集過程及測序文庫嚴格的質(zhì)量監(jiān)控保證了高品質(zhì)的測序結(jié)果。


對DNA甲基化水平進行數(shù)字化定量分析:通過對測序得到的大量序列進行深入分析,MeDIP-seq得到的序列信息能夠轉(zhuǎn)換為可定量的甲基化水平信息。對基因組任意區(qū)域的甲基化水平給出定量的結(jié)果,并分析差異甲基化的區(qū)域。


可視化分析: 提供50bp精度的全基因組DNA甲基化信號可視化數(shù)據(jù)。通過UCSC基因組瀏覽器(UCSC genome browser),任意區(qū)域的甲基化水平能夠直觀的進行展示和比較。

 

 

詳細服務(wù)內(nèi)容,請訪問:http://www.kangchen.com.cn/service/service.asp

 

 

 

上?党缮锕こ逃邢薰 
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免費熱線:800-820-5058;400-886-5058
電話:021-64451989         傳真:021-64452021
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