貼壁細(xì)胞不同狀態(tài)下消化培養(yǎng)技巧全攻略

細(xì)胞生長(zhǎng)特性分為兩種，一種是貼壁一種是懸浮，不同的細(xì)胞形態(tài)對(duì)應(yīng)的操作方法也大有不同，今天我們主要講解一下貼壁細(xì)胞的相關(guān)培養(yǎng)技巧。
 

在操作貼壁細(xì)胞的過(guò)程中，消化環(huán)節(jié)確實(shí)至關(guān)重要。消化時(shí)間的長(zhǎng)短需要根據(jù)每個(gè)細(xì)胞的狀態(tài)進(jìn)行精確調(diào)整，以確保細(xì)胞的健康和完整性。消化過(guò)度或消化不充分都可能對(duì)細(xì)胞造成不可逆的影響，因此，了解并準(zhǔn)確判斷貼壁細(xì)胞的狀態(tài)對(duì)于確定消化時(shí)間至關(guān)重要。
 

貼壁細(xì)胞狀態(tài)，分為以下幾種：

1，疏松貼壁細(xì)胞

細(xì)胞傳代密度控制在80%左右最少不能低于60%，消化時(shí)間控制在1-2分鐘左右，傳代后48小時(shí)內(nèi)不要?jiǎng)釉摷?xì)胞，讓其慢慢貼壁，需要觀察時(shí)也要輕拿輕放。
 

如果在液體中還存在未貼壁的細(xì)胞，可以在下次換液時(shí)通過(guò)離心收集這些細(xì)胞。這樣既能保證細(xì)胞的充分利用，又能避免未貼壁細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾。
 

2，容易分化的細(xì)胞

需使用較好的血清培養(yǎng)，盡量讓細(xì)胞生長(zhǎng)密度高一些，消化時(shí)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，變圓后及時(shí)終止消化處理。
 

減少吹打次數(shù)，避免不必要的機(jī)械損傷；輕柔吹打，避免氣泡產(chǎn)生，細(xì)胞呈單個(gè)狀態(tài)即可。

3，生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞

如果細(xì)胞突然生長(zhǎng)緩慢，需考慮是否是試劑的批次問(wèn)題，細(xì)胞污染等可能性。如果本身細(xì)胞生長(zhǎng)較慢，需使用較好的血清培養(yǎng)，必要時(shí)可加大血清濃度（5%-10%左右），傳代時(shí)密度需在80%以上，密度太稀傳代會(huì)直接影響細(xì)胞的生長(zhǎng)周期及狀態(tài)，傳代比例控制在1:2或1:3。

4，聚團(tuán)成長(zhǎng)的細(xì)胞

聚團(tuán)成長(zhǎng)的細(xì)胞不容易生長(zhǎng)滿，在長(zhǎng)到70%-80%左右就可以傳代，消化時(shí)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，細(xì)胞變圓并有少量細(xì)胞脫落即可終止消化，較難消化的細(xì)胞，可以分次消化，相對(duì)增加消化時(shí)間。
 

胰酶作為細(xì)胞貼壁工藝中的關(guān)鍵物料之一，酶活性、有無(wú)動(dòng)物源等因素均至關(guān)重要。逐典TryPLUS消化液作為體外重組表達(dá)的胰酶類似物，與傳統(tǒng)胰酶的消化動(dòng)力學(xué)相似，但區(qū)別與傳統(tǒng)胰酶，具有純度高，細(xì)胞毒性低，細(xì)胞消化溫和等特點(diǎn)，產(chǎn)品無(wú)動(dòng)物源性，無(wú)需胰酶抑制劑，稀釋即可進(jìn)行終止，并且能夠兼容多種細(xì)胞培養(yǎng)體系，定能成為您細(xì)胞培養(yǎng)工藝中的絕佳幫手！
 

逐典TrypLUS消化液優(yōu)勢(shì)

1. DMF備案

2. 非動(dòng)物來(lái)源

3. 室溫貯存，無(wú)需胰酶抑制劑，稀釋即可終止

4. 消化溫和，消化后細(xì)胞活性高

5. 即開即用，方便快捷

逐典TrypLUS消化液應(yīng)用案例