無表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒使用說明書
瀏覽次數(shù):695 發(fā)布日期:2023-9-20
來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
無表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒
描述:
無表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒,由優(yōu)化蛋白提取緩沖液和離心管柱及 2.0ml 接收管組成,能夠快速?gòu)闹参锝M織中提取水溶性蛋白。蛋白提取緩沖液中不含任何表面活性劑和有機(jī)溶劑。使用了離
心管柱技術(shù),提取的樣品體積可以從 50ul-500ul。從植物組織(葉片,種子,軟莖等)中提取無表面活性劑的總蛋白僅需不到 8 分鐘的時(shí)間,得率可達(dá) 1-5mg/ml。
應(yīng)用:
可應(yīng)用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究(LC/MS),IP, ELISA ,2D,等電聚焦,SDS-PAGE, immunoblottings 及其他應(yīng)用。
緩沖液配方:非公開
試劑盒組分
50T: 4T:
1. 25ml DF-裂解緩沖液 1. 1.5ml DF-裂解緩沖液
2. 50 個(gè)離心管柱 2. 4 個(gè)離心管柱
3. 50 個(gè)收集管 3. 4 個(gè)收集管
4. 2 根塑料研磨棒 4. 1 根塑料研磨棒
運(yùn)輸與儲(chǔ)存:
常溫運(yùn)輸,4℃儲(chǔ)存。
重要產(chǎn)品信息
Minute TM 無表面活性劑的植物組織總蛋白提取試劑盒可快速提取水溶性蛋白,蛋白酶抑制劑不是必須加入,但是如果下游實(shí)驗(yàn)需要較長(zhǎng)時(shí)間或者蛋白提取后保存較長(zhǎng)時(shí)間,建議在蛋白提取緩沖液中添加蛋白酶抑制劑。
研究蛋白磷酸化,磷酸酶抑制劑應(yīng)在使用前加入裂解緩沖液中。推薦使用 BCA 法測(cè)定蛋白濃度。
所需附加材料
臺(tái)式離心機(jī)
BCA 蛋白定量試劑盒
操作方法:
以下步驟是從 50-100mg 植物組織(新鮮的葉片,種子,軟莖和根)中提取。干燥的種子樣品需要在水中浸泡 2 天。如果起始量較大或者較小,需按比例調(diào)整相應(yīng)裂解液的用量。
1.將蛋白提取緩沖液和離心管柱及接收管套管放在冰上預(yù)冷。
2.植物葉片樣品,取 50-100mg 新鮮組織,剪碎,卷起或者折疊減小體積放入離心管柱套管中,用 200ul 或 1ml 吸頭反復(fù)擠壓樣品 50-60 次減小體積(樣品小于 50mg 此步驟可忽略),接轉(zhuǎn)第3 步驟。種子樣品(新鮮或冷凍)和軟莖,用鋒利的刀片將其切成小片放入離心管柱套管中,用塑料研磨棒反復(fù)向下按壓扭轉(zhuǎn)研磨 50- 60 次,接轉(zhuǎn)第 3 步驟。
3.加入 50-100ul DF-裂解緩沖液到離心管柱中(注意: 緩沖液使用前請(qǐng)用力搖勻,使沉淀物重懸),用塑料研磨棒反復(fù)向下按壓扭轉(zhuǎn)研磨 50-60 次(注意:塑料研磨棒可以重復(fù)使用,用蒸餾水徹底沖洗干凈,用紙巾擦干)。
4.蓋上蓋子,冰上孵育 5 分鐘。離心機(jī)最高速離心 2-5 分鐘取出。棄去離心管柱,將接收管中蛋白溶液轉(zhuǎn)入新的離心管中保存,無表明活性劑的蛋白提取完成可應(yīng)用于下游實(shí)驗(yàn)。
請(qǐng)注意:部分未完全裂解的組織不會(huì)影響樣品質(zhì)量。