基因過表達(dá)小鼠構(gòu)建服務(wù)

基因過表達(dá)小鼠，是指將目的DNA片段構(gòu)建到過表達(dá)載體中，然后通過受精卵的原核注射，將其整合到小鼠的基因組DNA上，從而實(shí)現(xiàn)該DNA片段的過量表達(dá)的實(shí)驗(yàn)過程。

依據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)和轉(zhuǎn)入DNA片段的不同，主要可以分為以下幾種類型：

a)    過表達(dá)小鼠

主要目的是實(shí)現(xiàn)目的基因的過表達(dá)，其過表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)如下：

依據(jù)啟動(dòng)子的強(qiáng)弱、特異性等特性的選擇，可以控制目的基因過表達(dá)的強(qiáng)弱和組織（器官）特異性。也可以在目的基因上加入特定的標(biāo)簽（Tag）或熒光蛋白（如EGFP），方便檢測、示蹤或純化。

b)    RNAi小鼠

 通常采用U6/H1啟動(dòng)子啟動(dòng)shRNA的表達(dá)，在基因表達(dá)的過程中，通過shRNA的干擾作用，達(dá)到對目的基因表達(dá)的沉默抑制，實(shí)現(xiàn)對基因功能的研究。

c)   MicroRNA小鼠

 通過構(gòu)建上面兩種miRNA載體，可以實(shí)現(xiàn)過表達(dá)或者抑制。

d)   可誘導(dǎo)性小鼠

 通過構(gòu)建上述結(jié)構(gòu)的載體，并通過原核注射受精卵轉(zhuǎn)入小鼠體內(nèi)。這種情況下，小鼠在出生和發(fā)育時(shí)，該基因正常表達(dá)。只有與CreER小鼠雜交以后，然后在Tamoxifen誘導(dǎo)下，Cre酶將兩個(gè)LoxP之間的Stop元件切除，目的基因?qū)崿F(xiàn)過表達(dá)。

構(gòu)建基因過表達(dá)小鼠的實(shí)驗(yàn)流程：（2-4個(gè)月）