泰克生物配備了先進的技術(shù),例如與串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用的液相色譜儀 (LC-MS/MS) 和先進的計算算法,可根據(jù)您的需求提供準確、快速的抗體從頭測序服務(wù)。
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泰克生物提供快速專業(yè)的抗體測序服務(wù)(包括:雜交瘤測序,抗體全長測序等),對編碼雜交瘤細胞單克隆抗體重鏈可變 (VH)區(qū)域和輕鏈可變 (VL) 區(qū)域的基因序列進行測序。同時,泰克生物配備了先進的抗體全長測序技術(shù),例如與串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用的液相色譜儀 (LC-MS/MS) 和配套的先進計算算法,可根據(jù)您的需求提供準確、快速的抗體全長測序服務(wù)。
█ 雜交瘤測序服務(wù)
泰克生物提供快速專業(yè)的雜交瘤測序服務(wù),對編碼雜交瘤細胞單克隆抗體重鏈可變 (VH)區(qū)域和輕鏈可變 (VL) 區(qū)域的基因序列進行測序。雜交瘤測序原理:雜交瘤技術(shù)是指建立雜交瘤細胞系的技術(shù),其用于產(chǎn)生大量單克隆抗體,所以又稱單克隆抗體技術(shù)。測序原理是通過RT-PCR技術(shù)從雜交瘤細胞中提取雜交瘤分泌的抗體序列進行分析。
泰克生物可在4-6周內(nèi)完成高通量(NGS)雜交瘤測序,并且為客戶提供所有VH和VL序列以及一份完整的報告,告知客戶雜交瘤細胞單克隆抗體的序列(包括單克隆抗體相對應(yīng)的VH和VL序列的CDR區(qū)序列分析)和可能存在的任何異質(zhì)性或其他抗體同種型。
經(jīng)過雜交瘤測序,可以獲得相應(yīng)的序列,在后續(xù)項目中有需要用到單克隆抗體的時候,可以利用測得的基因序列進行重組抗體的制備。解決了雜交瘤保存過程中,細胞死亡或高特異性丟失的問題。雜交瘤測序,對于進一步的大規(guī)模生產(chǎn)及抗體的人源化等生物工程操作同樣具有重要的意義。
雜交瘤測序服務(wù)流程
項目 |
內(nèi)容 |
交付 |
周期 |
雜交瘤細胞抗體測序服務(wù) |
RNA提取 反轉(zhuǎn)錄 PCR擴增VH和VL序列 測序驗證 基因合成 表達載體構(gòu)建 |
抗體VH和VL序列 分別含有VH和VL基因的表達載體(質(zhì)粒構(gòu)建QC) |
3-4周 |
服務(wù)優(yōu)勢
✔ 適用于任何物種
✔ 使用隨機引物,不會引入突變
✔ 識別所有 VH 和 VL 序列并量化它們的相對豐度
✔ 序列絕對保密性
✔ 高通量方法可同時對多達 50 個雜交瘤進行測序 - 提供批量雜交瘤測序包
✔ 序列在 3-4 周內(nèi)交付
█ 抗體全長測序
有許多單克隆抗體無法獲得雜交瘤細胞系。為了滿足客戶的對未知抗體序列(無雜交瘤細胞系)的測序要求,泰克生物還提供抗體全長測序服務(wù),通過將質(zhì)譜與從頭肽測序和重疊肽組裝相結(jié)合,確定可變域的氨基酸序列?贵w的全長測序是指在事先不知道DNA或蛋白質(zhì)序列的情況下,推導(dǎo)抗體的氨基酸序列并發(fā)現(xiàn)任何相關(guān)的翻譯后修飾的分析過程。
泰克生物保證提供功能性抗體序列以及具有完整序列覆蓋率的綜合測序報告;谥亟M抗體瞬時表達服務(wù),泰克生物可以在短短9周內(nèi)對抗體進行測序并交付相應(yīng)的重組蛋白。
樣本要求
樣本量:100μg單克隆抗體蛋白
濃度:>0.2mg/mL
純度:目標抗體占總蛋白量的95%以上
其他:無相同抗原的抗體蛋白
服務(wù)內(nèi)容
質(zhì)譜測序 |
抗體表達 |
周期 |
交付 |
酶消化成重疊肽; 使用 Thermo Orbitrap 的 LC-MS/MS 肽的從頭鑒定; 肽組裝; |
基因合成 克隆 HEK293 細胞中的瞬時表達 親和純化 緩沖液交換 (PBS) 無菌過濾 純度 >98% (SDS-PAGE) 內(nèi)毒素 < 1 EU/mg |
9周 |
綜合測序報告; >2 mg 純化抗體; QC報告 |
服務(wù)優(yōu)勢
✔ 快速:測序可在10個工作日內(nèi)完成
✔ 高通量:我們的 DASS 方法是高通量兼容的
✔ 專業(yè):科學(xué)家負責(zé)每個項目,并配備專業(yè)團隊在過程的每個步驟進行質(zhì)量控制;專家研發(fā)團隊致力于優(yōu)化協(xié)議以提供更高質(zhì)量的數(shù)據(jù)
✔ 個性化:定制服務(wù)包括但不限于抗體設(shè)計、克隆、從頭測序和分析,以及體外優(yōu)化以滿足您的需求
✔ 準確性高:單獨肽的多個質(zhì)譜讀數(shù)中獲得了強信號峰特征,可以正確識別序列中的每個氨基酸。
✔ 應(yīng)用范圍廣:可用于所有類型的抗體(除了人類)。甚至已被用于對受污染或結(jié)合的抗體或成對具有不同輕鏈的抗體進行測序。
✔ 信息豐富:抗體從頭測序通常會導(dǎo)致檢測到測序中的意外差異或蛋白質(zhì)分子上的新糖基化位點,而DNA測序無法檢測這些差異。