原位檢測膜蛋白與其互作分子間的動態(tài)相互作用特異性和動力學參數(shù),獲得高精度的親合力、解離速率常數(shù)和作用力參數(shù)
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單分子原位動態(tài)定量檢測系統(tǒng)技術(shù)優(yōu)勢
單細胞操控的單分子水平高精度檢測,節(jié)省樣本消耗量;
原位檢測膜蛋白及其配體的分子動力學特性,省去膜蛋白重組純化過程,且結(jié)果更貼近膜蛋白真實的生物學功能;
高靈敏度、高精度、高動態(tài)范圍(解離常數(shù)koff可達10-3 s-1,親和力Ka動態(tài)檢測范圍為10 mM -1 nM,力學分辨率~1 pN);
蛋白樣品免標記,降低對生物大分子相互作用及功能的影響
單分子原位動態(tài)定量檢測系統(tǒng)三大功能
親和力及結(jié)合動力學分析(提供2D親和力及解離速率常數(shù));
分子間相互作用力強度檢測(提供分離兩個分子所需的拉力);
分子間相互作用力壽命(提供在外力作用下結(jié)合力能夠維持的時間);
蛋白樣品免標記,降低對生物大分子相互作用及功能的影響。
單分子原位動態(tài)定量檢測系統(tǒng)核心原理
BFP利用膨脹的紅細胞作為微小“彈簧”,高速相機追蹤紅細胞的形變量,實現(xiàn)實時定量檢測生物大分子間的單分子相互作用。
帶有相應(yīng)受體蛋白的Target細胞通過程序控制的精密位移壓電陶瓷的往復運動與帶有配體分子的Probe小球進行“接觸–撤離”檢測循環(huán),統(tǒng)計粘附事件數(shù)量或配體與受體相互作用的壽命進行分析,得到生物大分子間相互作用的動力學特性。
單分子原位動態(tài)定量檢測系統(tǒng)應(yīng)用領(lǐng)域 各種生物分子的相互作用檢測與動力學特性分析; 生物大分子動態(tài)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的研究; 生物標記開發(fā)與確認,抗體分析; 藥物靶標的篩選、識別、確認、分析與開發(fā); 膜蛋白相關(guān)基礎(chǔ)探索性研究等。 |