Pull Down實(shí)驗(yàn)服務(wù)是在體外條件下檢測分子間相互作用的方法。通過該技術(shù)可以驗(yàn)證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應(yīng)的目的蛋白。Pull down實(shí)驗(yàn)與免疫共沉淀技術(shù)相似，不同之處在于免疫共沉淀技術(shù)是用抗體交聯(lián)磁珠或瓊脂糖，該技術(shù)則利用蛋白與蛋白，蛋白與其他生物分子之間的相互作用進(jìn)行目標(biāo)分子的捕捉和研究。其原理是帶有標(biāo)簽的誘餌蛋白被特異結(jié)合該標(biāo)簽的固相化親和配基捕獲，產(chǎn)生“次級(jí)親和支持物”，用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。通過SDS-PAGE電泳分析，或結(jié)合Western blot驗(yàn)證和LC-MS/MS，對(duì)純化洗脫后的蛋白復(fù)合物進(jìn)行進(jìn)一步鑒定，就能檢測出與誘餌蛋白相互作用的蛋白質(zhì)。
卡梅德生物已經(jīng)建立并完善了GST融合蛋白pull-down技術(shù)和鏈霉素標(biāo)記pull-down技術(shù)，這兩種技術(shù)分別用于蛋白與核酸（RNA/DNA）的研究。
我們的技術(shù)優(yōu)勢(shì)：
--熟練的實(shí)驗(yàn)操作水平，設(shè)置對(duì)照和重復(fù)，排除隨機(jī)干擾因素影響，保證結(jié)果更加可靠；
--使用銀染技術(shù)，靈敏度更高，SDS-PAGE電泳結(jié)果更加清晰；
--具有成熟的蛋白平臺(tái)，提供pull down 產(chǎn)物，融合質(zhì)粒，SDS-PAGE結(jié)果和Western Blot結(jié)果；
--完整的信息分析，提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)報(bào)告，可提供蛋白質(zhì)鑒定結(jié)果（質(zhì)譜結(jié)果）；
--能夠提供從GST蛋白制備到蛋白互作檢測的一站式服務(wù)，節(jié)省客戶寶貴時(shí)間
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卡梅德生物科技（天津）有限公司作為國家級(jí)高新技術(shù)企業(yè)，專注于為全球科學(xué)家和研究機(jī)構(gòu)提供天然蛋白提取與發(fā)酵、重組蛋白定制表達(dá)服務(wù)，單、多克隆抗體開發(fā)，噬菌體文庫構(gòu)建與篩選服務(wù)；同時(shí)，基于我公司成熟的五大核心技術(shù)服務(wù)平臺(tái)，成功研發(fā)了眾多用于科學(xué)研究的重組蛋白、抗體、抗體藥物靶點(diǎn)蛋白、工業(yè)酶、診斷原料等相關(guān)試劑。
核心平臺(tái)：
---噬菌體抗體展示技術(shù)平臺(tái)
卡梅德生物科技有限公司利用自有的噬菌體（M13，T7噬菌體）展示技術(shù)平臺(tái)，能夠?yàn)榭蛻籼峁O具性價(jià)比的重組Vhh抗體（納米抗體/駝?lì)惣{米抗體）制備方案，包括動(dòng)物免疫，文庫建立，文庫篩選以及重組抗體的體外表達(dá)等。
---抗體工程技術(shù)平臺(tái)
卡梅德生物科技的抗體工程平臺(tái)包含單克隆抗體制備服務(wù)平臺(tái)，多克隆抗體制備服務(wù)平臺(tái)，抗體測序與改造平臺(tái)。
單克隆抗體制備平臺(tái)：基于雜交瘤技術(shù)的小鼠單抗技術(shù)平臺(tái)，最快能夠在2-3個(gè)月獲得高親和力與高特異性的單克隆抗體，同時(shí)基于噬菌體展示技術(shù)，我司能夠制備多物種的重組單克隆抗體，包括小鼠，兔子，駱駝，羊駝以及人單抗。
多克隆抗體制備服務(wù)平臺(tái)：能夠?yàn)榭蛻籼峁┩枚嗫�，羊多抗，駱駝�(lì)惗嗫�，牛多抗等多物種的抗體制備服務(wù)，根據(jù)不同的抗原類型，來自卡梅德生物的資深抗體專家會(huì)為您量身定做適合您需求的方案，以滿足您的項(xiàng)目要求并節(jié)省您的寶貴時(shí)間。
抗體一級(jí)序列測序平臺(tái)：為滿足大量客戶對(duì)抗體基因序列與氨基酸序列信息的需求，我們?yōu)榭蛻籼峁〥eNovo抗體全長氨基酸序列解析和N端測序服務(wù)；同時(shí)我們?cè)O(shè)計(jì)積累多達(dá)80種雜交瘤抗體基因測序引物。
抗體改造技術(shù)平臺(tái)：卡梅德生物技術(shù)的抗體改造平臺(tái)包括嵌合抗體制備，抗體親和力成熟以及抗體人源化服務(wù)。目前我們已經(jīng)成功制備十幾例嵌合抗體與人源化抗體，均成功交付。
---蛋白表達(dá)與純化服務(wù)技術(shù)平臺(tái)
卡梅德生物科技目前擁有四大蛋白表達(dá)平臺(tái)，能為客戶提供全面且優(yōu)質(zhì)的蛋白表達(dá)技術(shù)服務(wù)。
