ChIP-seq;免疫共沉淀測(cè)序
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技術(shù)簡(jiǎn)介
染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)也稱(chēng)結(jié)合位點(diǎn)分析法,是研究體內(nèi)蛋白質(zhì)與DNA相互作用的有力工具,通常用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)或組蛋白特異性修飾位點(diǎn)的研究。將ChIP與第二代高通量測(cè)序技術(shù)相結(jié)合的ChIP-seq技術(shù),能夠高效的在全基因組范圍內(nèi)檢測(cè)與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等互作的DNA區(qū)段。ChIP-seq具有精確、靈敏、大量且成本低廉的優(yōu)點(diǎn),實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)蛋白在全基因組范圍內(nèi)的全部結(jié)合位點(diǎn)的定位。
技術(shù)路線圖
生物信息學(xué)分析
常規(guī)分析:
1. 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)控分析
2. ChIP-seq序列與參考序列比對(duì)
3. 統(tǒng)計(jì)樣品中比對(duì)位置唯一的序列在基因上、基因間區(qū)的分布情況及覆蓋深度
4. 統(tǒng)計(jì)樣品Peak信息(峰檢測(cè)及計(jì)數(shù)、平均峰長(zhǎng)度、峰長(zhǎng)中位數(shù))
5. Peak區(qū)域的基因組定位
6. 與Peak區(qū)域相關(guān)的DNA結(jié)合因子分析
高級(jí)分析:
7.Peak區(qū)域相關(guān)靶基因功能注釋及GO分析
8.Peak區(qū)域相關(guān)靶基因的代謝通路(pathway)分析
9.不同樣品Peak區(qū)域的差異分析
個(gè)性化分析:
10.根據(jù)客戶(hù)需求進(jìn)行個(gè)性化定制分析
案例解析