感受態(tài)制備：枯草芽孢桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備實(shí)驗(yàn)

1.  SP 鹽

0.2%( NH₄ )₂SO₄，1.4% K₂HPO₄，0.6% KH₂PO₄， 0.02% MgSO₄·7H₂O， 0.1% 檸檬酸鈉。

 

2.  CAYE (100×)

2 % Casamino acid，10%酵母膏。

 

3.  SPI 培養(yǎng)基

SP 鹽溶液加入1 %體積濃度為50%葡萄糖溶液，1 %體積100×CAYE 溶液。

4.  SPII 培養(yǎng)基

SPI 培養(yǎng)基加入1 %體積50 mmol/L CaCl₂ 溶液，1 %體積250 mmol/L MgCl₂ 溶液。

 

5.  SP-A Salts Solution(500 ml) 

（1）0.4% (NH₄)₂SO₄ ：2 g

（2）2.8% K₂HPO₄·3H₂O ：14 g

（3）1.2% KH₂PO₄ ：6 g

（4）0.2% Trisodium Citrate Dihydrate ：1g

（5）121°C滅菌20 min。

 

6.  SP-B Salts Solution(500 ml)

（1）0.04% MgSO₄·7H2O： 0.2 g

（2）121°C滅菌20 min。

 

7.  100×CAYE Solution(100 ml)

 

（1）2% Casamino acid ：2 g

（2）10% Yeast Extract：10 g 

（3）121°C滅菌20 min。

 

8.  SPI Medium(20 mL)

 SP-A Salts Solution：9.8 mL

 SP-B Salts Solution：9.8 mL

 (1%V)Glucose(50%w/v，115°C滅菌20 min) ：200 μL

 (1%V)100×CAYE：200 μL

 

10.  SPII Medium(6 mL)

SPI Medium：5.88mL

(1%V)50mM CaCl₂ ：60μL

(1%V)250mM MgCl₂：60μL

 

11.  100×EGTA Solution

10mmol/L EGTA 溶液，溶解時(shí)需加少量NaOH 至pH8.0。