羅氏FFPET組織樣本抽提RNA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

使用3中不同的方法從乳腺癌組織的5um FFPET樣品中抽提總RNA。綠色線顯示了使用該方法抽提獲得的RNA長(zhǎng)片段極少，以RNA降解片段為主�；疑�線顯示的RNA抽提物覆蓋的片段范圍較廣，但在短片段RNA的分布存在較大的偏倚性。

結(jié)果：羅氏High Pure FFPET RNA Isolation Kit的抽提產(chǎn)物（藍(lán)色線）較均勻地覆蓋了整個(gè)片段分布范圍。

圖3：從樣品中抽提獲得高質(zhì)量的RNA，提高RT-aPCR檢測(cè)靈敏度。

作為qPCR實(shí)驗(yàn)中的核酸模板，要求高質(zhì)量的RNA，即良好的核酸得率、純度和片段大小分布，并能高靈敏度和不偏倚地檢測(cè)模板基因的表達(dá)情況。

從3中不同異種移植物切片組織中抽提RNA，取150ng總RNA，使用Transcriptor Universal cDNA Master進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，取10ng cDNA產(chǎn)物通過(guò)LightCycler 480 Real-Time PCR Instrument擴(kuò)增檢測(cè)ALAST基因表達(dá)情況。

結(jié)果：High Pure FFPET RNA Isolation Kit抽提獲得的RNA模板（n=8）能在RT-qPCR實(shí)驗(yàn)中獲得更高的檢測(cè)靈敏度。