。 通過對免疫動物血清中多抗的測序,可以在體外通過重組合成獲得與抗原結(jié)合最多的單克隆抗體,具有高重現(xiàn)性和可預(yù)測的生物活性,具有十分重要的應(yīng)用。
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多克隆抗體由不同的B細(xì)胞譜系分泌,它們對特定抗原發(fā)生免疫反應(yīng),可識別不同的表位。直接對多克隆抗體樣本測序,是發(fā)現(xiàn)具有高靈敏度、高親和力新抗體的重要步驟。然而,多克隆抗體是復(fù)雜的混合物,且每個抗體是由V (D)J基因重組產(chǎn)生的,帶來的序列高度可變,大約產(chǎn)生 1012~1018的序列可能性,這種復(fù)雜性導(dǎo)致了多抗測序極具挑戰(zhàn)性。
Bioinformatics Solutions Inc.&百蓁生物利用多維色譜分離技術(shù)、多重質(zhì)譜技術(shù)及AI- 驅(qū)動的數(shù)據(jù)分析技術(shù),成功地解決了降低多抗樣本復(fù)雜度和利用質(zhì)譜對蛋白混合物從頭測序的技術(shù)難題。提供了一站式高通量測序平臺 PolySeg.Al,直接對生物樣本進(jìn)行多克隆抗體從頭測序,極大地方便了科研人員從免疫動物甚至人身上獲得具有天然活性的抗體。
1. 多維度液相分離策略有效降低多抗樣品復(fù)雜度,提高分離度
2. 多重質(zhì)譜技術(shù)確保數(shù)據(jù)質(zhì)量和相互可驗證性
3. AI-驅(qū)動的數(shù)據(jù)分析確保序列正確性
4. 多重LC-MS直接對生物樣本進(jìn)行高通量多抗從頭測序
PolySeq.Al 多抗測序技術(shù)平臺,通過3M 技術(shù)策略實現(xiàn)高效、準(zhǔn)確的高通量蛋白從頭測序。通過多重質(zhì)譜技術(shù)的數(shù)據(jù),相互驗證結(jié)果的可靠性,針對抗體/蛋白混合物,實現(xiàn)單次實驗對一級序列從頭測序,翻譯后修飾等抗體理化性質(zhì)的精細(xì)表征。
應(yīng)用實例 - 抗體混合物測序
將Bevacizumab,Adalimumab 和MabThera 按一定比例混合,模擬真實樣品中不同抗體豐度差異,抗體序列、分子量等理化性質(zhì)接近的實際情況,通過多重質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集和AI驅(qū)動的數(shù)據(jù)分析平臺,驗證測序的準(zhǔn)確性和該技術(shù)流程的可靠性。
應(yīng)用實例 ‒多抗測序用于新冠中和抗體發(fā)現(xiàn)
新冠中和抗體是治療新冠病毒(SARS-Cov-2)感染的重要手段之一。直接從新冠康復(fù)病人血清中純化抗體并使用抗體從頭測序策略得到抗體序列,可以快速實現(xiàn)中和抗體的發(fā)現(xiàn)。早在 2020年4月,Bioinformatics Solutions Inc.就已經(jīng)開展了利用多抗從頭測序技術(shù)發(fā)現(xiàn)新冠中和抗體的工作,并成功發(fā)現(xiàn)多條具有中和活性的抗體。
歷經(jīng)四年的技術(shù)迭代,Bioinformatics Solutions Inc. / 百蓁生物建立了一套包含抗體的親和純化富集、多維液相、 多重質(zhì)譜的聯(lián)用分析和基于人工智能算法的 PolySeq.AI 抗體從頭測序平臺。