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全基因合成
我們可根據(jù)客戶需求提供全基因合成及其相關(guān)服務(wù)。合成的基因可以根據(jù)客戶的需求連接到不同的載體上，最終提供的產(chǎn)品包括合成報(bào)告、測序報(bào)告、質(zhì)粒酶切圖譜、凍干質(zhì)粒以及含有該質(zhì)粒的菌株。
服務(wù)類別：測序/合成總訪問：2108
最后更新：2009-12-29半年訪問：21
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服務(wù)商： 南京圣比澳生物科技有限公司 查看該公司所有服務(wù) >>
  • 服務(wù)介紹
  • 公司簡介
    目前有許多基因和蛋白質(zhì)的核苷酸和氨基酸序列已得到闡明，人們已經(jīng)可以根據(jù)需要合成出具有實(shí)際應(yīng)用和研究價(jià)值的多肽和蛋白質(zhì)基因。已報(bào)道的合成基因有人生長激素、干擾素、胰島素、表皮生長因子、白細(xì)胞介素 II 、集落刺激因子等，絕大多數(shù)已在原核和真核系統(tǒng)中獲得表達(dá)。
 
合成基因的方式
1 全基因合成：
        分子較小而又不易得到的基因采用該方式。
        將雙鏈基因分成若干寡核苷酸單鏈片段 ( 尤其待合成基因在 100 個核苷酸以上時(shí) ) ，每個片段長度控制在 40 ～ 60 個堿基，并使每對相鄰互補(bǔ)的片段之間有 4 ～ 6 個堿基交叉重疊。
        在體外將除基因兩端末端外的所有片段磷酸化。混合退火后加入 DNA 連接酶，即可得到較大的基因片段。
2 酶促合成：
        又稱基因的半合成。全基因，特別是較大的基因的全部化學(xué)合成成本昂貴，使用半合成的方法可以降低成本，從而利于普及使用。 首先合成末端之間有 10 ～ 14 個互補(bǔ)堿基的寡核苷酸片段，退火后以重疊區(qū)作為引物，在 4 種 dNTP 存在的條件下，通過 DNA 聚合酶 I 大片段 (Klenow 酶 ) 或反轉(zhuǎn)錄酶的作用，獲得兩條完整的互補(bǔ)雙鏈。
合成引物
1. 合成 PCR 引物進(jìn)行基因擴(kuò)增
        PCR 技術(shù)是 80 年代中期發(fā)展起來的一種體外擴(kuò)增特異 DNA 片段的技術(shù)。該法操作簡便，可在短時(shí)間內(nèi)在試管中獲得數(shù)百萬特異 DNA 序列拷貝。 PCR 技術(shù)的特異性取決于所用引物和模板 DNA 結(jié)合的特異性。
2. 序列測定用引物
       DNA 序列測定是分子生物學(xué)中最重要和最精細(xì)的研究技術(shù)，其中最常使用的是末端終止法，即是一種依賴于特異 DNA 引物的序列測定方法。
3. 合成導(dǎo)入突變用的引物
       利用寡核苷酸引導(dǎo)的突變，可在目的 DNA 序列的任何部分產(chǎn)生點(diǎn)突變、插入和缺失，從而使得基因編碼的蛋白質(zhì)在結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生改變。
合成連接子和接頭
        在 DNA 重組中常需要將外源 DNA 片段插入某些載體 DNA 中。如果載體或外源 DNA 上沒有合適的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)，為提高插入效率或?qū)崿F(xiàn)定向克隆，可采用合成連接子 (linker) 和接頭 (adaptor) 的方法。
合成基因在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
        許多疾病，如遺傳性疾病、腫瘤、心血管疾病等可在基因結(jié)構(gòu)上找到某些變化，如基因的缺失、突變、轉(zhuǎn)位，以此作為證據(jù)可對這些疾病作同相應(yīng)的判斷。 目前，合成 DNA 探針已廣應(yīng)用于臨床，成為一種有效的診斷手段。
1 用于遺傳病的診斷
        過去僅有少數(shù)遺傳性疾病可以憑借蛋白質(zhì)和酶學(xué)方面的異常作出判斷，隨著分子生物的發(fā)展，對遺傳病的診斷有了巨大的進(jìn)步，出現(xiàn)了基因診斷法。
　　例如鐮刀狀細(xì)胞貧血癥即是由于 A → T 突變造成β - 珠蛋白第六位谷氨酸變?yōu)槔i氨酸，從而造成珠蛋白結(jié)構(gòu)異常，并引起紅細(xì)胞形態(tài)及對氧的親合力發(fā)生改變。
2 用于傳染病的診斷
        臨床上對傳染性疾病的傳統(tǒng)診斷程序常常是檢測病原體及其抗體，需時(shí)較長，達(dá)不到早期診斷的目的。
　　合成探針在傳染病特別是由病毒感染性所致的傳染病檢測中，已得到廣泛應(yīng)用，尤其是結(jié)合 PCR 方法使診斷的靈敏度可進(jìn)一步提高，目前國內(nèi)已制出檢測乙肝病毒、艾滋病病毒 (HIV) 、輪狀病毒和皰疹疾病等多種基因探針診斷試劑盒。
什么點(diǎn)突變 point mutation ？
        原來是指可與多數(shù)變異體重組的基因內(nèi)的微小部分所謂點(diǎn)的一種突變�，F(xiàn)在則用于作為一般堿基對置換和移碼所造成的突變的總稱。定點(diǎn)突變技術(shù)的潛在應(yīng)用領(lǐng)域很廣，比如研究蛋白質(zhì)相互作用位點(diǎn)的結(jié)構(gòu)、改造酶的不同活性或者動力學(xué)特性，改造啟動子或者 DNA 作用元件，提高蛋白的抗原性或者是穩(wěn)定性、活性、研究蛋白的晶體結(jié)構(gòu)，以及藥物研發(fā)、基因治療等等方面。
什么叫重復(fù)堿基序列？
        約有人類基因組的 99% 被稱作 垃圾 DNA , 他們不作為基因表達(dá) . 低等動物 ( 擬南芥 11%, 線蟲 7%, 果蠅 3%) 的垃圾 DNA 相對較少且在全基因組中平均分布 , 人類基因在廣大的垃圾 DNA 中離散為幾個小組 . 估計(jì)有一個控制基因物理聚集形態(tài)的機(jī)能 , 但迄今為止未被發(fā)現(xiàn)。
　　在重復(fù)序列中最常見的是 Alu , 大約占 10%. 通常重復(fù)序列含有大量 AT 堿基和相對較少 GC 堿基 . 端粒 (telomeres) 或 著絲點(diǎn) (centromeres) 中的其他重復(fù)序列被認(rèn)為參與了染色體保護(hù)和細(xì)胞分裂 . 端粒在細(xì)胞分裂中變短 , 相對較短的端粒組織細(xì)胞分裂 , 這可能跟衰老有關(guān) . 癌細(xì)胞有阻止端粒變短的機(jī)能 , 所以細(xì)胞能無限復(fù)制 . 世界上第一個成年哺乳動物克隆體多莉 (Dolly) 的衰老被饒有興致的關(guān)注 , 因?yàn)樗菑哪阁w細(xì)胞克隆而來 , 端粒已經(jīng)變短。
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