小分子化合物的選擇方法、儲(chǔ)存方式和應(yīng)用

為了幫助小可愛(ài)解決開(kāi)學(xué)的 “煩惱” ，小 M 今日特來(lái)解鎖小分子化合物 (說(shuō)白了，就是萌 Cece 為大家整理的小分子產(chǎn)品的使用小貼士，讓省心走進(jìn)科研，速速收藏吧）。  
 
 (1) 同一個(gè)靶點(diǎn)，好多產(chǎn)品   
選擇產(chǎn)品之前，一定要明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康�，小分子抑制�?激活劑大多是依據(jù)具體的信號(hào)通路或者靶點(diǎn)進(jìn)行分類(lèi)的，確定好靶點(diǎn)信號(hào)通路之后，才能準(zhǔn)確的選擇出合適的產(chǎn)品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。當(dāng)然，同一個(gè)靶點(diǎn)會(huì)有好多的產(chǎn)品，這個(gè)時(shí)候該如何抉擇：  
a. 文獻(xiàn)就是 YYDS！文獻(xiàn)自有 everything! ( 見(jiàn)推文：檢索工具總動(dòng)員，總有一款適合你） b. 文獻(xiàn)里居然不多，還好靶點(diǎn)是確定的！這時(shí)可以優(yōu)先選擇生物活性高或者在 MCE 官網(wǎng)排名高的 (排名高的產(chǎn)品往往有過(guò)客戶驗(yàn)證)，當(dāng)然，一千個(gè)科研人，一千個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，具體問(wèn)題具體分析。  
(2) 同一個(gè)產(chǎn)品，不同的形式
鹽形式是活性藥物成分 (API) 存在的一種固態(tài)形式，與游離態(tài)具有相同的活性成分。成鹽可改變化合物的理化性質(zhì)，如溶解度、結(jié)晶度、吸濕性和穩(wěn)定性等，多數(shù) API  常常以鹽酸鹽、甲磺酸鹽、hydrobromide 、富馬酸鹽、醋酸鹽、鈉鹽、鈣鹽、鉀鹽等形式。既然不改變活性，那它們存在區(qū)別到底是什么?  最大區(qū)別的就是溶解度了！(還有個(gè)區(qū)別就是有無(wú)現(xiàn)貨）    
■ 以熱賣(mài)產(chǎn)品 Compound C 為例  
在 2 個(gè)產(chǎn)品都有現(xiàn)貨的前提下，就要從溶解度的角度來(lái)選擇了。從溶解度數(shù)據(jù)來(lái)看，2 個(gè)產(chǎn)品在 DMSO 中的溶解度均為 10 mM。HY-13418A Compound C 在水中需要加酸調(diào)節(jié) pH 才能增加溶解性，而 HY-13418 Compound C 鹽酸鹽形式易溶于水。所以在相同活性的情況下，只是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，那么二者皆可；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，那么優(yōu)先選擇具有水溶性的鹽形式啦！ 

 

再以 HY-12815A (MCC950 sodium) 與 HY-12815 (MCC950) 為例，兩個(gè)產(chǎn)品生物功能一樣，但 HY-12815 沒(méi)有現(xiàn)貨，所以優(yōu)先選擇 HY-12815A。   
(1) 一掃通，通往的順利之路  在拿到產(chǎn)品后，可先瞅瞅產(chǎn)品 COA，COA 上面會(huì)明確標(biāo)明產(chǎn)品的本身形態(tài)：固體 or  液體   小 M 接到客戶反饋：我沒(méi)有買(mǎi)那個(gè) 10 mM*1 mL 規(guī)格的，為什么到手是液體呢？有些產(chǎn)品因?yàn)樽陨砣埸c(diǎn)低，比如維生素 E (熔點(diǎn)在 2-3 °C)，本身就是液體），純度，儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)。當(dāng)然，沒(méi)有紙質(zhì)說(shuō)明書(shū)也沒(méi)關(guān)系。‍‍‍‍ (見(jiàn)推文：‍ 科研助攻：MCE 那些小工具你都會(huì)用嗎？)  
(2) 產(chǎn)品儲(chǔ)存，不糾結(jié)

