小RNA測序;Small RNA測序;
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技術簡介
小RNA是一類重要的體內調節(jié)分子,主要包括miRNA、piRNA和siRNA。它的功能主要是誘導基因沉默,參與基因轉錄后調控,從而調節(jié)細胞生長、分化,以及個體發(fā)育、生殖等重要生物學過程。采用高通量測序技術,一次性獲得單堿基分辨率水平的數(shù)百萬條小RNA序列信息,依托強大的生物信息學分析平臺,鑒定已知小RNA,并預測新的小RNA及其靶標基因。
技術路線
生物信息學分析
常規(guī)分析:
1.測序數(shù)據(jù)質控分析
2.高質量序列與miRNA數(shù)據(jù)庫比對
3.小RNA分類及注釋:miRNA, siRNA, piRNA, rRNA, tRNA, snRNA, snoRNA, repeat asscociated sRNA等
4.預測新的miRNA
5.miRNA靶基因預測
6.靶基因功能注釋、GO富集分析和代謝通路富集分析
7.miRNA表達譜分析
高級分析:
8.樣本間miRNA表達差異分析
9.與mRNA進行關聯(lián)分析(需要有mRNA數(shù)據(jù))
個性化分析:
10.根據(jù)客戶需求進行個性化定制分析。
案例解析
小RNA的差異表達分析
自組織熱圖分析揭示豬鞭蟲的幼蟲、成體及組織特異文庫中小RNA的轉錄表達差異。
測序策略及數(shù)據(jù)量
測序策略:PE36或PE50
建議數(shù)據(jù)量:一般測序:10M reads 或15M reads
深度測序:20M reads