小分子單克隆抗體標(biāo)記條件

小分子單克隆抗體標(biāo)記條件

金墊標(biāo)記條件：

a. 1 ml 金液（20nm 左右）+30 微升 （ 1%K2CO3）+ 5mg/ml 抗體 1 ul，標(biāo)記量為 5 微克蛋白/ ml 金液。（ 先加碳酸鉀還是先加抗體？）

b，室溫振蕩. 20-30 分。

c. 加封閉液 20 ul/ml，室溫振蕩.20- 30 分

d. 離心 12000 轉(zhuǎn)，10 分

e. 150 ul 復(fù)溶液復(fù)溶（PH8.2），鋪金

F. C 線劃線： 羊抗鼠 1：30-1：100; T 線劃線： 做梯度。1：10-1：100

注意事項(xiàng)：

• 每種蛋白抗原的物理性質(zhì)不同，所以不能用一貫的千篇一律的加氯化鈉的式看穩(wěn)定性，要看最終 T 線顏色的深度。

1. （ 每個(gè)項(xiàng)目期初必須做兩個(gè)條件：1 是先加碳酸鉀后加抗體；2 是先加抗后加碳酸鉀，每種抗體不同，先后順序直接決定線條的有無(wú)）。
2. 當(dāng)標(biāo)記時(shí)或者吹干后出現(xiàn)發(fā)紫，發(fā)灰，用保護(hù)劑便可解決 。

4，1%K2CO3 配置是 1g 碳酸鉀加到 100ml 水里。

目前發(fā)現(xiàn) RACT,FF（3C11），cap(11E11), cpfx(7E6), TC（10E5） 等單抗都是先加抗體后加碳酸鉀.

如有疑問請(qǐng)致電山東綠都生物食品安全檢測(cè)事業(yè)部 武經(jīng)理 18266598399