元基因組測(cè)序;宏基因組測(cè)序;
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技術(shù)簡(jiǎn)介
元基因組(宏基因組)學(xué)研究不要求對(duì)每個(gè)微生物進(jìn)行分離、純化和培養(yǎng),而是直接從樣品中提取基因組DNA后進(jìn)行測(cè)序分析。通過(guò)元基因組測(cè)序,能夠揭示微生物群落多樣性、種群結(jié)構(gòu)、進(jìn)化關(guān)系、功能活性及環(huán)境之間的相互協(xié)作關(guān)系,極大地?cái)U(kuò)展了微生物學(xué)的研究范圍。
技術(shù)路線圖
生物信息分析
常規(guī)分析:
高級(jí)分析:
個(gè)性化分析:
案例解析
元基因組功能基因分析
基于最小冗余的最大相關(guān)性特征篩選方法(mRMR),構(gòu)建50個(gè)腸道細(xì)菌標(biāo)記基因的二型糖尿病分類系統(tǒng),同時(shí)計(jì)算二型糖尿病分類指數(shù),揭示腸道細(xì)菌的主要功能,并預(yù)測(cè)其與二型糖尿病的相關(guān)性。
特征菌群的組成及代謝通路分析
基于元基因組shotgun測(cè)序和16S 序列分析數(shù)據(jù),門水平的物種分類展示了健康人體7個(gè)不同部位的微生物組成特征,并預(yù)測(cè)微生物組的代謝途徑,表明一些代謝途徑在不同的個(gè)體及身體部位普遍存在。
(Human Microbiome Project Consortium., 2012)
元基因組物種譜及豐度分析
利用Krona軟件展示北太平洋副熱帶環(huán)流細(xì)菌的元基因組物種分類及豐度信息。
(Ondov, Brian D., Nicholas H. Bergman, and Adam M. Phillippy., 2011)
比較元基因組分析
采用SnoWMAn軟件對(duì)16S序列相似性進(jìn)行分析,比較地面環(huán)境(A)、醫(yī)療用具(B)和工作環(huán)境(C)的細(xì)菌組成差異。
(Oberauner, Lisa, et al., 2013)
特定基因進(jìn)化分析
采用NarV基因和NifH基因的氨基酸序列構(gòu)建最大似然系統(tǒng)發(fā)育樹,計(jì)算氨基酸位點(diǎn)替代速率,揭示氮循環(huán)相關(guān)的功能基因在元基因組中的進(jìn)化關(guān)系。
(Lau, Maggie CY, et al., 2014)
測(cè)序策略及數(shù)據(jù)量
測(cè)序策略:PE100、PE125、PE150
建議數(shù)據(jù)量:3~5Gb