大多化合物較穩(wěn)定，儲(chǔ)存條件為:固體粉末：-20°C 3 年，4°C 2 年；溶液：-80°C 半年，-20°C 1 個(gè)月 �；蛘唔敹嗉觽�(gè)條件：Protect from light (避光)；Away from moisture (產(chǎn)品易吸潮，需防潮保存)；Stored under nitrogen (充氮?dú)獗４�，產(chǎn)品易被氧化，需要惰性條件保存）當(dāng)然，也有部分 “不安分” 的產(chǎn)品，標(biāo)簽和說(shuō)明書(shū)都注明。

‍‍ *該產(chǎn)品在溶液狀態(tài)不穩(wěn)定，建議您現(xiàn)配現(xiàn)用，即刻使用（不建議配制儲(chǔ)備液長(zhǎng)期保存，最好做到現(xiàn)用現(xiàn)配） ‍‍

 

 

(1) 開(kāi)蓋前離心   在產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中，粉末或溶液可能會(huì)附著到管壁或管蓋上。開(kāi)封前使用離心機(jī)低速離心，可減少產(chǎn)品的損失。   
(2) 產(chǎn)品配置       
■  細(xì)胞實(shí)驗(yàn) ：     
購(gòu)買(mǎi)實(shí)驗(yàn)使用的量很少啦！規(guī)格較小，且產(chǎn)品本身也很穩(wěn)定，可直接按照官網(wǎng)推薦的溶劑 (比較常見(jiàn)是 DMSO, ddH2O, 無(wú)水乙醇等) 配置成母液，可分裝儲(chǔ)存。   

小貼士

多數(shù)產(chǎn)品在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)使用劑量都在 μM 級(jí)別，但是給藥前還是得做好功課，有些藥物，比如 AICAR，3-MA 它們的給藥濃度就是很高哇！0.5-10 mM 是它們的常用劑量。

  有些小可愛(ài)還會(huì)發(fā)現(xiàn)：咦，有些溶劑怎么好生奇怪？DMF？THF？這是什么？非常規(guī)溶劑，莫要一棒子打死，合理利用，一樣是你的好幫手。(見(jiàn)推文：溶劑大比拼——細(xì)胞實(shí)驗(yàn)篇)  
 ■ 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：   害，說(shuō)到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，值得糾結(jié)的點(diǎn)就更多了：  小白：“小 M, 10% DMSO 會(huì)不會(huì)把我的鼠毒死啊”；“小 M, 我的藥是 0.5% CMC-NA 直接溶的，我能一次把多天的溶好嗎？”；“小 M, 我不會(huì)算�。�！”；“小 M, 助溶劑這么復(fù)雜，我怎么設(shè)置對(duì)照？” ......(見(jiàn)推文：小鼠的吐槽大會(huì))  靚M 憂傷中：“小鼠以體重 25 g 為例，正常小鼠沒(méi)有嚴(yán)重免疫缺陷的鼠，200 uL 給藥體系，DMSO 占比 10%：也就是里面有 20 uL，小鼠可耐受，當(dāng)然，體弱小鼠另說(shuō)”；“且不說(shuō)小鼠多天用同一管藥物，發(fā)生污染了小鼠心情如何，更重要的是，家人們，你確定這是可以復(fù)溶么？”；“劑量計(jì)算，何不使用傳聞中的溶解度計(jì)算器？”；“當(dāng)然設(shè)置對(duì)照��！想要實(shí)驗(yàn)做的好，對(duì)照必然少不了！(見(jiàn)推文：對(duì)照設(shè)計(jì)-動(dòng)物實(shí)驗(yàn)篇)" 。   

小貼士

配制溶液時(shí)若出現(xiàn)難溶情況，可以采用水浴加熱 (一般 37 ℃；多肽產(chǎn)品一般控制在 25℃ 左右) 或者超聲 (20-40 kHz，注意是清洗超聲儀器！探頭超聲儀器不推薦，不推薦�。�) 的方式輔助溶解。