從輔料角度評估提高mRNA-LNP穩(wěn)定性的幾點考量
除了基本的LNPs的成分、其他成分如緩沖劑、抗氧化劑、非還原性自由基清除劑(如乙醇)和金屬螯合劑都可用于提高LNPs的穩(wěn)定性。需要評估每種輔料在不同儲存條件下(低于0°C或高于0°C)提高LNPs穩(wěn)定性的程度。
1. 輔料應(yīng)優(yōu)選RNase free級別
為提高mRNA分子穩(wěn)定性，緩沖體系、糖類保護(hù)劑等輔料應(yīng)優(yōu)選RNase free級別，避免RNA酶污染導(dǎo)致mRNA分子降解。
2.Tris/Tris-HCl比磷酸鹽緩沖體系更適用于mRNA疫苗
在0°C以下的儲存條件下，緩沖液的選擇是至關(guān)重要的，因為磷酸緩沖液(用于Pfizer /BioNTech COVID-19疫苗)在冷凍條件下可能會導(dǎo)致pH值漂移高達(dá)3.5個單位，這可能會損害mRNA的穩(wěn)定性，而Moderna的COVID-19疫苗中使用的Tris/Tris-HCl緩沖體系可能具有更穩(wěn)定的效果，且TRIS緩沖液是一種已知的羥自由基清除劑。
此外，根據(jù)Moderna之前的報告，使用Tris可以有效清除體系中由于陽離子脂質(zhì)氧化產(chǎn)生的醛類物質(zhì)，避免醛類物質(zhì)與mRNA的堿基發(fā)生反應(yīng)，從而顯著提升mRNA-LNP體系的長期穩(wěn)定性。
Pfizer /BioNTech的新冠疫苗在后續(xù)的變更中亦將其處方中的磷酸緩沖體系替換為了Tris/Tris-HCl緩沖體系（變更后6劑量規(guī)格處方如下）。上述信息說明Tris/Tris-HCl緩沖體系比磷酸鹽緩沖體系更適用于mRNA疫苗制劑。
3.糖類保護(hù)劑可防止脂質(zhì)納米顆粒聚合
在不同配方的mRNA-LNP穩(wěn)定性研究中，通過凍融循環(huán)，均觀察到脂質(zhì)納米顆粒聚合和藥效喪失的情況，而添加蔗糖和海藻糖等保護(hù)劑可以防止顆粒聚合和藥效喪失。兩種臨床可用的LNP-mRNA疫苗均含有蔗糖作為凍/溶保護(hù)劑。
4.pH值應(yīng)保持在7~8之間
Schoenmaker等認(rèn)為，優(yōu)化初始配方的pH值對mRNA疫苗的穩(wěn)定性也至關(guān)重要，因為mRNA的水解率高度依賴于pH值，mRNA在弱堿性環(huán)境中更穩(wěn)定。此外成品制劑的pH值也決定了mRNA-LNPs的穩(wěn)定性。Pfzer/BioNTech和Moderna的COVID-19疫苗都將成品的pH值保持在7到8之間。
艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽，GMP條件生產(chǎn)，中美雙報，供注射用，超低內(nèi)毒素，DNase& RNase free，符合國際主流藥典標(biāo)準(zhǔn)，助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑的研發(fā)生產(chǎn)與中外申報！
1. 輔料應(yīng)優(yōu)選RNase free級別
為提高mRNA分子穩(wěn)定性，緩沖體系、糖類保護(hù)劑等輔料應(yīng)優(yōu)選RNase free級別，避免RNA酶污染導(dǎo)致mRNA分子降解。
2.Tris/Tris-HCl比磷酸鹽緩沖體系更適用于mRNA疫苗
在0°C以下的儲存條件下，緩沖液的選擇是至關(guān)重要的，因為磷酸緩沖液(用于Pfizer /BioNTech COVID-19疫苗)在冷凍條件下可能會導(dǎo)致pH值漂移高達(dá)3.5個單位，這可能會損害mRNA的穩(wěn)定性，而Moderna的COVID-19疫苗中使用的Tris/Tris-HCl緩沖體系可能具有更穩(wěn)定的效果，且TRIS緩沖液是一種已知的羥自由基清除劑。
此外，根據(jù)Moderna之前的報告，使用Tris可以有效清除體系中由于陽離子脂質(zhì)氧化產(chǎn)生的醛類物質(zhì)，避免醛類物質(zhì)與mRNA的堿基發(fā)生反應(yīng)，從而顯著提升mRNA-LNP體系的長期穩(wěn)定性。
Pfizer /BioNTech的新冠疫苗在后續(xù)的變更中亦將其處方中的磷酸緩沖體系替換為了Tris/Tris-HCl緩沖體系（變更后6劑量規(guī)格處方如下）。上述信息說明Tris/Tris-HCl緩沖體系比磷酸鹽緩沖體系更適用于mRNA疫苗制劑。
3.糖類保護(hù)劑可防止脂質(zhì)納米顆粒聚合
在不同配方的mRNA-LNP穩(wěn)定性研究中，通過凍融循環(huán)，均觀察到脂質(zhì)納米顆粒聚合和藥效喪失的情況，而添加蔗糖和海藻糖等保護(hù)劑可以防止顆粒聚合和藥效喪失。兩種臨床可用的LNP-mRNA疫苗均含有蔗糖作為凍/溶保護(hù)劑。
4.pH值應(yīng)保持在7~8之間
Schoenmaker等認(rèn)為，優(yōu)化初始配方的pH值對mRNA疫苗的穩(wěn)定性也至關(guān)重要，因為mRNA的水解率高度依賴于pH值，mRNA在弱堿性環(huán)境中更穩(wěn)定。此外成品制劑的pH值也決定了mRNA-LNPs的穩(wěn)定性。Pfzer/BioNTech和Moderna的COVID-19疫苗都將成品的pH值保持在7到8之間。
艾偉拓長期穩(wěn)定供應(yīng)注射級海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保護(hù)劑與緩沖鹽，GMP條件生產(chǎn)，中美雙報，供注射用，超低內(nèi)毒素，DNase& RNase free，符合國際主流藥典標(biāo)準(zhǔn)，助力重組蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒載體疫苗、脂質(zhì)體、單雙抗、抗體偶聯(lián)藥物等生物制劑的研發(fā)生產(chǎn)與中外申報！
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