限制性?xún)?nèi)切酶實(shí)驗(yàn)操作中的問(wèn)題及其解決方案

限制性?xún)?nèi)切酶不僅在分子克隆中有著廣泛應(yīng)用，還可以應(yīng)用于疫苗研發(fā)生產(chǎn)、基因測(cè)序、SNP 鑒定、ddPCR 等領(lǐng)域。在往期的內(nèi)容中，我們已經(jīng)介紹了什么是限制性?xún)?nèi)切酶以及內(nèi)切酶的分類(lèi)，本期就來(lái)為大家盤(pán)點(diǎn)一下在使用內(nèi)切酶過(guò)程中最容易出現(xiàn)的問(wèn)題以及解決方法。

限制性?xún)?nèi)切酶的名稱(chēng)通常由其來(lái)源物種的分類(lèi)決定，屬名首字母 + 種名前兩位字母 + 血清型/菌株 + 同菌株的多種限制酶流水號(hào)羅馬數(shù)字。

為了方便大家理解，咱們以 Hind III  為例：

‍‍‍▐  問(wèn)題 1：酶切不完全

▐  問(wèn)題 2：酶切后 DNA 瓊脂糖凝膠電泳呈彌散狀

▐  問(wèn)題 3：膠中條帶與預(yù)期不符

▐  問(wèn)題 4：克隆很少或沒(méi)有

▐  問(wèn)題 5：假陽(yáng)性過(guò)多

限制性?xún)?nèi)切酶在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用非常廣泛，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)遇到的問(wèn)題也多種多樣。有了小 M 給大家總結(jié)的各類(lèi)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題及解決方案，相信大家的實(shí)驗(yàn)會(huì)更加順利~

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