我們可以根據(jù)某基因的一段已知序列(或一段同源序列),利用 3'' -RACE 方法獲得該基因的 3'' 端序列,或利用 5''-RACE 方法獲得該基因的 5'' 端序列。
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服務(wù)商: 閃晶分子生物 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
服務(wù)要求
1. 請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料(各種材料的 RNA 提取量請(qǐng)參照“總 RNA 的提取” ) ,或直接提供純化好的 總 RNA 。每次實(shí)驗(yàn)操作所需的 RNA 量為 1 ~ 5 m g ,如果您的實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行多次 RACE 操作,則應(yīng)視具體情況相應(yīng)增加樣品量。
2. 請(qǐng)通過 E-mail 提供已知部分的 cDNA 序列及方向。
3. 請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料: RNA 來源、純度、豐度、所擴(kuò)增基因的估計(jì)長(zhǎng)度、是否具有同源序列等。
4. 有關(guān)實(shí)驗(yàn)材料的具體要求,詳細(xì)情況請(qǐng)參考“客戶常問的幾個(gè)問題”。
操作程序
1. 具體聯(lián)系方式請(qǐng)參考“客戶常問的幾個(gè)問題”。
2. 設(shè)計(jì)引物通過 RT-PCR 對(duì)已知 cDNA 序列進(jìn)行驗(yàn)證。
3. 驗(yàn)證成功后,根據(jù) cDNA 序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行 RACE 操作。
4. 擴(kuò)增出來的片段克隆到普通載體中測(cè)序(或 PCR 產(chǎn)物直接測(cè)序 ) 。
5. 分析結(jié)果,根據(jù)您的要求決定是否繼續(xù)設(shè)計(jì)引物進(jìn)行下一次 RACE 操作。
6. 實(shí)驗(yàn)完成后,將為您提供完整的實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、測(cè)序結(jié)果以及測(cè)序彩色峰圖、引物、質(zhì)粒以及含有該質(zhì)粒的 菌種(穿刺菌)等。