哺乳動(dòng)物表達(dá)平臺(tái)： 目前公司擁有FreestyleCHO，ExpiCHO，CHO-DG44，HEK293F，Vero等細(xì)胞系用于蛋白表達(dá)制備。公司秉承質(zhì)量優(yōu)先原則，全部統(tǒng)一采用Gibco細(xì)胞培養(yǎng)基和相關(guān)轉(zhuǎn)染配套試劑，以保證每個(gè)批次的哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)產(chǎn)品高質(zhì)量、高表達(dá)水平的交付。同時(shí)公司擁有的表達(dá)載體體系，遠(yuǎn)高于市面常用蛋白表達(dá)載體，能夠?yàn)榭蛻籼峁└呒兌鹊鞍住?br />
昆蟲細(xì)胞表達(dá)平臺(tái)：目前公司常采用的昆蟲表達(dá)細(xì)胞為SF9，配套使用的是來自Gibco的培養(yǎng)基，只為更快、更好地為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。利用該蛋白表達(dá)平臺(tái)，我們已經(jīng)成功制備了多種人源跨膜蛋白，包括多種GPCR家族成員蛋白。
原核蛋白表達(dá)平臺(tái)
酵母蛋白表達(dá)平臺(tái)：畢赤酵母，釀酒酵母等蛋白表達(dá)體系，適用于需要真核表達(dá)蛋白，同時(shí)兼具產(chǎn)量與性價(jià)比的項(xiàng)目需求特點(diǎn)。
植物表達(dá)平臺(tái)：為了提供更好的服務(wù)，卡梅德生物攜手國內(nèi)頂尖科研單位共同為客戶提供基因煙草瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)的植物蛋白表達(dá)服務(wù)，項(xiàng)目從設(shè)計(jì)構(gòu)建到蛋白表達(dá)只需要4-6周。該技術(shù)平臺(tái)能夠?yàn)榭蛻粼谳^短的時(shí)間內(nèi)獲得高純度，高質(zhì)量的植物來源的蛋白，已解決大部分植物蛋白在上述幾大蛋白表達(dá)系統(tǒng)中不溶或不表達(dá)的難題。
---蛋白批量發(fā)酵與純化平臺(tái)
超高密度發(fā)酵技術(shù)：卡梅德生物科技能夠?yàn)榭蛻籼峁?L，10L,30L，80L體積的貼壁細(xì)胞高密度發(fā)酵技術(shù)服務(wù)（微載體貼壁培養(yǎng)技術(shù)），人源細(xì)胞貼壁細(xì)胞培養(yǎng)密度高達(dá)4x106個(gè)/ml，非常適用于病毒轉(zhuǎn)染類型的蛋白高產(chǎn)量表達(dá)發(fā)酵，能夠做到1g/L發(fā)酵水平。利用該技術(shù)平臺(tái)，我們目前完成的重組抗體發(fā)酵表達(dá)記錄高達(dá)4.7g/L發(fā)酵水平。
同時(shí)，借助有氧發(fā)酵技術(shù)，我們能夠?yàn)榭蛻籼峁┰撕徒湍傅某呙芏劝l(fā)酵服務(wù)，采用有氧發(fā)酵類型的原核發(fā)酵技術(shù)，蛋白產(chǎn)量遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的原核發(fā)酵（相差接近100倍蛋白產(chǎn)量和得率）
蛋白純化技術(shù)平臺(tái)：我司分別配制了Akta和BioRadBiological的蛋白純化儀，同時(shí)擁有GE全套填料，包括Sphedax75/200,500,G25,G100，CMFF,Q-FF，DEAE以及不同規(guī)格的預(yù)裝柱等，能夠在1-2周內(nèi)為客戶完成一套蛋白純化的工藝開發(fā)小試方案。我司的科研團(tuán)隊(duì)成員均來自國內(nèi)生物制藥企業(yè)，碩士博士學(xué)歷占比98%，因此有能力為客戶提供快速，高質(zhì)量天然蛋白和跨膜蛋白的純化等優(yōu)質(zhì)服務(wù)。
---穩(wěn)定細(xì)胞系篩選平臺(tái)與基礎(chǔ)分子生物平臺(tái)
穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建平臺(tái)：卡梅德生物可為客戶定制不同類型的穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建與篩選服務(wù)，如利用Crisper/Cas9的多物種、多細(xì)胞系來源的細(xì)胞沉默，敲除，過表達(dá)等穩(wěn)定細(xì)胞系；同時(shí)我們也為客戶提供基于電轉(zhuǎn)或脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染（Lipofectin2000/3000）的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系構(gòu)建服務(wù)，如CHO細(xì)胞蛋白高表達(dá)細(xì)胞株等。
卡梅德生物的基礎(chǔ)分子生物學(xué)平臺(tái)承擔(dān)了包括基因克隆，蛋白定量，免疫印跡檢測（SDS-PAGE、WB），宿主核酸檢測，蛋白抗體親和純化，ELISA操作，內(nèi)毒素檢測，HPLC分析，免疫組化，IP，免疫濁度，流式細(xì)胞術(shù)等服務(wù)。
